《药用植物学与生的药学》实验指导书绍兴文理学院元培学院

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《药用植物学与生药学》

实验指导书

(供药学专业班用)

绍兴文理学院元培学院生命科学系

2013年2月

目 录

实验一 显微测量和显微描绘技术???????????????????1 实验二 生药的水分、灰分、浸出物及杂质检查法????????????6 实验三 植物细胞构造及后含物????????????????????8 实验四 保护组织、分泌组织?????????????????????9 实验五 机械组织、输导组织?????????????????????10 实验六 色谱法在中药鉴定中的应用????????????????? 11 实验七 黄连、黄芪、甘草、人参的鉴定????????????????12 实验八 番泻叶、金银花和红花的鉴定?????????????????14 实验九 茯苓、半夏、贝母和天麻的鉴定????????????????15 实验十 动物及矿物类中药????????????????????? 16 实验十一 中成药的显微鉴定???????????????????? 16 附录

1.常用试剂配制法 ?????????????????????????17 2.常用商品酸碱浓度表 ?????????????????????? 22 3.层离法常用显色剂????????????????????????23 4.绘图注意事项??????????????????????????24

I

一、实验注意事项:

1.根据教学进程,温习与本次实验有关的课堂讲授内容。 2.仔细阅读本次实验的内容,要求弄懂实验的原理与方法。 3.准备好各种自备的实验用品,如铅笔、橡皮、直尺、报告纸等。 二、实验过程中的几点要求:

1.遵守实验室规则,保持实验室安静。

2.实验认真,观察仔细,观察应当与思考结合起来,应当手、眼、脑三者并用。

3.由于实验时间有限,实验时应当善于安排自己的工作,注意力应当集中在主要问题上,不要用过多时间去钻研细小的次要问题,一时解决不了的次要问题,可留课外时间去解决。

4.在实验过程中,应当随时注意观察到的现象,测量或称量的数据,计算结果等写在报告纸上,养成能随时作出准确、清淅、整齐的记录而不需要重抄的良好习惯。

5.实验进行过程中,必须注意听取教师的指导。

6.实验桌前应随时保持整洁,非实验必要物品一律不许放在桌面或桌架上。 7.纸屑、废物应放人污物缸内,不得乱丢地上,污物缸内不得倒入液体。 三、实验完毕时的几点要求:

1.按照教师指定时间完成实验报告。

2.把实验用仪器、用品等收拾干净,放在指定位置。发放给个人保管的可放抽屉或柜内。

3.临时借用物品应及时归还。

4.值日生负责最后清扫实验室卫生,并及时清除污物缸内的废弃物。 5.实验结束后,检查门、窗、水、电,保证无安全隐患后方可离开实验室。

II

实验一 显微测量和显微描绘技术

一、目的要求

1.掌握徒手制片、粉末制片、表面制片和解离制片方法。 2.掌握生物显微镜使用及显微绘图技术。 3.掌握显微测微尺的校正和使用方法。 4.掌握描绘器的使用方法。 二、仪器、试剂

1.仪器 生物显微镜、酒精灯、盖玻片、载玻片、镊子、解剖针、擦镜纸、吸水纸、火柴、绘图铅笔(HB、2H、4H)、直尺和擦皮,以上是每次实验必备品。另需单面刀片或剃刀、烧杯、试管、目镜测微尺、载台测微尺、显微描绘器、绘图板、恒温水浴锅、量筒、粉碎机。

2.试剂 稀甘油、水、水合氯醛试液、甘油醋酸试液、间苯三酚试液、浓盐酸、10%铬酸、浓硝酸、10%硝酸、氯酸钾、5%~15%的氢氧化钾溶液。

三、实验材料 制作徒手切片和表面制片,可选用新鲜药材;制作粉末片,选用干燥药材的粉末,如:甘草、虎杖、麦冬、当归等。 四、实验内容 1.生物显微镜的使用 生物显微镜由光学部分和机械部分组成。光学部分包括成像系统——目镜和物镜,照明系统——聚光器、可变光栏和反射镜。物镜将标本作第一次放大,目镜将第一次放大的像作第二次放大,两者相乘即是观察到的放大倍数。机械部分包括镜座、镜臂、镜筒、载物台、粗细调节手轮及推动器或压夹。使用生物显微镜时,利用反射镜将外来光线导入聚光镜中,由聚光镜将光线会聚在标本上,用光栏调节光线强度。观察时视野范围内应均匀明亮,先用低倍镜观察,如需要放大,可将目的物调至视野中央,然后转换成高倍镜,仔细观察。

(1)低倍镜的操作法:1)将显微镜放置离桌缘约10cm处,镜臂应靠近胸前。2)对光。上升聚光镜到载物台水平,打开光栏至最大限度,再将低倍镜转至镜筒的正下方,使对准载物台上的透光孔(转动时,听到“得”一声,即已对正)然后用二手转动反光镜,同时从接目镜向下看,直至镜中出现一明亮而均匀的视野为止。3)装片。将欲观察的标本片从镜前方横置于载物台上,(注意盖玻片应向上)使标本对准透光孔的中央。4)调节焦距。从侧面注视接物镜与标本片之间的距离,向外旋转粗调节手轮,使镜筒慢慢下降,直至物镜几乎与标本片相接触,但切勿触及标本片,以免造成镜头与标本片的损坏。自目镜向下观察,同时向内旋转粗调节手轮,使物镜慢慢上升,直至在视野中看到清楚的物象为止。

若标本不在视野中,则慢慢移动标本片,使之适中,看到物象后,用压片夹固定制片,再转动细调节手轮,并调节光线,直到看到最清楚的物象为止,注意在显微镜中看到的是实物倒象。如果观察过程中发现清晰的图像逐渐模糊,说明调节手轮失灵,应进行检修。 (2)高倍镜的操作法:应先在低倍镜下选择物像,移至视野中心,换转高倍镜,应能看到欲观察之物象,用细调节手轮使之图象清晰。更换高倍镜时如出现镜头触及载玻片现象,则要检查标本切片是否放反,或高低倍镜是否配套。高倍镜头观察物象时,只能用细调节手轮调节焦距。

(3)使用显微镜注意点:1)取拿显微镜时,必须一手握住镜臂,一手托住镜座,轻取轻放,防止因撞击使镜头内各组透镜脱胶而影响观察的清晰度。2)每次观察标本片时,必须先用低倍镜观察,看清物象后,再换高倍镜。3)要注意保持显微镜的干燥和清洁,使用前后,均需将显微镜擦干净,注意镜头要用擦镜纸或绸巾单向擦拂,切勿用手、手帕或纸片等去擦,观察临时制片时,要防止水分或药液外溢以致沾污镜头及其他部分。

2.显微制片法

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(1)徒手制片法:系用刀片或徒手切片器将材料切成薄片,可在显微镜下观察组织构造、细胞特征的制片法,新鲜材料应除净泥砂,干燥材料需浸软后切片。本方法简便快速,能保持植物体原有结构的真像、色彩和内含物,适合于临时制片观察或显微化学实验,其缺点是切片较厚且厚薄不均一,不适合长期保存。

1)取材、固定与切片:选择已软化的中药材适当部位,切割成长2~3cm的小段,用拇指及食指和中指夹住材料,下端用无名指托住,另手持刀片,自左向右移动手腕,牵曳切片,动作要轻而快,力求切片薄而完整,操作时材料的断面与刀口须经常用水湿润。对于叶片或柔软的材料,需用稍坚固而易切的胡萝卜、马铃薯或实心大通草等将材料夹住进行切片。徒手切片器切片:将适当长度的材料夹入切片器上口外,旋转螺丝将材料固定紧,材料略露出圆盘平面,然后将切片刀或剃刀平放在圆盘上,自左向右平拉切片,同时转动切片器下端的升降调节轮,使材料上升,以利切片。

