生物化学实验考试试卷

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《生物化学实验》 课程 期末 考试试卷（第 1 卷）

考试专业班级 考试形式 考试时间 120 分钟 考试学期 考试类型 命题教师 李 峰 李 荣 题号 分值

一、名词解释题（每题4分，共24分） 1、解链温度 2、层析

3、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳 4、复性 5、蛋白质沉淀 6、双缩脲反应

二、填空题（每空1分，共20分） 1、A、B、C、D、E五种氨基酸，其pI由低到高，设溶液pH在C的等电点，则A带 ，B带 ， C带 ， D带 ， E带 。 2、测定蛋白质浓度的方法主要有（ ）、（ ）、（ ）。

3、双键DNA热变性后，或在pH2以下，或在pH12以上时，其OD260（ ），同样条件下，单键DNA的OD260（ ）。

4、硝酸纤维素膜可结合（ ）链核酸。将RNA变性后转移到硝酸纤维素膜上再进行杂交，称（ ）印迹法。

5、变性DNA的复性与许多因素有关，包括（ ）、（ ）、（ ）、（ ）、（ ）。 6、利用蛋白质不能通过半透膜的特性，使它和其他小分子物质分开的方法有（ ）和（ ）等。

7、核酸在260nm附近有强吸收，这是由于（ ）。

8、在分光光度计的使用或检定中，（ ）的准确度是衡量仪器工作性能的一项重要指标，它的准确程度直接关系到所测数据的可信性及科学性。（ ）的误差越大，测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性。 三、选择（每题2分，共16分）

1、丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用属于( ) A 不可逆 B 竞争性 C 非竞争性 2、羟化酶的辅酶是（ ）

A 硫胺素 B 核黄素 C 吡哆素 D维生素C 3、下列哪组反应是错误的？ （ ）

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一 24 二 20 三 16 四 40 五 六 七 八 总分 100 超经典 下载后可编辑

A、葡萄糖——Molish反应 B、胆固醇——Libermann-Burchard反应 C、色氨酸——坂口（Sakaguchi）反应 D、氨基酸——茚三酮反应 4、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（ ） A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同 B、分子大小不同 C、分子极性不同 D、溶解度不同

5、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查？ （ ）

A、茚三酮试剂 B、奈氏试剂 C、双缩脲试剂 D、Folin-酚试剂

6、酶的活化和去活化循环中，酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上？（ ）

A、天冬氨酸 B、脯氨酸 C、赖氨酸 D、丝氨酸 7、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收？（ ） A、215nm B、260nm C、280nm D、340nm

8、在基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒以便于重组和筛选。已知有些不同的限制酶也可能会切出相同的黏性末端限制酶I的识别序列和切点是一G GATCC一，限制酶Ⅱ的

识别序列和切点是一GATC一。根据图示判断下列操作正确的是（ ）

↓

↓

A、质粒用限制酶I切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割 B．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶I切割 C．目的基因和质粒均用限制酶I切割 D．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割

四、简答题：（每题8分，共40分） 1、紫外分光光度法测定核酸含量的原理。 2、蛋白质变性与沉淀的关系。

3、试述凝胶成像系统操作时应注意的事项。

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4、许多生物材料在提取核酸时，都会遇到多糖的污染问题，具体表现为有机溶剂沉淀时，

沉淀很多，但复溶时，大量沉淀不溶，电泳观察时核酸含量很低。试述克服多糖污染可采用的办法。

5、常用移液器的规格有哪些？如何正确使用移液器？

《生物化学实验》 课程 期末 考试试卷（第 2 卷）

考试专业班级 考试形式 考试时间 120 分钟 考试学期 考试类型 命题教师 李 峰 李 荣 题号 分值

一、名词解释题（每题4分，共24分）

1、等电点 2、解链温度 3、透析 4、DNA变性 5、同工酶 6、黄色反应

二、填空题（每空1分，共20分）

1、酶的专一性可分为：______________、________________和___________ 三类， 2、核黄素和硫胺素在体内形成的辅酶分别是_____________和____________ 。缺乏维生素C引起的疾病是_____________。

3、通常可用紫外分光光度法测定蛋白质的含量，这是因为蛋白质分子中的（ ）、（ ）、（ ）三种氨基酸的共轭双键有紫外吸收能力。

4、变性DNA的复性与许多因素有关，包括（ ）、（ ）、（ ）、（ ）、（ ）。 5、常用二苯胺法测定（ ）含量，用苔黑酚法测定（ ）含量。

6、使用离心机时，如有噪音或机身振动时，应立即（ ），并且离心管须对称放入套管中，防止机身振动，若只有一支样品管，则另外一支要用（ ）代替。

7、在分光光度计的使用或检定中，（ ）的准确度是衡量仪器工作性能的一项重要指标，它的准确程度直接关系到所测数据的可信性及科学性。（ ）的误差越大，测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性。

