传染性支气管炎病毒的分子生物学特性及其弱毒疫苗的研究进展

传染性支气管炎病毒的分子生物学特性及其弱毒疫苗的研究进展

（）：中国畜牧兽医　２０１５，４２６１５８７１５９１－

Ｃｈｉｎａ　Ａｎｉｍａｌ　Ｈｕｓｂａｎｄｒ＆ＶｅｔｅｒｉｎａｒＭｅｄｉｃｉｎｅｙ　ｙ　

ｄｏｉ１０．１６４３１．ｃｎｋｉ．１６７１７２３６．２０１５．０６．０３９－ｊ

传染性支气管炎病毒的分子生物学特性及

其弱毒疫苗的研究进展

２，３２３２２，３２，３＊

，，，，，闫艺婷１，勾肖晶１，刘　静１，黄亚明１，杨激辉１，刘兴友１，

（河南科技学院动物科学学院，新乡４畜禽智能化清洁生产河南省工程实验室，新乡４１．５３００３；２．５３００３；

）动物病毒病防控与药残分析河南省重点学科开放实验室，新乡４３．５３００３

摘　要：传染性支气管炎是一种急性、高度接触性传染病，被世界动物卫生组织（列为Ｂ类疫病，对世界养禽ＯＩＥ）业的发展造成了严重威胁。目前，传染性支气管炎的主要预防措施仍然是接种疫苗，但由于传染性支气管炎病毒具有血清型众多、变异速度快且交叉保护性弱等特点，使得传染性支气管炎的防制一直是养禽业面临的重大难题。文章主要对传染性支气管炎病毒的分子生物学特征及其弱毒疫苗的发展历程和免疫策略等方面进行了阐述，以期为新型传染性支气管炎弱毒疫苗的开发及应用提供科学参考。关键词：传染性支气管炎病毒；弱毒疫苗Ｓ蛋白；Ｍ蛋白；Ｎ蛋白；

（）中图分类号：Ｓ８５２．６５　　　　文献标志码：Ａ　　　　文章编号：１６７１７２３６２０１５０６１５８７０５－－－

ＲｅｓｅａｒｃｈＰｒｏｒｅｓｓｏｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｉｃａｌＣｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓａｎｄ　　　　　　ｇｇ

ＡｔｔｅｎｕａｔｅｄＶａｃｃｉｎｅｏｆＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓＢｒｏｎｃｈｉｔｉｓＶｉｒｕｓ　　　　　

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，Ｃ４５３００３ｈｉｎａ；３．ＡｎｉｍａｌＶｉｒａｌＤｉｓｅａｓｅＣｏｎｔｒｏｌａｎｄ　ＲｅｓｉｄｕａｌＡｎａｌｓｉｓ　Ｈｅｎａｎ　ＨｉｈｅｒＥｄｕｃａｔｉｏｎ　　　　　　ｙｇ

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ｒａｖｅｏｕｌｔｒｒｉｍａｒｒｅｖｅｎｃｌａｓｓｉｆｉｅｄａｓＢｌｏｅｍｉａａｎｄｃａｕｓｅｓａｔｈｒｅａｔｔｏｔｈｅｉｎｄｕｓｔｒ．Ｎｏｗ，ｔｈｅ　　　　　　　　　　　　－ｇｐｙｐｙｐｙ　　ｔｉｏｎｍｅａｓｕｒｅｓｏｆＩＢａｒｅｖａｃｃｉｎｅｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ．Ｗｉｔｈｔｈｅｄｉｖｅｒｓｉｔｏｆｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓｖｉｒｕｓ（ＩＢＶ）　　　　　　　　　　　ｙ　

，，ｓｅｒｏｔｅａｎｄｅａｓｖａｒｉａｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｗｅａｋｎｅｓｓｏｆｃｒｏｓｓｒｏｔｅｃｔｉｏｎｔｈｅｒｅｖｅｎｔｉｏｎａｎｄｃｏｎｔｒｏｌｏｆＩＢ　　　　　　　　　　　　ｙｐｙｐｐ　，ａｍａｏｒｉｎｉｎｄｕｓｔｒ．Ｉｎｔｈｉｓａｒｉｔｉｃｌｅｉｔｓｕｍｍａｒｉｚｅｄｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｂｉｏｌｏｉｃａｌｒｏｂｌｅｍｏｕｌｔｒｗｅｒｅ　　　　　　　　　　　ｊｙｇｐｐｙ　

，ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓａｎｄｔｈｅｄｅｖｅｌｏｍｅｎｔａｎｄｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎｓｔｒａｔｅｏｆｔｈｅａｔｔｅｎｕａｔｅｄｖａｃｃｉｎｅｏｆＩＢｔｏ　　　　　　　　　　　ｐｇｙ　ｒｏｖｉｄｅｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓｆｏｒｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈａｎｄａｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＩＢａｔｔｅｎｕａｔｅｄｖａｃｃｉｎｅ．　　　　　　　　　　　ｐｐｐ

：；；；；ＫｅｗｏｒｄｓｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓｖｉｒｕｓＳｒｏｔｅｉｎＭｒｏｔｅｉｎＮｒｏｔｅｉｎａｔｔｅｎｕａｔｅｄｖａｃｃｉｎｅ　　　　　　ｐｐｐｙ　，是ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓＩＢ）　　传染性支气管炎（　

造成鸡的呼吸道、泌尿道和生殖道感染的一种病毒性疾病，是由传染性支气管炎病毒（ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎ　－，引起的一种急性、高度接触性、传ｃｈｉｔｉｓｖｉｒｕｓＩＢＶ）　

染性疾病。该病临床症状表现为咳嗽、打喷嚏、生长发育迟缓、产蛋量下降和蛋品质下降等，还可造成鸡免疫机能下降，继发感染多种疾病，发病率和死亡率都很高，严重阻碍了世界养禽业的健康发展，已被世

收稿日期：２０１４１１２０－－

）；）基金项目：国家自然科学基金（河南省高校科技创新人才支持计划（３０７７１６０１２００９ＨＡＳＴＩＴ０１０

，：作者简介：闫艺婷（女，河南安阳人，硕士生，研究方向：动物分子病毒学，１９８９Ｅ－ｍａｉｌ９９２４９５１６９＠ｑ．ｃｏｍ－）ｑ

，：刘兴友（男，重庆人，博士，教授，硕士生导师，主要从事动物传染病研究，１９６３Ｅ－ｍａｉｌｌｘ６３＠ｈｉｓｔ．ｅｄｕ．ｃｎ＊通信作者：－）ｙ

传染性支气管炎病毒的分子生物学特性及其弱毒疫苗的研究进展

１５８８

中　国　畜　牧　兽　医４２卷　

界卫生组织列为Ｂ类疫病。该病一年四季均可发生，主要在寒冷的冬季多发，各种年龄和品种的鸡都易感，雏鸡发病率可达７蛋鸡产蛋后发５％～９０％，病率和死亡率显著降低，ＩＢ可通过呼吸道和粪便一周内可全群感染发病。由于Ｉ快速传播，ＢＶ的血清型众多，虽然接种疫苗使血清中产生的抗体水平较高，但各型之间的交叉保护性仍然很弱甚至没有，表明随着Ｉ给该病ＢＶ血清型的不断出现，使得新型疫苗的的防控带来了更加严峻的挑战，研发迫在眉睫。

ＩＢＶ于１９３０年在美国北达科塔州被首次发现，

并证实为病１９３１年由Ｓｃｈａｌｋ和Ｈａｗｎ首次报道，

毒性传染病。在病毒的长期演化过程中出现了不同且各型之间差异较大，免疫保护性较弱，的血清型，

从而导致ＩＢ一直未得到很好的控制。近年来出现的ＩＢＶ新型毒株有：２０１２年在埃及发现的新型ＩＢＶ毒株，经过基因测序比对，其Ｓ端发生了１基因的３′导致了该病的快速传播，且控制该毒株引起的突变，

［］

ＩＢ仍然停留在本土疫苗的研究１；２０１３年在意大利北部出现的Ｉ导致病死率突增，同时出现ＢＶ　Ｑ１株，２］

；周全鸡肾脏组织的坏死和腺胃的淋巴细胞渗出［

３］

等［研究发现国内两株新型ＩＢＶＳ１基因的突变是

个氨基酸组成，约９病毒中０ｋｕ。Ｓ１参与血凝抑制、和、组织嗜性等多个方面，且Ｓ１基因的变异是造成ＩＢＶ各血清型之间差异的主要原因。Ｓ２由６２５个

约８镶嵌在病毒囊膜上，将Ｓ氨基酸组成，４４ｋｕ，１蛋白稳定的锚定在病毒的膜上，形成Ｓ１的柄。Ｓ１蛋白上携带着两个额外的抗原决定簇区域，分别位于第２９４—３１６和５３２—４３７位氨基酸处。此外Ｓ２

蛋白上也携带一个额外的抗原决定簇，位于第这些特异的氨基酸位点，对５６６—５８４位氨基酸处，

［］

研究新型ＩＢ弱毒疫苗具有参考价值５。

［］

Ｐｈｉｌｌｉｓ等６对鸡胚致弱的ＩＢＶ全长基因组序ｐ列进行分析，结果发现非结构蛋白的３端的突变率′

为３其中Ｓ基因在Ｉ４．７５％～４３．６６％，ＢＶ弱毒诱变所研制中占５．８％～１３．４％。这些位点发生突变，的弱毒疫苗在临床上不会引发Ｉ这可能是因Ｂ感染，为该段基因会使病毒的复制减慢。试验结果表明，唾液酸是ＩＢＶ的Ｓ１蛋白入侵宿主细胞重要媒