2)装片:将切好的薄片,用毛笔小心地移入盛有清水的培养皿中浸泡,取载玻片滴加甘油或试液,用镊子或毛笔将切片移于其上,再滴一滴甘油于片上,加上盖玻片,即可作临时制片观察;也可将薄片滴加水合氯醛液加热透化,再滴加稀甘油,加上盖玻片后进行观察。加盖玻片时,应尽量避免产生气泡。

(2)粉末制片法:将药材研粉,过筛(50-80目)后制片。此法是鉴定中药材最常用的方法之一,简便快速,主要鉴别细胞的形态特征。特别坚硬的药材可用锉刀将其锉成粉末。取粉末少许,置于洁净的载玻片上,滴加1~2滴蒸馏水或甘油醋酸试液,加上盖玻片,置显微镜下,可观察细胞中的不溶性物质如淀粉粒、脂肪油滴、色素颗粒等。如要观察细胞的形态特征,则应采用滴加水合氯醛加热透化后装片,以除去细胞中的淀粉、油脂等,增加细胞壁的折光率,从而使细胞的形态更加清晰。为防止水合氯醛结晶析出,水合氯醛透化后应滴加甘油,盖上盖玻片,擦净溢出液即可观察。

(3)表面制片法:多用于对叶片、果实或草本植物茎表皮组织的观察,可观察到表皮细胞形态、气孔类型、毛茸特征和着生情况等。通常用眼科镊子夹住叶片或果实等的表面,轻轻撕取其表皮层置于载玻片上的水、甘油或水合氯醛试液内,注意其上表面朝上方,加盖盖玻片,置显微镜下进行观察。

(4)解离制片法:系利用化学试剂使植物体的细胞与细胞间的中层物质溶解,细胞相互分离的方法。适用于研究细胞的立体形态结构,尤其适宜观察导管、管胞、石细胞和纤维等增厚壁的状况。欲解离的材料,需先切割成2mm的薄片。根据选用解离的试剂不同分: 1)氢氧化钾解离法:适用于柔软的植物材料。将切割好的材料置于坩埚中,加5%氢氧化钾溶液适量,加热至用玻棒挤压能离散为止。如离析的材料稍硬,可用6%~10%氢氧化钾液加热使之离析,尚可更换一次试液。待材料能被轻压离散时,倾去碱液,用水洗至中性,即可取所需部位加稀甘油制片观察。用氢氧化钾溶液能逐渐除去细胞中的淀粉、蛋白质、油脂及色素,其作用较水合氯醛强,并能使细胞膨胀,若作用时间较长,能使纤维性组织解离,并可引起薄壁组织的破坏和变形。所以加热处理时间不宜太长。

2)硝酸-铬酸离析法:适用于木质化组织,如木材、根、茎、树皮等材料,将材料放入坩埚或试管中,加10%硝酸与10%铬酸的等量混合液,其量为材料的20倍,放置浸渍的时间,视材料的性质而异,一般为1~2日或更长的时间。也可以采用加温的办法来缩短浸渍时间,以材料用玻棒轻压,可以离散为度,然后用水洗至中性,即可制片观察。

硝酸和铬酸均为强氧化剂,解离速度较快,如解离柔软较嫩的材料,应注意掌握时间,经硝酸、铬酸解离的材料,草酸钙、碳酸钙结晶及淀粉粒、脂肪油等均已消失。

3)氯酸钾法:本法适用于坚硬的材料,如木类及某些果实、种子坚硬的果皮、种皮等,将材料置坩埚或小烧杯中,加50%硝酸试液约5ml及氯酸钾粉少量,缓缓加热至沸,当气泡渐少时,再及时加入少量的氯酸钾,以维持气泡稳定产生(约15~20分钟),至材料能分

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离开时,倾去试液,加水洗涤数次,即可制片观察。采用此解离法制片需在通风处进行,以防氯气中毒。

3.显微测微尺的使用 显微测微尺是用来测量显微镜下所见物体长度、大小的标尺,包括镜台测微尺和目镜测微尺。镜台测微尺为一特制的载玻片,在载玻片的中央封有lmm长的小尺,精确分成10大格,每大格又分10小格,共100小格,每小格长度为0.0lmm,即10μm(图1-2)。标尺的外围有一小黑环,便于在显微镜下寻找标尺。载台测微尺并不直接用来测量显微镜下物体的长度和大小,而是用以校正目镜测微尺的。经过校正之后的目镜测微尺,方可用来测量显微镜下物体的大小。目镜测微尺为一直径约20mm的圆形玻片,玻片的中央部分具有一小尺,精确的分成50小格或100小格(图1-1)。使用目镜测微尺时,将目镜自镜筒中抽出,旋开镜片,将目镜测微尺的标尺正面向上,按放在目镜中部的隔板上;旋上镜片,放回原镜筒内,进行测量。由于目镜测微尺每小格的长度随显微镜放大的倍数而改变,故在使用前必须将各物镜头逐一用载台测微尺加以校正,以便确定在使用此显微镜时各组镜头下目镜测微尺每小格所代表的实际长度。

(1)目镜测微尺的校准:将载台测微尺放在显微镜的载物台上,目镜测微尺放入目镜内(有的已将目镜测微尺固定在目镜内),于显微镜下将测微尺清晰的调整到视野的中央,适当移动载台测微尺,使二种尺子的刻度重合,找出二尺的重合刻度线,根据二条重合线间小格数的比值,计算目镜测微尺在物镜下每小格的数值(μm)如:目镜测微尺的77小格(0→77)与载台测微尺的30小格(0.7→1.0)相重合(图1-3),则目镜测微尺在物镜下每小格为10μm ×30÷77=3.89μm。一般需测试数次,取其平均值。如果接物镜和接目镜的放大倍数改变,目镜测微尺应重新校正。

(2)细微物体的测量:将欲测量物体封于载玻片上,于显微镜下用已校正的目镜测微尺测量其长度或直径为目镜测微尺的几小格,然后乘以每小格的μm数即得。如:高倍镜下测得薄荷腺鳞直径为24小格,即为3.89μm ×24=93μm。微细物体的测量,通常在高倍接物镜下测量,测定结果比较准确,但在测量较长的物体,如纤维、导管或非腺毛的长度时,则用低倍接物镜测量较好。

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图1 显微测量尺

1.目镜测微尺; 2. 镜台测微尺; 3. 目镜测微尺的标定

4.显微绘图技术 在中药的性状和显微鉴定工作中,图可以集中地突出表现实物的主要特征,有些特征用图比摄影照片效果还好,因此除去用文字记录观察到的外形、组织、细胞及内含物特征外,有时还需要绘出中药材的外形和显微图,以补充文字叙述的不足。绘制精确的图形要根据观察的实物进行,对所要描绘的特征要仔细观察后,再进行描绘。因此,绘图是中药鉴定和研究工作中的一项基本技能。绘图的精确与好坏,明显地影响中药鉴定和研究的结果与质量。中药鉴定工作中,常用绘图方法有徒手绘图法和显微描绘法两种,若按绘图工具则常分铅笔绘图法和墨线绘图法两种。绘制显微组织简图,要用通用的代表符号来表示,要求比例正确,形态逼真,结构清楚,对中药性状图还要求富有立体感,不能随意夸张和任意涂影。要正确绘出实物的立体结构图,必须有一定的透视知识,如前大、后小,近明、远暗,透视方向一致等基础知识。

(1) 绘图的一般原则:1)一切结构均用线条来表示。线条要求粗细均匀,圆滑,明暗一致。2)所有结构线条不能用尺或其他圆规或曲线板等工具代画,必须徒手作图,以表示生物的自然形态。3)显示立体结构可用透视线条来表示。对球形、圆柱体或圆锥体的立体结构可以用圆点衬托明暗光线的方式,而不可用任何涂影来表示。点要小而圆,由密到稀逐步过渡。4)各部位应先画出引线再注文字。引线用直尺画实线来表示,要求细直、均匀、不交叉,以免误指。图内的结构名称,可直接用文字写明,也可用数码代注,再在图下集中注明。注字书写要求清楚、端正。图下需注明标本的名称、部位和放大倍数。