三、选择（每题2分，共16分）

1、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收？（ ）

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一 24 二 20 三 16 四 40 五 六 七 八 总分 100 超经典 下载后可编辑

A、215nm B、260nm C、280nm D、340nm 2、Sanger试剂是（ ）

A、苯异硫氰酸 B、2，4-二硝基氟苯 C、丹磺酰氯 D、?-巯基乙醇 3 、下列哪组反应是错误的？ （ ）

A、葡萄糖——Molish反应 B、胆固醇——Libermann-Burchard反应 C、色氨酸——坂口（Sakaguchi）反应 D、氨基酸——茚三酮反应 4、下列蛋白质组分中，哪一种在280nm具有最大的光吸收？（ ）

A、色氨酸的吲哚基 B、酪氨酸的酚环 C、苯丙氨酸的苯环 D、半胱氨酸的硫原子 5、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（ ） A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同 B、分子大小不同 C、分子极性不同 D、溶解度不同

6、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查？ （ ）

A、茚三酮试剂 B、奈氏试剂 C、双缩脲试剂 D、Folin-酚试剂 7、 磺胺类药物是下列哪种酶的抑制剂（ ）

A二氢叶酸合成酶 B 四氢叶酸合成酶 C 一碳基团转移酶

8、在基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒以便于重组和筛选。已知有些不同的限制酶也可能会切出相同的黏性末端限制酶I的识别序列和切点是一G GATCC一，限制酶Ⅱ的

识别序列和切点是一GATC一。根据图示判断下列操作正确的是（ ）

↓

↓

A、质粒用限制酶I切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割 B．质粒用限制酶 Ⅱ切割，目的基 因用限制酶I切割 C．目的基因和质粒均用限制酶I切割 D．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割

四、简答题：（每题8分，共40分）

1、若样品中含有蛋白质和核苷酸等杂质，如何排除干扰？ 2、体液血糖测定有哪些方法？

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3、DNA在电场中的迁移率取决于哪些因素？ 4、琼脂糖凝胶有哪些注意事项？

5、你了解的离心机有哪些种类？如何正确使用离心机？

《生物化学实验》 课程 期末 考试试卷（第 3 卷）

考试专业班级 考试形式 考试时间 120 分钟 考试学期 考试类型 命题教师 李 峰 李 荣 题号 分值

一、名词解释题（每题4分，共24分） 1、解链温度 2、蛋白质变性 3、退火 4、竞争性抑制 5、增色效应 6、不可逆沉淀

二、填空题（每空1分，共20分）

1、A、B、C、D、E五种氨基酸，其pI由低到高，设溶液pH在C的等电点，则A带 ，B带 ， C带 ， D带 ， E带 。 2、测定蛋白质浓度的方法主要有（ ）、（ ）、（ ）。

4、非竞争性抑制剂的动力学特点是：Km值_________，Vmax_________ 。

5、双键DNA热变性后，或在pH2以下，或在pH12以上时，其OD260（ ），同样条件下，单键DNA的OD260（ ）。

7、缺乏VA引起的病是_______________；缺乏VD引起的病是_____________；缺乏Vc引起的病是_____________；缺乏VB11引起的病是___________。

8、测定酶活力时，底物浓度应________________________、反应温度应选在____________、反应pH应选在____________、反应时间应在反应的______期进行。 三、选择（每题2分，共16分）

1、丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用属于( ) A 不可逆 B 竞争性 C 非竞争性 2、羟化酶的辅酶是（ ）

A 硫胺素 B 核黄素 C 吡哆素 D维生素C

一 24 二 20 三 16 四 40 五 六 七 八 总分 100 超经典 下载后可编辑

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3、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查？ （ ）

A、茚三酮试剂 B、奈氏试剂 C、双缩脲试剂 D、Folin-酚试剂 4、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（ ） A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同 B、分子大小不同 C、分子极性不同 D、溶解度不同 5、人体内不能合成的脂肪酸是（ ）

A.油酸 B.亚油酸 C.硬脂酸 D.软脂酸 6、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键？（ ） A、双缩脲反应 B、凯氏定氮 C、紫外吸收 D、羧肽酶法 7、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键？（ ） A、双缩脲反应 B、凯氏定氮 C、紫外吸收 D、羧肽酶法

8、在基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒以便于重组和筛选。已知有些不同的限制酶也可能会切出相同的黏性末端限制酶I的识别序列和切点是一G GATCC一，限制酶Ⅱ的

识别序列和切点是一GATC一。根据图示判断下列操作正确的是（ ）

↓

↓

A、质粒用限制酶I切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割 B．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶I切割 C．目的基因和质粒均用限制酶I切割 D．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割

四、简答题：（每题8分，共40分） 1、考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的原理是什么？ 2、何谓Rf值？影响Rf值的主要因素是什么？ 3、蛋白质分离和纯化的一般方法？ 4、如何正确选择核酸电泳指示剂？

5、试述琼脂糖凝胶电泳分离、鉴定核酸分子的原理及简要操作步骤。

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