［］７］

。Ｃ介［对ａｌｌｉｓｏｎ等８通过交错延伸技术（ＳｔＥＰ）结果发现ＳＳ１基因序列进行分析，１序列的重组数为５、点突变数为１．这为Ｉ３，Ｂ活疫苗的研究提供了

［９］技术支撑。Ｈｕａｎ１、Ｓ２基因序列ｇ等研究发现Ｓ

分别发生了２～６和２～３个氨基酸的突变，这致使在ＩＩＢＶ的毒力减弱。有报道称，ＢＶ　Ｈ１２０疫苗株

这是Ｉ的基础上突变Ｓ基因，ＢＶ对环境进化适应而

１０］

。Ｓ蛋白以化学结合的方式镶重组造成的变异［

／与Ｈ源于国内Ｊ２、Ｑ１、Ｔ３疫苗株，１２０和４９１疫苗

４］

株亲缘关系较远；孙美玉等［对国内广为流传的肾型Ｉ结果发现ＢＶ　ＱＤ株Ｓ１基因序列进行比对分析，

这为国内疫苗株同样与国内肾型株亲缘关系较近，

的研究带来了新的挑战。综上所述，传统的疫苗已不能控制该病的发生，接种新型弱毒疫苗是控制该病的重点。

表明Ｓ嵌在组织或细胞的胞外，２亚基很有可能没有一个独立的受体结合位点。换句话说，同源性病毒最终决定Ｓ蛋白的Ｓ１和Ｓ２亚基之间的相互作用，

１１］

。了该病毒的亲和力、特异性和宿主的范围［１．２　Ｍ蛋白

蛋白是病毒外膜的主要成分，由ｍＲＮＡ４编码，，分子质量为２３～３５ｋｕＭ蛋白的Ｎ端有两个糖基

化的位点，不同的糖基化位点是由ＩＢＶ毒株Ｍ基因中碱基的替换、重组、插入、缺失所造成的，该糖基化位点是高度保守的。Ｍ蛋白是横跨囊膜的转膜蛋白，大部分位于囊膜的内侧，仅有Ｎ端糖基化的一小部分暴露在囊膜外。粗面内质网和高尔基体是诱导白Ｍ蛋白出芽的主要位点。Ｍ蛋白与抗感染、

细胞产生α－干扰素等有关。Ｍ蛋白的抗体在有补体存在时可以中和病毒的感染，且Ｍ蛋白还能诱导

对Ｉ细胞介导免疫应答，ＢＶ的防制具有重要的意

［２］

义。Ｍ研究发现，ａｓｔｅｒｓ１Ｍ蛋白参与Ｓ蛋白的定

１　ＩＢＶ的分子生物学特性

冠状病毒属的成员，其基因ＩＢＶ是冠状病毒科、

组为不分节段单股正链ＲＮＡ病毒，全长约。分别是纤突２６．７ｋｕＩＢＶ有４种主要的结构蛋白，

）、、、膜蛋白（核衣壳蛋白（小囊膜蛋白蛋白（ＳＭ）Ｎ）（。其中Ｓ蛋白是高变区，是抗原决定簇的集中Ｅ）

可保护不同区域；Ｎ蛋白有较多的交叉免疫原性，血清型之间的感染；免疫原性较低；Ｍ蛋白较保守，Ｅ蛋白在黏膜免疫中发挥作用。１．１　Ｓ蛋白

在Ｓ蛋白位于病毒囊膜表面呈放射状排列，是ＩＩＢＶ入侵机体时发挥着重要的作用，ＢＶ抗原决

定簇变异的主要集中区域。Ｓ蛋白是ｍＲＮＡ编码，分为Ｓ１和Ｓ２两种亚单位糖蛋白。Ｓ１由５２０～５３８

位和病毒样颗粒（的形成。但Ｍ蛋白的免疫ＶＬｐ）

原性较弱。

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　６期闫艺婷等：传染性支气管炎病毒的分子生物学特性及其弱毒疫苗的研究进展

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１．３　Ｎ蛋白

由ｍＲＮ蛋白位于病毒粒子的内部，ＮＡ６编码，，分子质量约为４其氨基酸组成中，碱性磷酸酶６ｋｕ、。约占１包括１７％，９９个Ｈｉｓ４２个Ｌｓ和３个Ａｒｙｇ与病毒ＲＮ蛋白是唯一位于囊膜内的蛋白，ＮＡ结

合形成核衣壳。Ｎ蛋白是该病毒基因组序列中相在细胞免疫和体液免疫过程中，对保守的序列，Ｎ

１３］

蛋白可以识别免疫靶位。张淑霞等［通过试验证

的ＩＢＶ起到很好的保护作用。各个国家根据当地的特异性毒株制备得的传代弱毒疫苗也有效的控制了该病的传播。如美国的Ａ澳大ｒｋ９９、ＧＡ９８毒株，／韩国的ＫＭ这些利亚ＶｉｃＳ、Ｎ１８８毒株，９１毒株等，毒株都是在正常的孵化条件下通过鸡胚连续传代致弱获得的弱毒株，这些毒株均具有良好的免疫原性。国内许多学者也根据当地的Ｉ通过鸡胚传ＢＶ毒株，代的方法制备免疫效果良好的弱毒疫苗。孙银华