(2)徒手绘图法的步骤:1)选择最典型的标本或结构。2)仔细观察各部位的形状和结构及其间的比例关系和较明显的立体结构。3)用较淡的铅笔(2H或4H),按照实物或显微图像的比例关系和立体投影画出轮廓草图,经反复对照修改后,再用较浓的铅笔(HB或2H)绘出修改图。4)画引线,注字。 (3)描绘器的使用及描绘图放大倍数的计算:描绘器是描绘显微镜下所见物体的物像时所用的一种仪器,分为平镜反射式和棱镜反射式两种,它们的基本原理是相同的,主要是利用两组光学系统配合,将显微镜中的物像和图面的像迭合,同时送到观察者的眼中(图2)。 平镜反射式通称阿培式描绘器,在目镜上方的棱镜是由两个三棱镜粘合在一起,棱镜粘合面上镀银,仅中央留有一圆形小孔,显微镜中的物像通过这个小孔进入观察者眼中。因此,观察者可同时看到微镜中的物像和图面的像互相迭合在一起,同一双眼睛同时看到载物台酌物体和图板上的铅笔、图纸,这样即可进行描绘。显微描绘器需配以绘图板。棱镜反射式的原理与阿培式描绘器相似,只是用三棱镜代替平面镜。 显微描绘器使用时取下显微镜的接目镜,装上描绘器,如不是附属在目镜上的描绘器尚需加上目镜,调节物像清晰后,再调绘图板的倾斜度,使与描绘器的角度相一致,用显微描绘器上的滤光片调节光线强弱,使视野中的物像及绘图纸上铅笔均较清晰,即可进行描绘。 绘图时,先用HB型铅笔轻轻依物像描出组织等轮廓,再描绘其他细微特征。如要画的物体大于一个视野,则画完一个视野后,同时平移标本片和绘图纸,使描好的目的物像仍有少部分在视野中并重合,再如上法继续描绘至整个物体画完。

描绘图的放大倍数,即图纸上描绘图大小被物像实物的大小除之即得。

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图2 显微绘图原理

1.物镜; 2.目镜; 3.棱镜镀银面; 4.反射棱镜; 5.绘图板

(4)显微组织简图的画法和有关代表符号 显微组织简图是用来表示在低倍镜下,见到的中药各组织和某些特征排列的位置和分布情况及比例关系,用国际通用的代表符号,画成较简明的组织构造图,使能清晰地了解该器官组织构造的全貌。画法同徒手绘图。常用的各种组织和细胞内含物的代表符号(图2)。

木栓层 厚角组织 表皮 木质部

射线 形成层 维管束 薄壁组织

分泌组织 石细胞 韧皮部 簇晶

图3 植物组织、后含物简图常用符号

(五)作业

1.徒手切片制作一张根类或茎类(麦冬或牛膝)的组织横切面,并绘出其横切面组织简图。

2.制作一张表面制片(如洋葱)。

3. 制作贝母粉末片,并用描绘器描绘出贝母的大、中、小型淀粉粒特征图。

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4. 制作粗茎鳞毛蕨叶柄解离制片2张,并绘出其管胞特征图。在显微镜下,测量出粗茎鳞毛蕨叶柄解离制片中管胞的长度与直径。

5. 制作一张粉末片(如板蓝根或牛膝根),绘出粉末特征图。 6. 思考使用显微镜要注意哪些事项?

实验二 生药的水分、灰分、浸出物及杂质检查法 一、目的要求

1.掌握水分的测定方法。

2.掌握灰分及酸不溶性灰分的测定方法。

3.掌握浸出物的测定方法及杂质检查法。 二、仪器、试剂

1.仪器 分析天平、天平、扁形称量瓶、粉碎机、坩埚、表面皿、锥形瓶(250ml、500ml)、移液管(20ml、25ml、50ml、l00ml)、蒸发皿、水分测定器(图1)、培养皿、干燥器、氯化钙干燥管、电炉、烘箱、箱形电阻炉(马福炉)、定量滤纸(无灰滤纸)。

2.试剂 五氯化二磷、氯化钙、10%硝酸铵、稀盐酸、甲苯、乙醇。 三、实验材料 大青叶、大黄、当归、人参、砂仁 。 四、实验内容 1.水分测定 测定用的样品,一般先破碎成直径不超过3mm的颗粒或薄片,直径在3mm以下的花类、种子和果实类中药,可不破碎,如采用减压干燥法需先经二号筛。

(1)烘干法:本法适用于不含或少含挥发性成分的中药。供试品2~5g,平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中,厚度不超过5mm,疏松样品不超过10mm,精密称定,打开盖在100一105℃干燥5小时,将瓶盖好,移置干燥器中,冷却30分钟,精密称定重量,再在上述温度干燥1小时,冷却,称重。至连续两次称重的差异不超过5mg为止,根据减失的重量,计算供试品中含有的水分的百分数。

(2)甲苯法:本法适用于含挥发油成分的中药。

1)仪器装置(实验图1):使用前,全部仪器应清洁,并置烘箱中烘干。

2)甲苯须先加少量水,充分振摇后放置,将水分分离弃去,甲苯经蒸馏后使用,或用化学纯甲苯直接测定。

3)取供试品适量(约相当于含水量1~4m1)精密称定置A瓶中,加甲苯约200ml,必要时加入玻璃珠数粒,将仪器各部分连接,自冷凝管顶端加甲苯,至充满B管的狭细部分,将A瓶置电热套中或用其他适宜方法缓缓加热,待甲苯开始沸腾时,调节温度,使每秒钟馏出2滴,待水分完全馏出,即测定管刻度部分的水量不再增加时,将冷凝管内部先用甲苯冲洗,再用饱蘸甲苯的长刷或其他适宜的方法,将管壁上附着的甲苯推下,继续蒸馏5分钟,放冷至室温,拆卸装置,如有水粘附在B管的管壁上,可用蘸甲苯的铜丝推下,放置,使水分与甲苯完全分离,可加亚甲蓝粉末少量,使水染成蓝色,以便分离观察。检读水量,并计算成供试品中含有水分的百分数。

(3)减压干燥法:本法适用于含挥发性成分的贵重药品。

1)取直径12cm左右的培养皿,加入新鲜五氧化二磷干燥剂适量,使铺成0.5~lcm的厚度,放入直径30cm减压干燥器中。

2)取供试品2~4g,混合均匀,分取约0.5~1g,置已在供试品同样条件下干燥称重的称瓶中,精密称定,打开瓶盖,放入上述减压干燥器中减压至2.67kPa(20mmHg)以下,持续半小时,室温放置24小时。在减压干燥器出口连接新鲜无水氯化钙干燥管,打开活塞,待内外压一致,关闭活塞,打开干燥器,盖上瓶盖,取出称瓶,迅速精密称定重量。计算供试品中含有水分的百分数。

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2.灰分测定 供试品须粉碎,过2号筛,混合均匀。 (1)总灰分测定法:取供试品2~3g(如须测定酸不溶性灰分,可取供试品3~5g)置炽灼至恒重的坩埚中,称定重量(精确至0.0lg)缓缓炽灼,至完全碳化时,逐渐升高温度500~600C,使完全灰化并至恒重,根据残渣重量,计算供试品中含灰分的百分数。如样品不易灰化,可将残渣放冷,加热水或10%硝酸铵溶液2ml,使残渣湿润,然后置水浴上蒸干,残渣照前法炽灼,至坩埚内容物完全灰化。

