第六章 电泳技术

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第六章 泳技术和电用电常 仪泳

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第六章一、概述

电技术和常泳电用 仪泳

egernliazation)

泳( 电电(e泳ectlorhorepis)是指带s荷电溶的质或 )粒 在电场中子着与向本身其带所电荷反的电相 移动极现的。利象电用现象将多泳组分质物离、 移动的现分。利用电泳象现象多组分将质分离物 分、析技的叫做电术泳术技 分(析的术技做叫电技术(electr泳ohorpesi tsehnicue)。可q实现电以泳离分技的术器称 )。仪可以实电泳分现技术的仪器离称)。 之 电为泳(仪之 电泳为(e仪lcerothopressitr)。e )。

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一第 电节泳理原、电一泳的基本原 理某些质物分子会成为电的离子(带或粒子，)),不 某 些物分质子会为成带的电子(或离粒子), 不同的物，由质于带其性质电、颗形粒和状小大同，不 的物同质，由其带于性电、颗粒质状形和大不小同 ，因在一定而电的场 它中们移动方向和移 动速的也不度同，动 速也不同度因，可 此使们它离分。 使它们分。离第一

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节 泳电理原若将带净电荷的粒子Q放入场，电 将带若净电 的粒子放荷入场，电则粒该子到 所粒子的入电场放 电的引力荷为 的电：引力荷： F为引E = 在Q溶中,液动运粒与溶子之间存液阻在 在力溶液 运动中子粒溶液之间与存阻在力F 运动阻粒与溶液子之存间阻力 F阻在6=πηr 当VF=引F时阻EQ= π6ηV r V =Q/E6rηπ由上 可式看出以,子的移粒动速度 泳速动 度上式可以看由 粒子出的移动度(速动泳速度与 电粒的子移速动度 泳动速V)与电度场 强度E()和粒子带所电荷 成正量比而,与子粒半的 和子粒所电带量(Q荷成)比正场强度 和 子所带粒电荷量成正 比 与而子的粒半 及溶液的度粘η)成反(比 径()r及液溶粘度的成反 。 及溶比的液粘度 反成。

比

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第一节电泳 理原、影二电响的泳界因外素(一)电 强度场(二 溶)的pH液 溶值液的H值p Hp ()溶液三离的强子度 ()四电渗作用 五)粒子(的移率 (六迁吸)作附

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用第节 二用常电泳技和术泳电方二、法泳电法方简 指介用滤纸为支作载持体的电方泳。法( )纸一泳电 指滤用作纸支为载体的电泳持方法。 是早最用使区的电泳带 。最是早用的区使带电。泳将滤纸条 水平地架在 设两个装缓冲溶液有的器容之 样品于点滤纸中央 间。,样点于品滤中纸。央当 纸条滤被缓液冲湿润，后滤纸 被条缓液冲润湿，再后 上盖缘密封绝罩，盖上绝缘 密罩封，可由电 泳电即源输入直流压电1 00~1000VV)(1 00~1000V)进V行电泳。060- 2平式电泳卧装置示槽图意

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第二节常 用电泳术技电泳和方法()醋酸二维素纤膜薄泳电 泳时电经过膜的处预、理样、加电、染泳色、电 时经泳膜过

的预理处、加样电、泳染色、 、脱色与透即可明到满得意的分离效。果 脱与透明色可得即满意的到离分效果此电泳。特 点是分离的速快度 点、分是离速度快、电 泳时短、 间泳时电间短样、品用 少量 用。少量。此特别因适 合于理情病况下微量异 常蛋的检白。测 量异微蛋常的检测。06白-03 清血蛋的电白图泳谱