２０］

等［研制的Ｗ经试验结果表明具有良９３弱毒株，好的免疫保护效果。

明了Ｎ蛋白存在着广泛的点突变，ＩＢＶ的突变不是单一基因的突变，而是整个基因组的变异，第９１８—９３３位氨基酸是Ｎ蛋白的高变位点。研究发现，Ｎ蛋白Ｎ末端的４个区域和ＮＰ２的第７２—８６位氨基

１４］

。１，酸能诱导机体发生迟发型变态反应［８－桉树

２．２　改变生长条件获得ＩＢ弱毒疫苗

１９７７年，Ｃｕｍｍｎｉｎｇ等首次报道经冷适应的方法致弱了Ｉ即将病毒接种于３ＢＶ，１℃孵化的鸡胚，传代后，该病毒的致病力明显降低。４８ｈ后收毒，

［１］

将肾型ＩＹａｃｈｉｄａ等２ＢＶ通过逐步降低孵化温度，获得了具有较高免疫活性的肾型ＩＢＶ弱毒疫苗。

２２］

李永清等［将ＩＢＶ接种鸡胚尿囊液，３２℃孵化

连续传代，所收４８ｈ，Ｔｕ株传４６代，Ｘ１株传５１代，

脑独特的空间结构可有效改变ＩＢＶ　Ｎ蛋白和ＲＮＡ之间的绑定关系，使其具有明显的抗Ｉ可ＢＶ能力，

［５］

。研究结果表以作为一种治疗ＩＢ的有效性药物１

明，重组Ｎ蛋白可以在昆虫杆状病毒中被表达，且

能满足再生产的大量需要，通过ＥＬＩＳＡ反应能准确进一步说明了Ｎ蛋白可以的发现鸡血清中的抗体，

［６］

。作为ＩＢＶ诊断的依据１

集病毒尿囊液对雏鸡的致病性明显减弱，对鸡胚的适应性提高，且Ｔ对雏ｕ株出现稳定性增高的趋势，具有作为商品化弱毒疫苗的鸡的保护率达到９０％，基本条件。有报道称通过热激也可以致弱ＩＢＶ。

［３］

将一株新型的Ｉ在鸡胚接Ｊａｃｋｗｏｏｄ等２ＢＶ毒株，

，接种１仅传种前，５６℃水浴５～６０ｍｉｎ０日龄鸡胚，

１．４　Ｅ蛋白

在病毒中的含量较Ｅ蛋白也称为小囊膜蛋白，

少，结合于病毒的囊膜上。由ｍＲＮＡ３的开放阅读编码，分子质量为１框３（ＯＲＦ３）２．４ｋｕ。１９８５年，首先发现Ｉ直到１ＢＶ基因组中存在Ｅ基因，９９１年

［７］才报道出Ｅ蛋白。Ｃ证实了，ｒｏｓｅ等１Ｅ蛋白在病

具有良好的稳定４～８代便可制得ＧＡ０８弱毒疫苗，

２４］

且用时较短。陈明艳［将新发现的性和安全性，

此后每代经ＩＢＶＺＺ２００４通过鸡胚低温传至２５代，　

再接种鸡胚，传至５７℃水浴２０ｍｉｎ后，３７℃孵化，得到弱毒株Ｉ对雏鸡不具有致病３５代，ＢＶＺＺＶ３５，　－

经初步试验证明Ｉ性，ＢＶＺＺＶ３５具有生物安全性　－和良好的免疫原性，具有作为弱毒疫苗的潜力。２．３　反向遗传学技术获得弱毒疫苗随着分子生物学的发展，尤其是反向遗传学技术的不断成熟，通过反向遗传学技术获得人们需要

［５］

的疫苗是未来防制Ｉ利Ｂ的最新趋势。Ｚｈｏｕ等２

参与了病毒粒子的形成，且在感染毒复制过程中，

这可能与感染细胞的凋亡ＩＢＶ的细胞中大量存在，

有关系。有研究结果表明，ＩＢＶＥ蛋白的疏水结构　能改变细胞膜的离子通道，是ＩＢＶ感染性病毒粒子

１８］

。释放的重要蛋白［

２　ＩＢ弱毒苗的研究历程

２．１　鸡胚传代研制的弱毒疫苗

早在１美国首次成功研制鸡胚传代弱毒９５０年，具有良好的免疫原性，至今疫苗Ｍａｓｓ型Ｍ４１株，

［９］

Ｍ４１弱毒疫苗的使用还是极为广泛。王新卫等１将Ｍ得出不同代次的Ｍ４１株鸡胚传代，４１株免疫

可以用来制备疫苗和建立种子原性仍然保持良好，

批。此外，荷兰Ｈ１２０和Ｈ５２株也属于Ｍａｓｓ血清

型，是通过鸡胚３７℃连续传至第１２０和５２代获得的弱毒疫苗，至今仍被广泛使用。Ｈ１２０株是温和可接种１日龄的雏鸡，型疫苗，Ｈ５２株可做两次免疫的疫苗，具有良好的免疫效果，能对Ｍａｓｓ血清型