(2)酸不溶性灰分测定法:取上项所得的灰分,在坩埚中注意加入稀盐酸l0ml,用表面皿覆盖坩埚,置水浴上加热10分钟,表面皿用热水5ml冲洗,洗液并入坩埚中,用无灰滤纸滤过,坩埚内的残渣用水洗于滤纸上,并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。滤渣连同滤纸移至同一坩埚中,干燥,炽灼至恒重。根据残渣重量,计算供试品中含酸不溶性灰分的百分数,

3.浸出物的测定 样品须粉碎,过2号筛,混合均匀。 (1)水溶性浸出物的测定:①冷浸法 取供试品约48,称定重量(准确至0.0lg)置250~300ml锥形瓶中,精密加入水l00ml,密塞,冷浸,前6小时内时时振摇,再静置18小时,用干燥滤器迅速滤过,精密量取滤液20ral,置已干燥至恒定的蒸发皿中,在水浴上蒸干后,于105℃干燥3小时,移置干燥器中冷却30分钟,迅速精密称定重量。除另有规定外,以干燥晶计算供试样品中含水溶性浸出物的百分数。②热浸法 取供试品2~4g,称定重量(准确至0.0lg)置100~250m1的锥形瓶中,精密加水50~l00ml,塞紧,称定重量,静置1小时后,连接回流冷凝管,加热至沸腾,并保持微沸1小时,放冷后,取下锥形瓶,塞紧,称定重量,用水补足减失的重量,摇匀,用干燥滤器滤过。精密量取滤液25ml,置已干燥恒定的蒸发皿中,在水浴上蒸干后于105℃干燥3小时,移至干燥器中,冷却30分钟,迅速精密称定重量,除另有规定外,以干燥品计算供试品含水溶性浸出物的百分数。

(2)醇溶性浸出物的测定:照水溶性浸出物测定法测定(热浸法须在水浴上加热),以各该品种项下规定浓度的乙醇或甲醇,代替水为溶剂。

4.杂质检查 杂质系指来源与规定相同,但其性状或部位与规定不符;来源与规定不同的物质;无机杂质,如砂石、泥块、尘土等。

检查方法:取规定量的供试品,摊开,用肉眼或扩大镜(5~10倍)观察,将杂质拣出,如其中有可以筛分的杂质,则通过适当的筛,将杂质分出。将各类杂质分别称重,计算其在供试品中的百分数。

图1 水分测定器(甲苯法)

A.500ml短颈圆底烧瓶; B.水分测定管; C.直形冷凝管

五、作业

1. 计算所测样品中的水分含量。

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2. 计算所测样品的总灰分和水浸出物的含量。 六、附注

1. 灰分测定必须掌握好称量技术和恒重概念。

2. 浸出物测定和水分测定所用的仪器必须清洁、干燥。

实验三 植物细胞构造及后含物

一、目的要求

1.熟悉植物细胞的基本结构

2.熟悉淀粉粒、草酸钙结晶的显微特征及类型 3.学会撕取表皮制作临时标本片的方法 4.学会粉末临时标本片的制作方法 二、仪器、试剂

仪器:酒精灯、盖玻片、载玻片、镊子、解剖针、擦镜纸、吸水纸、火柴、绘图铅笔(HB、2H、4H)、直尺和擦皮。

试剂:甘油、水、水合氯醛试液、甘油醋酸试液、碘试液。 三、实验材料

材料:洋葱、马铃薯、半夏、贝母、大黄、黄柏、半夏。 四、实验内容及步骤:

(一)观察洋葱鳞叶表皮细胞

1、操作:准备洁净的载玻片和盖玻片各一片,滴加一滴蒸馏水于载玻片中央备用。取洋葱鳞叶,撕取3-5毫米的内表皮,置于载玻片蒸馏水中,展平,盖上盖玻片,防止产生气泡,用吸水纸吸去多余的水。

2、观察:将标本片置于显微镜下观察,可见表皮细胞为长方形,排列整齐,无细胞间隙,细胞壁即为每个长方形细胞的四周壁,可分辨出胞间层和初生壁。

3、绘图:用铅笔绘出显微镜下观察到的长方形细胞的特征。 (二)观察马铃薯块茎、半夏、贝母的淀粉粒

1、操作:准备洁净的载玻片和盖玻片各一片,切取马铃薯块茎一小块,用刀刮取少许混浊液于载玻片中央,加一滴蒸馏水,盖上盖玻片,防止产生气泡,用吸水纸吸去多余的水。另用半夏、贝母粉末少量,加水装片。

2、观察:将三种标本片置于显微镜下观察,可见淀粉粒大多为单粒,少数为复粒。单粒多呈大小不等的卵圆形,较小的呈圆形,有一个明亮的脐点常偏于较小的一端,并由明暗交替的层纹环绕。

3、绘图:用铅笔绘出显微镜下观察到淀粉粒的特征。并比较三种淀粉粒形态的区别。 (三)观察大黄、黄柏、半夏的草酸钙结晶

1、操作:准备洁净的载玻片和盖玻片各一片,取少量大黄、黄柏、半夏于载玻片中央,加一滴蒸馏水,盖上盖玻片,防止产生气泡,用吸水纸吸去多余的水。

2、观察:将三种标本片置于显微镜下观察,可见草酸钙结晶形态各不相同。

3、绘图:用铅笔绘出显微镜下观察到淀粉粒的特征。并比较三种淀粉粒形态的区别。 五、思考题

如何从草酸钙结晶形状鉴别三种生药:大黄、黄柏、半夏?

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实验四 保护组织、分泌组织

一、实验目的

1.辨认气孔、毛茸的显微结构特征。 2.辨认油细胞、油室的显微特征。 二、实验主要仪器及试剂

仪器:酒精灯、盖玻片、载玻片、镊子、解剖针、擦镜纸、吸水纸、火柴、绘图铅笔(HB、2H、4H)、直尺和擦皮。

试剂:甘油、水、水合氯醛试液、甘油醋酸试液、碘试液。 三、实验材料

材料:女贞叶、金银花、艾叶、橘皮、肉桂。 四、实验内容及步骤 (一)观察女贞叶的气孔

1、 取女贞叶,撕取下表面,置于载玻片中央,加一滴水合氯醛,盖上盖玻片,防止产生气泡,用吸水纸吸去多余的水。

2、观察:将标本片置于显微镜下观察,可见气孔。 3、绘图,画出气孔。

(二)观察金银花和艾叶粉末的非腺毛、腺毛

1、操作:准备洁净的载玻片和盖玻片各一片,取少许金银花粉末于载玻片中央,加一滴水合氯醛,盖上盖玻片,防止产生气泡,用吸水纸吸去多余的水。

2、观察:将标本片置于显微镜下观察,可见非腺毛、腺毛各不相同。

3、绘图:用铅笔绘出显微镜下观察到的长方形细胞的特征。并比较两类药物石细胞形态的区别。

(三)观察橘皮的油室

1、操作:准备洁净的载玻片和盖玻片各一片,滴加一滴水合氯醛于载玻片中央备用。徒手切取薄薄的橘皮的表皮,置于载玻片水合氯醛中,展平,盖上盖玻片,防止产生气泡,用吸水纸吸去多余的水。

2、观察:将标本片置于显微镜下观察,可见油室为椭圆形,周围细胞排列整齐,无细胞间隙。室内可见淡黄棕色油滴。

3、绘图:用铅笔绘出显微镜下观察到的长方形细胞的特征。 (四)观察肉桂的油细胞

1、操作:准备洁净的载玻片和盖玻片各一片,取少许肉桂粉末于载玻片中央,加一滴水合氯醛,盖上盖玻片,防止产生气泡,用吸水纸吸去多余的水。 2、观察:将标本片置于显微镜下观察,可见油细胞。 3、绘图:用铅笔绘出显微镜下观察到的长方形细胞的特征