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三)凝胶(泳电二节 第用电常技术和电泳方泳法由带区泳中电生出派一种凝用胶质作物持支进行物 泳电的式，方被称凝胶电为。普通的泳凝电胶泳在板上进泳 的方，被式为称凝电胶泳 行。,以胶凝作为质介。泳中电用常凝的胶葡聚为、糖交以 胶凝为介作。电质泳中用的凝胶为常聚葡糖 联聚、烯丙胺酰琼脂和。糖联 丙烯酰胺聚和琼糖脂。它具有机械强度好 、弹大、 性它有机械强具好、度弹大性 透、、化明学定稳性高 透、、明化稳学定高性无、渗电作用、设 简单、备作用、 设备单、样简量小品(110~μg) 0辨分高率优等点。 (~110μ0g、分辨率)高等优点。0-64 凝胶电0泳图

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常见

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的 常3的见种3凝电胶泳 琼脂 糖凝胶泳电 聚丙酰胺烯胶凝泳 电 S SD-聚烯丙酰胺胶电泳凝聚丙 酰胺烯凝电胶

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泳二节 第常电用泳技和术电方泳(法四)电等焦聚泳 电. 等电1焦聚电泳过 程种利用有一值 梯度的介 一利种用有p值梯H度的 .介质，分离 电等点同的不白质蛋的电技术。泳 离等电分不同的点白蛋的电质泳技。 术将电点等不同的蛋质白混合 加入有物H值梯p的度凝胶介中，质p H值度梯凝胶介的中质 物加入pH有梯度值的凝胶介中，质 电场在经内一过时间段后， 在电内场经一段过时后间，各 分将分组别聚焦在各自电等点相应 pH值的位置，最上，后品样各的 p值H置位，最后上 ，值置上 位组在分自的各等电聚焦成点一条 晰清稳而定窄的。带清晰而 定的稳带窄

。6-05 净电0与荷H的P关系曲线

等

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聚电电泳Mar焦ker 等聚焦电泳电

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二第节常 电泳技术用电泳方和法采两用种同浓度的电不解组质成 (,五) 等速 电 采泳两种不同浓度用的解电质组 成 ，种为一导前解电质，充满个整毛细柱； 一种为管前导电解 ， 质充整满毛个管细 ； 另柱种一 尾随为解质电，于一置的端电槽泳。 为中随电解质尾， 于置端的电一泳中槽 前导。解 电质迁的移高率于任样品组何，分 的迁移率质于高任何样组分品， 后者则 低于任何样 品组分 样品组， , 被分离的分分按其组同不的迁移夹在 中率，间强在电场作用下的， 间中 在强，电场作用的下 各被分，离组在分前导 电质解尾与随解电质之 的空间中隙动，移质之间的空 中隙动，移实现 分离 实。现分。离6-

006 等电泳示意速

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图

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第四节 毛

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细管电泳基本的结和构 分离式模、一细管电泳的相关概念毛 trSngthe ).1电 场度强 E(letrcciF eildSt rngeh)t2. 电泳 淌 度. 4泳电速 5度.电渗流 6. 焦耳 热( Eelcrtoporheict obiMilty ( )lectEorporhtei Vceolity) cFlw,EOFo ()lEctroosmoeic Ftlw,EOoF)H aeint)g (ouJe Helaitn) g.3迁移时 间( Mgratiio nTime Tim))e

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第节四毛 管细电的基泳本结和 构分离模式二毛细、电管的泳基本作工原理 溶液的带电粒中子以高压电场驱动为，力溶液 中带电的子粒高以压电场驱动力为，沿毛 管通道， 细沿毛管通细道以不同，度向与其速所带荷相 电的电极反方迁向移， 反电的极方向迁移并依据样品中，组分各之 间实而现分。 离淌度分配和为上行差异 而实现的分离。

第四

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毛节管电细的泳基本构和 分离结模

0式6-0 毛细9管泳电仪装示置意图

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三、毛管电细的泳点 特1 .高敏灵度2. 速度 3.高高 辨率 4.分 品少 样.5 自动程化高 度6 应.范用围

第广节四 毛管细泳电的基结本构和分 模式

0离6-1 英特0雷 勃——全动自电泳 全自仪动泳仪电

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