用反向遗传学技术成功拯救出Ｉ其生物ＢＶ　Ｈ１２０，命名为Ｒ－Ｈ免疫保学活性与亲本株极为相似，１２０，护率提高到８是新型５％，Ｒ－Ｈ１２０将作为病毒载体，疫苗的研究分子基础。２刘兴友等发现了一００４年，株对鸡和鸭均具有感染性的Ｉ并ＢＶＺＺ２００４毒株，　应用长距离Ｒ利用反向遗传学技术，Ｔ－ＰＣＲ方法，

获得了该毒株的感染性克隆，这为ＩＢＶＺＺ２００４的　基础性研究提供了技术平台，也为其疫苗研究提供了技术支撑。

传染性支气管炎病毒的分子生物学特性及其弱毒疫苗的研究进展

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２．４　病毒重组活载体疫苗

中　国　畜　牧　兽　医４２卷　

外，由黄芩、双花、鱼腥草、甘草、板蓝根组成的中药方剂与西药（病毒灵）相比，更能提高雏鸡感染ＩＢＶ的非特异性免疫，包括巨噬细胞的吞噬能力和免疫

２８］

。另外，器官的发育［实践中含中药成分的清瘟散［９］

。等方剂对ＩＢ也有很好的治疗效果２

在反向遗传的基础上重组活载体疫苗不断发展成熟，且具有良好的安全性和稳定性，为多价苗的研

［６］

将重组弱毒株发开启了一个新的方向。Ｔｏｒｏ等２

新城疫病毒（与ＩｒＬＳ）ＢＶ　Ｓ２基因重新连接组成新的重组病毒，能使新城疫的致病性减弱，且接种该病

［２７］

将ＱＸ毒能提高ＩＢＶ的交叉保护率。Ｚｈａｎ－ｇ等

ｌｉｋｅＩＢＶＳ１基因插入到重组鸡马立克病毒（ＭＤＶ）　

４　展　望

在养禽业中，使用弱毒疫苗防控ＩＢ已有６０～对Ｉ７０年的历史。在这漫长的岁月里，ＢＶ的认识不

断加深，但Ｉ原Ｂ仍是养禽业亟待解决的重大难题，血清型众多、交叉保护性因是ＩＢＶ的变异速度快、弱甚至没有。Ｓ基因是造成ＩＢＶ血清型出现差异的主要区域，且易在低温下诱变，这是否与该病在寒冷的季节多发而出现新型毒株有关仍需进行进一步的研究。生产实践中Ｍａｓｓ型疫苗是预防该病的主

随着Ｉ新血清型Ｉ力军。然而，ＢＶ的发展，ＢＶ的不断出现，弱毒疫苗已成为控制该病的主要手段和有效方法，在生产中有着举足轻重的地位，应加快弱毒疫苗的研究，提高ＩＢ弱毒苗的免疫效果是该病防制中的研究热点。目前，且大ＩＢ的暴发依然很普遍，部分是由于该病的交叉保护性弱甚至没有。因此，不仅要大力推广Ｉ还需要加强其Ｂ弱毒疫苗的应用，疫苗研究工作的支持。参考文献：

［，１］ｂｄｅｌｏｎｅｉｍ　ＡＳＡｆｉｆｉＭ　Ａ，ＥｌａｄＭ　Ｆ．Ｅｍｅｒ　Ａ－Ｍ　　－Ｋ－ｙ　

ｏｆａｎｏｖｅｌｏｆａｖｉａｎｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｅｎｃｅｅｎｏｔｅ　　　　　　　　－ｇｇｙｐ］ｔｉｓｖｉｒｕｓｉｎＥｔ［Ｊ．ＡｒｃｈｉｖｅｓｏＶｉｒｏｌｏ２０１２，　　　　ｇｙｐｆ　ｇｙ，（）：１５７１２２４５３２４５７．－

［２］ｏｆｆａｎＡ，ＢｏｎｃｉＭ，ＢａｎｏＬ，ｅｔａｌ．Ｄｉａｎｏｓｔｉｃａｎｄｃｌｉｎｉ　Ｔ　　　　　　－ｇ

ｃａｌｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｎｔｈｅｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓｖｉｒｕｓ　　　　　　ｓｔｒａｉｎＱ１ｉｎＩｔａｌＪ］．ＶｅｔｅｒｉｎａｒｉａＩｔａｌｉａｎａ，２０１３，　　　ｙ［（）：４９４３４７３５５．－

［管凤霞，高　恒，等．３］２株鸡传染性支气管炎　周　全，

］病毒的分离鉴定及Ｓ中国畜牧１基因的序列分析［Ｊ．（）：兽医，２０１０，３７８３７４０．－

［陈　冰，刑婧珉，等．鸡肾型传染性支气管炎４］　孙美玉，

］病毒Ｑ中国畜牧Ｄ株Ｓ１基因的克隆与序列分析［Ｊ．（）：兽医，２０１４，４１３７８９０．－

［，５］ＩｎａｔｏｖｉｃＪＳａａｔｓＳ．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｒｅｖｉｏｕｓｌｕｎ　　　　　－ｐｙｇｊｐ　