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实验五 机械组织、输导组织

一、实验目的

1.辨认石细胞、晶纤维的显微结构特征。 2.辨认导管的显微特征。 二、实验主要仪器及试剂

仪器:酒精灯、盖玻片、载玻片、镊子、解剖针、擦镜纸、吸水纸、火柴、绘图铅笔(HB、2H、4H)、直尺和擦皮。

试剂:甘油、水、水合氯醛试液、甘油醋酸试液、碘试液。 三、实验材料

材料:梨子、黄柏、厚朴、甘草、黄豆芽。 四、实验内容及步骤

(一)观察梨的石细胞,黄柏、厚朴的分支石细胞

1、操作:准备洁净的载玻片和盖玻片各三片,取少许梨核附近果肉、黄柏、厚朴粉末于载玻片中央,加一滴水合氯醛,盖上盖玻片,防止产生气泡,用吸水纸吸去多余的水。

2、观察:将标本片置于显微镜下观察,可见石细胞类方形、类长方形、类圆形,成团或散在,孔沟明显,胞腔小。

3、绘图:用铅笔绘出显微镜下观察到的长方形细胞的特征。并比较两类药物石细胞形态的区别。

(二)观察黄柏、甘草粉末的晶纤维

1、操作:准备洁净的载玻片和盖玻片各二片,取少许黄柏、甘草粉末于载玻片中央,加一滴水合氯醛,盖上盖玻片,防止产生气泡,用吸水纸吸去多余的水。

2、观察:将标本片置于显微镜下观察,可见晶纤维各不相同。

3、绘图:用铅笔绘出显微镜下观察到的晶纤维的特征。并比较两类药物晶纤维形态的区别。

(三)观察黄豆芽茎的导管

1、操作:准备洁净的载玻片和盖玻片各一片,取一段黄豆芽的茎于载玻片中央,另用一载玻片压平茎、用牙签轻轻挑开,加一滴水合氯醛,盖上盖玻片,防止产生气泡,用吸水纸吸去多余的水。

2、观察:将标本片置于显微镜下观察,找出有几种导管。

3、绘图:用铅笔绘出显微镜下观察到的导管的特征。并比较各类导管形态的区别。

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实验六 色谱法在中药鉴定中的应用

一、目的及要求

1. 熟悉有关层析法的原理及操作方法。 2. 熟悉层析法在生药成分分析上的应用。 二、仪器、试剂

1.仪器 硅胶G板,聚酰氨薄膜,烧杯,250ml圆底烧瓶(14个),冷凝管(14个),漏斗,滤纸,坩埚,小的磨口三角烧瓶,层析缸

2.试剂 乙酸乙酯,甲醇,甲苯,甲酸,乙醚,丙酮,环己烷,盐酸,三氯化铁,盐酸小檗碱对照品,丹皮酚对照品。 三、实验材料

药材粉末:牡丹皮,黄连 四、实验内容

(一)牡丹皮的鉴定

1. 供试品液的制备 本品粉末1g,加乙醚10ml,密封,振摇10分钟,过滤,滤液挥干,残渣加丙酮2 ml溶解,作供试液备用。

2.对照品溶液的制备 取丹皮酚对照品加丙酮制成每1ml含5mg的溶液,作为对照品

溶液。

3.薄层层析

点样:取硅胶G板5×20cm,牡丹皮供试品液,丹皮酚对照品分别在距其底端2cm处点样 1-2μl。

展开:以环己烷-醋酸乙酯 (3:1) 为展开剂展开。

4.检视 展开约10cm后,取出,晾干;喷以盐酸酸性5%三氯化铁乙醇溶液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱在与对照品相应的位置显相同的色斑。

5.显色结果

(二) 黄连、黄柏的鉴定

1.供试品液的制备 取黄连、黄柏药材粉末各1g,置三角烧瓶中,加甲醇20ml,冷浸过夜,滤过,即得。

2.对照品溶液的制备 取盐酸小檗碱对照品,加甲醇制成每1ml含0.5 mg的溶液,为对照品溶液。

3.薄层层析 点样:取硅胶CMC板5×20cm,黄连、黄柏供试品液分别在距其底端2cm处点样 1-2μl。 展开:以苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-水 (6:3:1.5:1.5:0.5)展开,展开时展开缸一侧槽中加入展开剂,另一侧槽中放入等体积浓氨溶液饱和。

4.检视

展开约10cm后,取出,晾干,紫外灯(365nm)下检视。 五、作业

记录实验结果并计算Rf值,绘薄层色谱图。 六、思考题

1. 层析法在生药的成分分析方面有何重要作用?

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实验七 黄连、黄芪、甘草、人参的鉴定

一、实验目的

1.掌握黄芪、甘草的性状和显微鉴别特征。 2.掌握黄连的性状和粉末显微鉴别区别特征。 3. 掌握人参的性状和粉末显微鉴别区别特征。 二、实验主要仪器及试剂

仪器:酒精灯、盖玻片、载玻片、镊子、解剖针、擦镜纸、吸水纸、火柴、绘图铅笔(HB、2H、4H)、直尺和擦皮。

试剂:甘油、水、水合氯醛试液、甘油醋酸试液、碘试液。 三、实验材料

材料:黄连、人参、黄芪、甘草。 四、实验内容及步骤 (一)黄连鉴定

1、性状鉴定 观察味连性状 味连根茎多簇状分枝,有时弯曲,形如倒鸡爪。分枝类圆柱状,长3~7cm直径0.3~0.9cm。表面黄棕色或灰黄色,粗糙,有不规则结节状隆起,上有较密的环纹,着生须根或须根残基,并有鳞叶,顶端常有残留的茎基和叶柄基,根茎中段的节间有时较细,表面光滑,习称“过桥’’,长l~4参谋。质硬,折断面不平整;横断面可见皮部棕红色或暗棕色,木部鲜黄色或橙黄色,具放射状统纹理。髓部红棕色,有时中空,气微,味极苦。

2、取黄连粉末分别以蒸馏水及水合氯醛试液装片,镜检下列特征:

①石细胞鲜黄色、类圆形、类方形或类多角形,有时稍延长,长径25~ 75μm,孔沟及纹孔明显。

②韧皮纤维鲜黄色,纺锤形或长梭形,直径:20~40μm,壁较厚,纹孔少。 ③木纤维众多,常成束,鲜黄色,直径l 5~35μm,壁具裂隙状纹孔。 ④导管多为孔纹导管,也有具缘纹孔,网纹及螺纹导管。 ⑤鳞叶表皮细胞类方形或长方形,壁薄曩垂厨壁微波状。

⑥淀粉粒单粒长圆形、肾形或类球形,直径l~l0μm,复粒少,由2~4分粒组成。 3、作业

绘黄连粉末显微特征图,示石细胞、韧皮纤维、木纤维、导管、鳞叶表皮细胞及淀粉粒。

(二)黄芪鉴定

l、观察蒙古黄芪的原植物标本,注意其属于豆科植物的形态特征。

2、性状鉴定 观察黄芪生药,注意其表面色泽,皮孔形状,栓皮有无剥落;折断面是否呈纤维状,横断面形成层环是否明显?观察皮部与木部的色泽,尝味。 3、镜检黄芪粉末,分别以蒸馏水和水合氯醛试液装片,注意以下特征:

①纤维 众多,成束,细长,直径9~36μm,壁厚,非木化,孔沟不明显。另取黄芪生药,刮取少量纤维(粉末),透化后装片,注意纤维的先端常纵裂成扫帚状。

②导管 主为具缘纹孔导管,纹孔呈椭圆形,类方类或斜方形。 ③木栓细胞表面观呈多角形或类方形。

④淀粉粒单粒类圆形、椭圆形或类肾形,直径3~13μm,复粒由2~4分粒组成。 4、作业

绘黄芪粉末特征图,示纤维,导管,木栓细胞与淀粉粒。 (三)甘草鉴定

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l、性状鉴定 观察甘草生药,注意其表面色泽,有无纵皱及横向皮孔?断面色泽与特征、质地如何?将它折断,有无粉尘飞扬?尝味。

2、镜检甘草粉末 分别以蒸馏水和水合氯醛试液装片,注意以下特征:

①纤维 众多,成束或散离,细长,直径6~14μm,壁厚,木化或非木化,孔沟不明显;晶鞘纤维易察见,草酸钙方晶类双锥形,长方形或类方形,含晶细胞的壁增厚,微木化或非木化。

②导管 主为具缘纹孔导管,多破碎,纹孔椭圆形或略呈斜方形,对列或互列,有的导管旁可见小型具缘纹孔管胞。 .

