血细胞计数及分类的方法及对检验质量的影响

血细胞

血细胞计数及分类的方法及对检验质量的影响

[摘要]目的：探讨血细胞人工计数与仪器计数的差别以及对检验质量的影响。方法：对每份标本分别用人工计数，五分类血液分析仪计数。结果：白细胞通过两种计数方法得出的检测结果都具有统计学意义P<0.05。结论：血常规检验的形态学观察和五分类血细胞分析仪检测两种检测方式都有各自的优点和缺点，对仪器分析后的异常结果进行形态学观察可以很好的提高检验质量。

【关键词】血细胞；人工计数；检验质量

目前，因为在国内医疗单位中血液分析仪的普及，许多基层单位为省时省力，白细胞分类极不认真，大部分以仪器检测结果为最终结果而未进行形态学观察。其结果质量与临床各科室诊断有密切关系，起着不可低估的作用，且血涂片中所见细胞可作为间接的白细胞计数的质控对照，有其重要实用价值。虽然血液分析仪的白细胞分类已达到了相当完善的程度，但染色的血涂片分类，由于可提供许多其它重要信息，特别是能识别各种异常血细胞及血液寄生虫，这是仪器分类不能代替的。国内使用三分类和五分类的血液分析仪较多，也出现了一些影响检验质量的问题，主要表现如下。

一、材料与仪器

1、EDTA-K2抗凝真空管

2、五分类血球分析仪及原装配套试剂。质控品为厂家配套且在有效期以内。 3、1.5％冰醋酸；一次性微量吸管；计数池；

二、方法

1、采用真空采血法抽取静脉血2ml在EDTA- K2抗凝真空管中，充分混匀。检测前清洗机器，质控在控。

2、用1.5％冰醋酸，1：20倍稀释。用一次性微量吸管和计数池。对每份白细胞标本做六次计数，记录四个大方格的白细胞数。

3、血液分析仪的白细胞计数及分类：采用五分类血液分析仪，按仪器操作规程操作，每份标本平行做3次，记录结果。配套试剂均为原装试剂，⑴稀释液；⑵溶血素；⑶清洗液；⑷散射包；⑸五分类质量控制全血。

4、结果分析见表：

手工与五分类结果对照表（n=20，X±S）

类

别 WBC(109/L) N(%) L(%) M(%) E(%) B(%) CV% 手工 4.22 ±1.2 0.65±0.11 0.33±0.2 0.04±0.01 0.01±1.1 0.0± 0.98 五分类 4.21±1.1 0.56±1.3 0.32±0.25 0.12±1.22 0 0 2.2 P<0.05 血液分析仪的白细胞分类计数，已由细胞大小的粗略分类发展为依靠高新技术的五分类，进入到可与目视显微镜分类相当的水平。国外曾作过多种五分类血液分析仪与目测分类的比较⑵，中性粒细胞仪器分类变异系数(CV)在1.1%～2.1%，目测分类CV在3.6%；淋巴细胞仪器分类CV在1.6%～3.7%，目测分类CV在6.2%；嗜碱性粒细胞的精密度较差，仪器分类CV可达50%，目测分类的CV也达54.4%。

血细胞

1、50份标本共重复330次，其中199次在士1SD内，可靠性概率为60％，297次在±2SD以内，可靠性概率为90％，33次在土2SD以外，基本上符合正态分

布曲线。

2、白细胞在计数池内四个大方格高低差数随白细胞数增多而增大。

3、SD随白细胞数增高而增大，SD与白细胞数并非成倍性增加。

四、讨论

在人工充池计算血细胞数量的过程中，由于像配置1.5%冰醋酸、对血细胞1:20倍稀释等过程中都要全手工操作，其中难免造成误差，而且通过这些繁琐的步骤检测出的结果的误差就更大了。白细胞在计数池内的分布均匀是相对的，不均匀是绝对的，故提示在计数池中数两个大方格X100或数一个大方格X200均会使SD成倍增加，明显影响精密度。人工计数的过程数计数池的细胞量需要比较长的时间，不能做到短时间检测大量标本。血细胞仪器计数则可以降低误差，而且可以在短时间内计算出结果，现阶段的五分类仪器可以达到每小时100个标本的工作量，增高的工作效率。所以现代的医疗单位普及了以血细胞分析仪为血常规的主要检测方式。

但是，血细胞分析仪是通过对细胞的形态而不是对细胞的性质进行RBC、WBC、PLT判断和分类的。而仪器对异常细胞的检测范围是很有限的。即使是精确性很高的五分类仪器，也只能分辨WBC的中性、淋巴、单核、嗜酸、嗜碱性细胞。对某些血液疾病、血细胞结构异常、中毒颗粒、异形淋巴细胞、欧氏小体和血液寄生虫等，是无法识别的。这对于较健康的、血细胞形态正常的人的标本来说，其检测结果基本是正确的。但对患有不同血液病的标本、各方面的因素就会影响到仪器分辨血细胞的准确性。所以为防止对一些疾病的漏检、确保血液常规检测的质量，必须建立对异常结果的复核程序——血液涂片镜检和人工计数的程序。但，也并不是说对每一份标本都需要分类镜检复检。在排除仪器、试剂及人工因素造成的误差外，我们结合实际和有关资料，将必须复核和适应显微镜检的情况归纳：

(1)RBC系统：RBC与Hb或HCT不协调；RBC过多或过少；MCV, MCH, MCHC明显异常。RBC直方图非正态分布；有双峰、多峰；均值偏高。均应作血片镜检，观察RBC形态、大小，看是否符合仪测结果和贫血的结论。(2)WBC系统：WBC直方图30fL前区出现不应有的峰、缺峰、低值线过高、谷线缺失、高值线过高、单核区域增高应作镜下WBC的总数复核。患者不明原因的发热，在未用抗生素时，WBC总数正常、分类正常或分类显示粒细胞高、淋巴细胞少时。WBC总数异常高，中性>95%、淋巴<5％或仪器未分类者，应作镜下WBC总数的复核和血片镜检分类，以防止漏检血液病和血液寄生虫病。(3)PLT系统：PLT直方图出现多峰；波形参差不齐；峰谷过高；右侧出现异常峰。PLT计数过多或过少；仪器提示PLT有聚集情况；PLT值较高、MCV值较少时。应用显微镜对PLT总数进行复核，并血片镜检观察PLT形态、大小有无异常。(4)高胆红素，高乳糜血症者，MCHC>350 fL时，应将血浆用生理盐水置换后再作仪测复检。(5)已知患者有糖尿病、肾小球肾炎、血液病和化疗者在治疗中监测血常规时应作RBC、WBC、PLT人工计数和血片镜检。(6)结果报告：中出现警号时。

而在形态学观察分类血细胞时，一个有长期临床经验的的检验人员可以通过镜检来准确的区分血细胞的正常或病理状态下的血细胞形态，可与血细胞分析仪分类的结果进行对照，还可以达到质量控制的作用。使得在血常规的最终结果更加准确可靠。

血细胞

由上述可见：血常规检验的形态学观察和五分类血细胞分析仪检测两种检测方式都有各自的优点和缺点，对仪器分析后的异常结果进行形态学观察可以很好的提高检验质量。

【参考文献】

顾玉琴.血细胞分析中应包括涂片染色镜检观察[J].上海医学检验杂志,1995,10(3):141.

本文来源：https://www.bwwdw.com/article/a8o1.html