ｋｎｏｗｎａｎｔｉｅｎｉｃｅｉｔｏｅｓｏｎｔｈｅＳａｎｄＮｒｏｔｅｉｎｓｏｆ　　　　　　　　　ｇｐｐｐ［］ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓｖｉｒｕｓＪ．ＡｒｃｈｉｖｅｓｏＶｉａｖｉａｎ　　　　－ｆ　（）：ｒｏｌｏ２００５，１５０９１８１３１８３１．－ｇｙ，

［６］ｈｉｌｌｉｓＪＥ，ＪａｃｋｗｏｏｄＭ　Ｗ，ＭｃＫｉｎｌｅＥＴ，ｅｔａｌ．　Ｐ　　　　　ｐｙ　

ｒｏｔｅｉｎＣｈａｎｅｓｉｎｎｏｎｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ３ａｒｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈ　　　　　　ｐｇｉｎａｖｉａｎｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓａｔｔｅｎｕａｔｉｏｎ　　　　　

中，重组病毒接种ＳＰＦ雏鸡表现为轻微的临床症状、病毒的潜伏期缩短、死亡离降低，另外，对ＭＤＶ

也有很好的保护作用。

３　免疫策略

最近在各国陆续有Ｉ传统的疫苗已不Ｂ的报道，能很好的防制该病的传播。新ＩＢＶ血清型的不断接种疫苗与新型变异株之间交叉保护性弱，使出现，

得该病暴发。因此，及时了解Ｉ选ＢＶ流行的动态，择正确的疫苗接种，是预防该病在禽群之间传播的关键因素之一。此外，加强鸡舍的饲养管理，做好平提高机体的抵抗力，对Ｉ时预防接种，Ｂ的防制起重要作用。

３．１　加强鸡舍的饲养管理首先，加强鸡舍内外环境的消毒，定时更换消毒进出养殖场的车辆和人员做好消毒和隔液的种类，

杜绝外来疫病的入侵。其次，离工作，３周龄内的雏鸡对鸡舍的温度、湿度、通风和光照都很敏感，易造成应激，降低鸡群的免疫力。另外，饲料中添加维生素和微量元素，提高机体的免疫力。大规模的养殖饲养密度不可过大。场，

３．２　免疫接种首免，可在出壳３ｄ内进行，因该病毒不受母源二免，在２周后进行，此时抗体产生速抗体的干扰；

度快、数量多、持续时间长；可根据该病流行病学特选择性三免。市场上常见的弱毒疫苗主要有点，

前者较温和，可做首免疫苗，后者可Ｈ１２０和Ｈ５２，

作为二免疫苗。也可采用对价联苗对ＩＢ进行预防接种。同时，还要密切注意Ｉ做好紧Ｂ的流行趋势，急接种计划。此外，弱毒苗的接种方式通过点眼、滴——分泌性Ｉ由哈德氏腺和黏膜产生的抗体—鼻，Ａ，ｇ是最快、杀伤力最强的免疫球蛋白。３．３　其他

有报道称，推ＢＶ的复制，α－干扰素可以抑制Ｉ迟ＩＢ的暴发。胸腺因子可以刺激自然杀伤细胞的分泌，从而增强机体的抵抗，以防止该病的侵袭。另

传染性支气管炎病毒的分子生物学特性及其弱毒疫苗的研究进展

　６期闫艺婷等：传染性支气管炎病毒的分子生物学特性及其弱毒疫苗的研究进展

［］（）：ｖｉｒｕｓＪ．ＶｉｒｕｓＧｅｎｅｓ，２０１２，４４１６３７４．　－

１５９１

［７］ｈａｈｗａｎＫ，ＨｅｓｓｅＭ，ＭｏｒｋＡ　Ｋ，ｅｔａｌ．Ｓｉａｌｉｃａｃｉｄ　Ｓ　　　　　

ｂｉｎｄｉｎｒｏｅｒｔｉｅｓｏｆｓｏｌｕｂｌｅｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｓｉｋｅ（Ｓ１）　　　　ｇｐｐｐ　：ｒｏｔｅｉｎｓＤｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｂｅｔｗｅｅｎｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓｖｉ　　　　－ｐ

］ｒｕｓａｎｄｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｂｌｅｖｉｒｕｓ［Ｊ．Ｖｉｒｕ－ａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｉｔｉｓ　　　　ｇ（）：ｓｅｓ，２０１３，５８１９２４１９３３．－

［８］ａｌｌｉｓｏｎＳ，ＨｉｌｔＤ，ＪａｃｋｗｏｏｄＭ．ＵｓｉｎＤＮＡｓｈｕｆｆｌｉｎ　Ｃ　　　　ｇｇ　

：ｔｏｃｒｅａｔｅｎｏｖｅｌｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓｖｉｒｕｓＳ１ｇｅｎｅｓ　　　　　　ＩｍｌｉｃａｔｉｏｎｓｆｏｒＳ１ｇｅｎｅｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｖｉｒｕｓ　　　ｐ（）：２００５，３１１５１１．Ｇｅｎｅｓ，－