③木栓细胞棕红色,壁薄,微木化,表面观呈多角形。

④淀粉粒众多,单粒椭圆形、卵形或类球形,直径3~16μm,脐点点状或短缝状。复粒稀少,由2分粒组成。此外,尚有少数黄棕色或红棕色的色素块。 3、作业:

绘甘草粉末显微特征图,示晶纤维,具缘纹孔导管,木栓细胞和淀粉粒。 (四)人参鉴定

1.观察人参的性状特征

人参商品主要有野山参(野生品)和园参(栽培品)。园参的规格主要有生晒参,红参,白参和参须。

野山参:主根粗短,多具2个分支,有的呈“人”形,上端有细密而深陷的环纹。芦头(根茎)细长,几与主根等长,密具芦碗(茎痕),其下有1-3个下垂生长的不定根(钉)。支根有许多细长的须根,可见疣状突起。分别习称“雁脖芦,枣核钉,短横体,铁线纹,珍珠须”。 生晒参:主根圆柱形,长3-15cm,具疏浅断续的环纹,灰黄涩,芦头上芦碗较少,须根上疣状突起不明显。横切面形成层环明显,散有棕色小点。味苦而回甜。 红参:全体红棕色,角质样,主根圆柱形或加工成长方形。 白参:类白色,表面可见点状针刺痕。味微甘。 2.显微鉴定

人参粉末:米黄色,有香气,味微甘,辛,有吸湿性。

取人参粉末少许,用蒸馏水和水合氯醛试液透化装片,镜下观察特征:(1)树脂道碎片呈管状,内含黄棕色分泌物,其周围薄壁组织中亦可见分泌物。(2)草酸钙簇晶棱角大多锐尖,稀有呈钝角的。(3)导管主要为网纹,梯纹导管。网纹导管纹孔较大。(4)淀粉粒极多,单粒和复粒。 3、作业

绘人参粉末显微特征图,示草酸钙簇晶、树脂道、导管、淀粉粒等。 五、思考题

1、如何能方便而有效地鉴别甘草和黄芪粉末?

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实验八 番泻叶、金银花和红花的鉴定

一、实验目的

1.掌握番泻叶的显微鉴别特征

2.掌握薄荷、金银花、红花的粉末显微鉴别特征 二、实验主要仪器及试剂

仪器:酒精灯、盖玻片、载玻片、镊子、解剖针、擦镜纸、吸水纸、火柴、绘图铅笔(HB、2H、4H)、直尺和擦皮。

试剂:甘油、水、水合氯醛试液、甘油醋酸试液、碘试液。 三、实验材料

材料:番泻叶、金银花、薄荷、红花。 四、实验内容及步骤 (一)番泻叶鉴定 l、性状鉴定

狭叶番泻叶:叶片披针形至狭长披针形,叶断急尖或渐尖,中脉突出,叶基楔形,略不对称。黄绿色。有疏毛或光滑。叶片纸质。叶柄圆柱形,疏生柔毛。气无,味苦而稍有黏性。

尖叶番泻叶:叶片略小,基部不对称。 2、显微鉴定

番泻叶粉末:非腺毛壁厚,具疣点,常弯曲成压状伏,先端锐尖。表皮细胞多角形,垂周壁平直,平周壁光滑,具平轴式气孔,副卫细胞常大小不一。纤维束伴有成行的薄壁细胞,细胞中各含有1个草酸钙棱晶,形成晶鞘纤维。草酸钙簇晶常存在于叶肉细胞中。叶横断碎片可见等面型构型,上,下表皮内侧各有1列栅栏细胞。另可见无色透明的块状黏液质。 3、作业

绘番泻叶粉末显微特征图。 (二)金银花的鉴定 1、性状鉴定

取金银花生药,观察其性状可见,干燥花蕾呈棒状,上粗下细,略弯曲,长1.5~3cm 。表面淡黄色,密被毛茸。花冠筒上部稍开裂成二唇形,内有雄蕊5枚,雌蕊1枚,气清香,味淡微苦。 2、显微鉴定

取金银花粉末,以水合氯醛装片后镜检,可见以下特征:

(1)腺毛多见,有两种:一种头部倒圆锥形,顶部平坦,约10~30个细胞,排成2~4层,柄2~5个细胞;另一种头部类圆形或扁圆形,约6~20个细胞,柄2~4个细胞。

(2)非腺毛有两种:一种为厚壁性,多为单细胞,表面有微细疣状突起,有的具角质螺纹;另一种为薄壁性,单细胞,甚长,弯曲或皱缩。

(3)花粉粒类球形,表面有细密短刺及颗粒状雕纹,具3孔沟。 (4)草酸钙簇晶多见,常存在于萼筒组织中。 3、作业

绘金银花粉末图、示腺毛、非腺毛及花粉粒。 (三)红花的鉴定 1、 性状鉴别

观察红花生药性状特征:管状花,黄红色或红色,花冠筒细长,柱头长圆柱形,露出于花药筒外,质轻,柔润; 气微香,味微苦。花浸水中,水被染成金黄色。

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2、取红花粉末以水合氯醛试液装片,镜检下列特征: (1)分泌细胞呈长管道状,充满黄色或红棕色分泌物。 (2)花粉粒深黄色,类球形,具3个萌发孔,外壁有短刺。 (3)花柱碎片深黄色,表皮细胞呈圆锥形,先端尖。

(4)花冠裂片表皮细胞呈短绒毛状。 草酸钙方晶呈方形或长方柱形。 3、 作业

绘红花分泌细胞、花粉粒深黄色,花柱碎片、表皮细胞、草酸钙方晶等 五、思考题

1.红花与金银花的花粉粒有什么区别?

实验九 茯苓、半夏、贝母和天麻的鉴定

一、实验目的

1.掌握茯苓、半夏和贝母的显微鉴别特征 2.掌握天麻的粉末显微鉴别特征 二、实验主要仪器及试剂

仪器:酒精灯、盖玻片、载玻片、镊子、解剖针、擦镜纸、吸水纸、火柴、绘图铅笔(HB、2H、4H)、直尺和擦皮。

试剂:甘油、水、水合氯醛试液、甘油醋酸试液、碘试液。 三、实验材料

材料:茯苓、半夏、贝母、天麻。 四、实验内容及步骤 (一)茯苓的鉴定

1、性状鉴定 观察茯苓性状,注意其形状、表面特征、色泽、质地、断面等特征。 2、显微鉴定

茯苓粉末的观察

(1)甘油醋酸液装片:不规则颗粒状团块,末端钝圆的分枝状团块及少量菌丝。 (2)5%KOH溶液装片:菌丝细长、有分枝、无色或棕色、长短不一、横隔偶见。 3、作业

绘茯苓粉末的显微特征图,示茯苓团块及茯苓菌丝。 (二)半夏和贝母的鉴定

1、操作:准备洁净的载玻片和盖玻片各两片,取少许半夏和贝母粉末于载玻片中央,加一滴水合氯醛,盖上盖玻片,防止产生气泡,用吸水纸吸去多余的水。

2、显微鉴别: 观察各药的特征并进行比较。

3、绘图:用铅笔绘出显微镜下观察到细胞的特征。 (三)天麻的鉴定

1、操作:准备洁净的载玻片和盖玻片各一片,取少许天麻粉末于载玻片中央,加一滴水合氯醛,盖上盖玻片,防止产生气泡,用吸水纸吸去多余的水。

2、显微鉴别: 观察天麻的特征并进行比较。

3、绘图:用铅笔绘出显微镜下观察到细胞的特征。

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实验十 动物及矿物类中药

一、实验目的

1.了解常见的动物及矿物生药性状特征。 2.掌握一些珍贵动物药材的鉴别要点。 二、实验材料

牛黄 羚羊角 熊胆 麝香 蟾酥 全蝎 僵蚕 蜈蚣 蛤蚧 阿胶 鳖甲 斑 蝥 地龙 牡蛎 珍珠 朱砂 赭石 雄黄 石膏 三、实验内容

1.观察所示动物生药标本的性状特征。 2.观察所示矿物生药标本的性状特征。 四、思考题

1.各种动物类生药的主要性状识别点是什么?

