凝胶渗透色谱仪操作规程 岛津 class vp

GPC

凝胶渗透色谱仪操作规程

（1）仪器与电脑开机顺序并无先后，但是只有等仪器初始化好后，才能启动装在电脑上的CLASS-VP软件。

（2

）双击图标，进入操作界面。此时会出现一个Shimadzu CLASS-VP 窗口，双击

Instrument1图标，仪器会发出蜂鸣声，以表示建立了与计算机的连接。

随即出现如下主操作界面：

GPC

（3

）点击图标工具栏：

、和，打开instrument、pump和oven 。

②RID R. Flow

On/Off ④Zero RID

⑥Rinse ⑧Turn pumpsAutosample On/off ⑩LC Setup

Assistant

①Oven ③Balance RID⑤Purge ⑦Instrument ⑨LCD

On/Off Autosample On/off

按下①⑦⑧⑨按钮，完成仪器初始化，此时这些按钮呈高亮状态，如上图所示。

②③④为走基线时调整基线所用，②为冲洗参比池，③平衡参比池与样品池，④基线归零。 ⑥为排赶进样针气泡，⑤为清洗进样针外壁 ⑩为返回主操作界面 (4)点击图标

，冲洗进样针25

分钟。点击图标

，冲洗autosampler 3次。

（5）按主界面中的任何实物图标（溶剂瓶、进样架、泵、检测器）进入Instrument Setup中，进行主要参数设置：

Pumps：mode选择Low Pressure Gradient，自定义流量T.Flow及洗脱液的配比。一般T.Flow是0.8mL/min。

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CTO-10Avp：

一般柱温40℃，最高不超过85℃。 RID-10A (DetA)

SCL-10Avp

注意：参数设置完毕后，要按下Download键，所有设置方可生效。在主菜单上选择File >

Method > Save或Save as保存方法文件。

（6）走基线与进样

Single Run

Preview Sequence Run

Stop

GPC

点击Preview预览基线，基线走平后，方可进样。走完第一遍基线（需47分钟）后，点击

图标，冲洗参比池，必须冲洗3次，每次3~4分钟，然后点击图标平衡参比

池和样品池（观察示差检测器，±25以内视为正常）。然后走第二遍基线，基线走平后，点击图标

调零。

单个进样：点击Single Run键，此时出现一对话框，在Vial中输入样品所在位置编号，自动进样架上有。在Injection volume中输入所需的进样量，单位：µL，点击“Start”开始测试。

连续进样：在主菜单上选择Sequence > Edit，出现以下界面

:

GPC

输入样品所在的位置编号、重复次数、进样量、方法文件等。编辑完毕，选择File→Sequence→Save as保存。

点击Sequence Run键，开始分析。

(7)测试结束后，点击图标 依次点击

、

和

，冲洗进样针5分钟，再次点击此图标停止Purge。 ，关闭oven、pump和instrument。关闭软件，然后关闭各

仪器开关。

(8) 取出样品瓶。

下图为色谱窗口：

（9）分子量分析:

1在Shimadzu CLASS-VP 窗口，双击“Offline Processing”图标 ○

，进入离线分析界

面。选择File → Data → Open，打开所要分析的文件，设定分析条件，点击“Analyze”图标，这时软件自动产生一个数据文件。

2双击○进入主界面：

GPC

双击Mol.Weight，进入分子量计算界面：

单击

出现如下对话框，分别选择对应的刚产生的上述数据文件及最新的标准曲线

LC Calc. Data：待分析数据

GPC

GPC Method：标准曲线

然后按Calculation计算，得到分析曲线：

GPC

点击

，出现分析后得到的数据

GPC

注意事项

1. 样品的制备：将待测样品溶解在HPLC级的溶剂后，用有机过

滤膜（0.45μm以下）滤去固体小颗粒后收集在专用的样品瓶中，方可进入柱子，溶解过程中，不得使用超声波、不得加热，如有必要可以放置过夜。

2. GPC的样品是要经过干燥过的。样品纯度也必须有保障。 3. 不得使用流动相以外的溶剂溶解样品。 4. 检查废液瓶，注意及时更换，勿让废液溢出。 5. 表征结束后，应及时取出样品瓶，请勿留在仪器内。

GPC

凝胶渗透色谱（GPC）保养与维护

6. 确保GPC所处室内环境的干净整洁，房间温度应恒温在20℃。 7. GPC使用溶剂为HPLC级THF。请在使用前先查看并保证装流

动相的瓶子是满的，若液面很低，请先加满流动相；同时检查废液瓶，注意及时更换，勿让废液溢出。

8. 装流动相的瓶子应保持良好的密封性，防止水气的进入。 9. 若所用溶剂非同一批次溶剂，请重新标定标样，再做样品。而

且应每两月走一次标样，检查柱效是否降低。

10. 样品的制备：将待测样品溶解在HPLC级的溶剂后，用有机过

滤膜（0.2μm）滤去固体小颗粒后收集在专用的样品瓶中，方可进入柱子。GPC的样品是要经过干燥过的。样品纯度也必须有保障。

表征结束后，应及时取出样品瓶，请勿留在仪器内。

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