［９］ｕａｎＹＰ，ＷａｎＣ　Ｈ．Ｓｅｕｅｎｃｅｃｈａｎｅｓｏｆｉｎｆｅｃ　Ｈ　　　　－ｇｇｑｇ　　

ｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓｖｉｒｕｓｉｓｏｌａｔｅｓｉｎｔｈｅ３′７．３ｋｂｏｆｔｈｅ　　　　　　　　ａｓｓａｅｅｎｏｍｅａｆｔｅｒａｔｔｅｎｕａｔｉｎｉｎｅｍｂｒｏｎａｔｅｄ　　　　ｐｇｇｇｙ　

［］（）：Ｊ．Ａｖｉａｎ　Ｐａｔｈｏｌｏ２００７，３６１５９６７．ｅｓ－ｇｇｇｙ，

［］１０ｈｏｕＳ，ＴａｎＭ，ＪｉａｎＹ，ｅｔａｌ．Ｃｏｍｌｅｔｅｓｅｅｎｏｍｅ　Ｚ　　　　－ｇｇｐｇ　　

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ｅｎｅ［ｃｕｌａｔｉｎｉｎＣｈｉｎａｗｉｔｈａｄｉｓｔｉｎｃｔＳ　Ｊ］．Ｖｉｒｕｓ　　　　　ｇｇ　（）：Ｇｅｎｅｓ，２０１４，４９１１５２１５６．－

［］１１ｒｏｍｋｕｎｔｏｄＮ，ＷｉｃｋｒａｍａｓｉｎｈｅＩＮ，ｄｅＶｒｉｅｚｅＧ，ｅｔａｌ．　Ｐ　　　　　　ｇ

ｏｆｔｈｅＳ２ｓｉｋｅｅｃｔｏｄｏｍａｉｎｔｏａｔｔａｃｈｍｅｎｔＣｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｓ　　　　　　ｐ［］ａｎｄｈｏｓｔｒａｎｅｏｆｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓｖｉｒｕｓＪ．Ｖｉｒｕｓ　　　　　　ｇ，（）：Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２０１３１７７２１２７１３７．－

［］［］１２ａｓｔｅｒｓＰＳ．ＴｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｂｉｏｌｏｏｆｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｅｓＪ．　Ｍ　　　　　ｇｙ　

，：Ａｄｖａｎｃｅｓｉｎ　ＶｉｒｕｓＲｅｓｅａｒｃｈ，２００６６６１９３２９２．　　－

［］贺秀媛，崔保安，等．传染性支气管炎病毒１３　张淑霞，

ＨＮ９９株Ｎ基因在大肠杆菌中的表达及产物免疫活］：西北农林科技大学学报，性检测［Ｊ．２００７，３５（４）３２３５．－

［］，ｒｅｖｉｏｕｓｌ１４ＩｎａｔｏｖｉｃＪＳａａｔｓＳ．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｕｎ　　　　　－ｐｙｇｊｐ　

ｋｎｏｗｎａｎｔｉｅｎｉｃｅｉｔｏｅｓｏｎｔｈｅＳａｎｄＮｒｏｔｅｉｎｓｏｆ　　　　　　　　　ｇｐｐｐ［］ａｖｉａｎｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓｖｉｒｕｓＪ．ＡｒｃｈｉｖｅｓｏＶｉ　　　　－ｆ　（）：ｒｏｌｏ２００５，１５０９１８１３１８３１．－ｇｙ，

［］１５ａｎＺ，ＷｕＮ，ＦｕＹ，ｅｔａｌ．Ａｎｔｉｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓ　Ｙ　　　－　ｇ　

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［］１７ｏｒｓｅＥ，ＭａｃｈａｍｅｒＣＥ．ＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓｖｉｒｕｓＥ　Ｃ　　　　　　

ｒｏｔｅｉｎｏｌｉｉｓｔａｒｅｔｅｄｔｏｔｈｅｃｏｍｌｅｘａｎｄｄｉｒｅｃｔｓ　　　　　　　　ｐｇｇｇｐ［］ｒｅｌｅａｓｅｏｆｖｉｒｕｓｌｉｋｅａｒｔｉｃｌｅｓＪ．ＪｏｕｒｎａｌｏＶｉｒｏｌｏ－　　－　　ｐｆ　

（）：２０００，７４９４３１９４３２６．－ｇｙ，

［］１８ｕｃｈＴＲ，ＭａｃｈａｍｅｒＣＥ．Ｔｈｅｈｄｒｏｈｏｂｉｃｄｏｍａｉｎ　Ｒ　　　　　　ｙｐ

ｏｆｒｏｔｅｉｎｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓｖｉｒｕｓＥａｌｔｅｒｓｔｈｅｈｏｓｔ　　　　　　　　ｐｓｅｃｒｅｔｏｒａｔｈｗａａｎｄｉｓｉｍｏｒｔａｎｔｆｏｒｒｅｌｅａｓｅｏｆｉｎ　　　　　　－ｐｙｐｙ　　［］：ｆｅｃｔｉｏｕｓｖｉｒｕｓＪ．ＪｏｕｒｎａｌｏＶｉｒｏｌｏ２０１１，８５（２）　　ｆ　ｇｙ，６７５６８５．－