2.矿物类生药性状鉴别主要观察内容是什么?

实验十一 中成药的显微鉴定

一、实验目的

1.综合运用本学年所学知识对中成药进行显微鉴定,大约可以确定该中成药由哪几味中药组成。

2.了解不同价格的中成药其质量情况。 二、实验主要仪器及试剂

仪器:酒精灯、盖玻片、载玻片、镊子、解剖针、擦镜纸、吸水纸、火柴、绘图铅笔(HB、2H、4H)、直尺和擦皮。

试剂:甘油、水、水合氯醛试液、甘油醋酸试液、碘试液。 三、实验材料

牛黄解毒片

四、实验内容及步骤

1、操作:准备洁净的载玻片和盖玻片各二片,取少许牛黄解毒片(一种价格0.2元/10片,另一种价格4元/24片)粉末于载玻片中央,加一滴水合氯醛,盖上盖玻片,防止产生气泡,用吸水纸吸去多余的水。

2、显微鉴别: 观察两种牛黄解毒片的所有特征。 3、绘图:用铅笔绘出显微镜下观察到细胞的特征。 4、推测牛黄解毒片中可能含有哪几种中药。

5、根据观察到的特征,判断两种牛黄解毒片的质量。

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附录一

常用试剂配制法

1、间苯三酚试液

取间苯三酚l g,加95%乙醇20ml使溶解即得。

试料加本液1滴,2~3分钟后,再加浓盐酸l滴,木化细胞壁显红色,红色的深度依木化的程度而异。盐酸需贮在具塞玻璃瓶中,防止吸湿而变稀。此酸用20%过氯酸代替则更好。

2.间苯三酚硫酸试液: 取硫酸5ml.,慢慢加入蒸馏水中,混匀,冷却后加入间苯三酚试液10ml中,混匀即得。 试料加本液1~2滴,木化细胞壁显红色,其显色深度依木化程度而异。由于本液不产生盐酸气,故较上液更好。 3.硫酸苯胺试液:

取硫酸苯胺lg,加水70ml溶解,再加95%乙醇30ml,硫酸3g,混匀即得。 试料加本液1~2滴,木化细胞壁显黄色,且可使草酸钙晶体溶解。

4. 醋酸苯胺试液:

取苯胺l g,加醋酸2ml及50%乙醇97ml,混匀即得。 用途同上,但不会溶解草酸钙结晶。 .

5.碘液:

用N/50碘液,或取N/10碘液10m1加蒸馏水稀释至50ml即得;或取碘化钾7g溶于20m1水中,加碘2.5g溶解后,加水至1 000ml。

试料加本液l滴,淀粉显蓝色至蓝紫色,蛋白质显黄色。 ,

6.硫酸(66%V/V)

取浓硫酸66ml,慢慢加入于适量(约34m1)蒸馏水中,边加过搅拌,冷后补加少量蒸馏水使全量至100 ml即得。 7.氯化锌碘试液:

取碘化钾13g,加蒸馏水21m1溶解。

再加碘1g,搅拌至溶解,然后加入碘化锌40g使溶解即得。此液应遮光贮存,且只能在短时间内稳定,宜装入小形棕色玻璃瓶中备用。

试料加本液1~2滴,纤维素细胞壁显蓝色至蓝紫色,木化细胞壁显黄色至棕色。 8.氢碘酸:

含碘化氢57%的氢碘酸即可。用途与氯化锌碘试液相同,但较灵敏而迅速。 9. 氨制氧化铜试液(简称“铜氨液,,):

有两种配制法:(1)取硫酸铜0.5g,溶于25%氨水10ml。放置数小时后,倾取上清液供用。(2)取碳酸铜0.5 g,入研钵中加水10ml研匀,再逐渐加入浓氨水(比重0.80)10ml,并不断搅拌使溶解即得。本液不稳定(约半月),每次宜少量配制密塞贮存。

试料加本液l~3滴,纤维素细胞壁膨胀而后逐渐溶解。 10.苏丹红(或苏丹Ⅲ)试液:

有二种制法:(A)取苏丹红或苏丹Ⅲ(Sodan Red G或SodanⅢ)0.0lg,加95%乙醇5ml溶解后加甘油5ml混合即得。(B)取苏丹红0.0lg,溶于乙酐20马力加甘油10ml混合即得。 试料加本液1~2滴,木化细胞壁、角质、油脂、蜡质、挥发油、树脂均显红色。 11.紫草试液:

取紫草根粉l g,加90%乙醇10ml浸渍24小时后滤过,滤液中加入等量甘油,混合,

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放置2小时,滤过即得。置棕色玻璃瓶中贮存。在两个月内使用。用途与苏丹红试液相同。 l 2.锇酸试液:

取锇酸0.l g,溶于蒸馏水5ml中,即得。本品须密塞避光贮存。脂肪油遇本液染成棕色至蓝色,挥发油与树脂均不染色。 13.多能试剂:先分别配下列三种溶液:(1)取乳酸20ml,加苏丹红或苏丹Ⅲ至饱和为止,加乳酸30ml稀释。(2)硫酸苯胺0.55g溶于35ml蒸馏水中。(3)碘化钾0.55g及碘0.05g溶于蒸馏水5ml中,再加入55%乙醇5ml,将上述三液混合,搅拌加入浓盐酸(37%)25ml。此液不过滤,直接供用。 试料加本液2~3滴,慢慢加热,必要时补加少量试液,并加盖玻片。木化细胞壁变黄色,木栓化细胞壁变红棕色,脂肪油变红色,淀粉变蓝紫色。 14.三硝基酚(苦味酸)试液:

取三硝基酚l g加蒸馏水或90%乙醇95ml溶解,即得。

蛋白质遇本液呈黄色,染糊粉粒时,须用醇液,以免蛋白质溶解。 . 15.硝酸汞试液即(米龙试液)有两种配制法:

(A)取汞1m1,加发烟硝酸(比重1.52)9ml,反应时须保持混合物冷却。当反应完毕后,加水1 0ml。(B)取氧化汞(红色或黄色品)40g,可加亚硝酸钾液数滴,以恢复其活性。 本液可使含酪氨酸的蛋白质呈砖红色,灵敏度1:20000。 l 6.三氯化铁试液:

取三氯化铁10g溶于蒸馏水l00ml,临用前取此液1 ml,加水9ml稀释。 鞣质及多元酚(黄酮类等)遇本液显蓝黑色或绿色。 1 7.钨酸钠试液:

取钨酸钠1 g与醋酸钠2g,加蒸馏水溶解使10ml,即得。 鞣质遇本液生成黄棕色至红棕色沉淀。 1 8.ɑ-萘酚试液

取ɑ-萘酚lg,溶于95%乙醇l 0ml即得。

本液与30%W/W硫酸配合应用,可使菊糖呈胭脂红色并溶解。 20.钌红试液:

取钌红80mg,加l0%醋酸铅溶液100ml使溶解即得。此液易失效,宜临用前配制。避光贮存,用量少时,可于临用前,用针尖挑取少量钌红溶于少量l0%醋酸铅溶液中,使呈酒红色,即得。直接将钌红溶于蒸镏水中较好。