［］薛邦玉，王泽霖，等．种毒代次和１９ＩＢ（Ｍ４１株）　王新卫，

］：免疫原性的关系［中国农学通报，Ｊ．２００８，２４（５）５４５７．－

［］梅　进．２０Ｗ９３株疫苗预防鸡肾型传染性支气　孙银华，

：管炎免疫效果观察［中国家禽，Ｊ］．２００８，３０（６）５９６０．－

［］２１ａｃｈｉｄａＳ，ＩｒｉｔａｎｉＹ，ＫａｔａｉｒｉＫ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ　Ｙ　　　　　ｇ

ｏｎｉｎｆｅｃｔｉｖｉｔｔｉｔｒａｔｉｏｎｏｆｍｏｕｓｅｂｒａｉｎｔｅｍｅｒａｔｕｒｅ　　　　　－ｙｐ　ａｖｉａｎｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓｖｉｒｕｓｉｎｌａｂｏｒａｔｏａｓｓａｅｄ　　　　　　－ｐｇ］：ｒｈｏｓｔｓｓｔｅｍｓ［Ｊ．Ａｃｔａ　Ｖｉｒｏｌｏｉｃａ，１９７９，２３（５）　ｙｙｇ　３９８４０２．－

［］杨　敬，刘尚高．鸡肾型传染性支气管炎病２２　李永清，

］（）：毒［中国兽医杂志，Ｊ．２００２，３８３３６．－

［］２３ａｃｋｗｏｏｄＭ　Ｗ，ＨｉｌｔＤＡ，ＳｅｌｌｅｒｓＨＳ，ｅｔａｌ．Ｒａｉｄ　Ｊ　　　　　　ｐ

ｈｅａｔｔｒｅａｔｍｅｎｔａｔｔｅｎｕａｔｉｏｎｏｆｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓｖｉ－　　　　　－［］（）：ｒｕｓＪ．Ａｖｉａｎ　Ｐａｔｈｏｌｏ２０１４，３９３２２７２３３．－ｇｙ，

［］低温培养诱导鸡传染性支气管炎病毒２４　陈明艳．

新乡：河南科技学ＺＺ２００４毒株毒力减弱研究［Ｄ］．院，２０１３．

［］２５ｈｏｕＹＳ，ＺｈａｎＹ，ＷａｎＨ　Ｎ，ｅｔａｌ．Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ　Ｚ　　　ｇｇ　　

ｏｆｒｅｖｅｒｓｅｅｎｅｔｉｃｓｓｓｔｅｍｆｏｒｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓｖｉ　　　　　　　－ｇｙｒｕｓａｔｔｅｎｕａｔｅｄｖａｃｃｉｎｅｓｔｒａｉｎＨ１２０［Ｊ］．Ｖｅｔｅｒｉｎａｒ　　　　ｙ（）：２０１３，１６２１５３６１．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏ－ｇｙ，

［］２６ｏｒｏＨ，ＺｈａｏＷ，ＢｒｅｅｄｌｏｖｅＣ，ｅｔａｌ．Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎ　Ｔ　　　　　－

ｃｈｉｔｉｓｖｉｒｕｓＳ２ｅｘｒｅｓｓｅｄｆｒｏｍｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｖｉｒｕｓｃｏｎ　　　　　　－ｐ［］ｆｅｒｓｂｒｏａｄｒｏｔｅｃｔｉｏｎａａｉｎｓｔｃｈａｌｌｅｎｅＪ．Ａｖｉａｎ　Ｄｉｓ　　　　－ｐｇｇ（）：ｅａｓｅｓ，２０１３，５８１８３８９．－

［］２７ｈａｎＸ，ＷｕＹ，ＨｕａｎＹ，ｅｔａｌ．Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎｃｏｎｆｅｒｒｅｄ　Ｚ　　　ｇｇ　　

’ｂａｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＭａｒｅｋｓｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓｔｈａｔｅｘｒｅｓ　　　　　　－ｙｐ　ｓｅｓｔｈｅｓｉｋｅｒｏｔｅｉｎｆｒｏｍｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓｖｉｒｕｓ　　　　　　　ｐｐ］ｉｎｓｅｃｉｆｉｃａｔｈｏｅｎｆｒｅｅｃｈｉｃｋｅｎ［Ｊ．ＶｉｒｏｌｏＪｏｕｒ－　　－　ｐｐｇｇｙ　（）：ｎａｌ，２０１２，９１１１０．－

［］程晶晶，张　铁，等．中药对Ｉ２８ＢＶ感染雏鸡巨　李清艳，

］噬细胞吞噬指数和免疫器官指数的影响［安徽农Ｊ．（）：业科学，２０１０，３８１１５６５８５６５９．－

［］亢文华，汪　洋．鸡传染性支气管炎及其防制２９　白永平，

］（）：技术［中国畜牧兽医，Ｊ．２００５，３２２５９６１．－

（责任编辑　吴　艳）

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