含果胶质的细胞壁,酸性粘朊及糖元,遇本液染成红色。 , 21.可拉林钠溶液:

有两种配制法:(A)取可拉林或玫红酸0.5g,溶于90%乙醇l0ml中(甲液),另

取结晶碳酸钠25g,溶于蒸馏水100ml中(乙液)。将两液分别装瓶贮存,临用时取甲液1ml与乙液20ml混合即得。(B)取碳酸钠3g溶于7ml蒸馏水中,临用时,取此液少量,加可拉林l小片,使呈粉红色即得。混合液不耐贮存。

胼胝体及筛板遇此液呈粉红色,木化细胞壁,淀粉粒及某些粘液质也可染成粉红色。 22.亚甲兰试液:

配成两种溶液供用。(1)醇溶液:取亚甲兰0.1 g,溶于95%乙醇25ml中;(2)甘油溶液:取亚甲兰0.1 g溶于95%乙醇及甘油25ml中o 、

检识粘液时,先加醇溶液l~2滴,加盖玻片过l~2分钟后。再加入甘油溶液粘液呈天蓝色o

23.硫堇试液: ’

取硫堇0.2ml,溶于25%乙醇100ml即得。

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粘液质或粘朊遇本液染成红色至紫色并膨胀成球形团块o 24.墨汁:

取商品墨汁,于临用前加蒸馏水稀释l0倍。

粘液质或粘朊不着色而呈透明块状,其它细胞壁及细胞内含物均呈黑色o 25.水合氯醛液:

取水合氯醛50g,加水20ml,使溶解即得。 此为常用透化剂,可使皱缩的细胞膨胀,并可溶解多种成分,如叶绿素、树脂、挥发油、蛋白质、淀粉等。 26.乳酸氯醛:

取水合氯醛50g,溶于乳酸50ml中即得。 为透化剂,用于难透化样品,用法同水合氯醛。 27.乳酸酚:

取苯酚(石碳酸)2g,乳酸2g,甘油2g与蒸馏水2ml,混合即得。为常用封藏剂之一。 28.甘油醋酸液(史氏溶液):

取甘油,50%醋酸,蒸馏水各等量混合即得。为常用封藏剂之一。 29.稀甘油:

取纯甘油l 0ml加蒸馏水20ml,混合即得;为常用封藏剂之一 30.次氯酸钠溶液(漂白液):

取漂白粉l0g;分次加蒸馏水75ml研匀,另取结晶碳酸钠l 5g溶于25ml蒸馏水中,分次加入漂白粉液中,搅匀放置沉淀后取上清液,必要时过滤。 31.硝铬酸液:

取铬酸(三氯化二铬)l0g,溶于l0%硝酸中',使全量为100ml,即得。用于木化组织的解离。

32.5%氢氧化钾溶液:

取氢氧化钾5g,溶于蒸馏水100ml中,必要时用玻璃棉或垂熔玻璃漏斗过滤即得。用为透化剂及薄壁组织解离剂。亦可用5%氢氧化钠代替。 33.稀氨液(氨溶液、氨水):

含氨(NH4)l0%W/W,取浓氨液40ml,加蒸馏水稀释至全量为100ml即得。 34.盐酸、稀盐酸:

如未指明浓度,盐酸即指浓盐酸,稀盐酸指10%W/W盐酸。 35.硫酸、稀硫酸:

未指明浓度,硫酸即指浓硫酸稀硫酸指1 0%W/W硫酸。 36.醋酸、稀醋酸:

如未指明浓度,醋酸含CH3COOH33%;稀醋酸含CH3COOH4%。 37.乙醇(酒精):

最好用无水乙醇,但未特别指明时,一般可用95%乙醇。 38.甘油明胶:

取明胶(粉末或剪碎)l0g,加蒸馏水60ml,放置2小时后,加入溶有苯酚lg的甘油70ml,在水浴上加热至完全溶解,用带有绸布,玻璃棉或粗滤纸的漏斗保温约60℃过滤。贮存在带玻璃塞的广口瓶中备用。用时入水浴中加热熔化。亦可于熔化后倒人培养皿中,使厚度约5mm的层,冷却凝固后,切成长约5mm的小方块。用时用解剖针取l小块,放在载玻片上,加热熔化。

39.树胶甘油:

取白色阿拉伯胶40g,加水30ml,在水浴上加温至溶解,加入甘油40g,麝香草酚0.lg

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为防腐剂,混匀即得。 40.加拿大香脂:

取加拿大香脂在水浴上蒸发至挥发性物质全部除去,且放冷后能形成硬块时,加适量二甲苯或苯,使形成糖浆状液体。 41.曙红溶液:

取曙红l g,溶于90%乙醇l00ml即得o 42.番红溶液:

取番红l g,溶于50%乙醇100ml即得。必要时可加入50%乙醇稀释。 43.Johason番红溶液:

取番红l g,溶于甲基溶纤维素50ml加95%乙醇25ml,蒸馏水25m1.再加醋酸钠l g与甲醛溶液(含HCH036—40%)2ml混合溶解即得。 醋酸钠起加强染色作用,甲醛起媒染作用。 44.快绿溶液: , _,

取快绿0.5g溶于95%乙醇或无水醇100ml即得。如用甲基溶纤维素(见上)与95%、乙醇的等量混合液代替上述的95%乙醇则更好。 45.Dalafield苏木精、达氏苏木精:

取苏木精l g,溶于95%乙醇6ml(A液),另取硫酸胺铝约l0g 溶于蒸馏水l00ml中,使成饱和溶液(B液),将A液逐滴加入B液中,同时搅拌均匀,然后装入广口瓶中,瓶口用细纱布复盖并扎住,防止灰尘侵入,放在光线充足,空气流通处,经3—5天后,用滤纸过滤。滤液中加入甘油25ml与甲醇25ml,将此液暴露在光线中至呈暗色为止(约需2个月)。再过滤并贮存在带玻塞瓶中,临

用时将此贮存备液加蒸馏水稀释3~4倍。 46.俾士麦棕液:

取俾士麦棕l g,溶于95%乙醇100ml中即得。 47.硫钒酸:

取钒酸铵lg,人玻璃研钵中分次加浓硫酸100ml研匀,放置待沉淀后,取用上清液。此试液必须于临用前配制。 48.碘化汞钾试液:

取二氯化汞1.36g,溶于蒸馏水60ml中,另取碘化钾5g,溶于蒸馏水20ml中, 将二液混合,并加入蒸馏水至全量为 100m1。 49.甲紫溶液:

取甲紫0.7g,溶于蒸馏水100ml中。 50.碘-碘化钾:

取碘1g及10g碘化钾,溶于50ml水中,加热加醋酸2ml用水稀释至100ml。 51.改良碘化铋钾试液:

溶液I:0.95g次硝酸铋溶于10ml醋酸中,加入40ml蒸馏水;溶液II:9g碘化钾溶于20ml蒸馏水中。将二液等体积混合贮存于棕色瓶中。

用于生物碱沉淀反应。显色时,可将此液lml与2ml醋酸10ml蒸馏水混合稀释。 52.硅乌酸试液:

取硅乌酸5g溶于100ml蒸馏水中即得。 53.铁氰化钾试液:

配成l%水溶,临用前配制,贮于棕色瓶o 54.明胶试液:

取明胶lg,研碎,置适量水中于水浴上加热溶解,冷却后补加水全量至100ml。

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55.醋酸铅试液:

取醋酸铅10g,加适量新沸过的冷蒸馏水使溶解,滴加适量醋酸使澄明,再补加新沸冷却蒸馏水至100ml即得。

56.醋酸镁试液: 配成0.5%甲醇溶液。 57.三氯化铝试液: 配成l%甲醇溶液。 58.盐酸羟胺溶液: 配成l%甲醇溶液。 59.斐林试液: 甲液:取36g,结晶硫酸铜溶于20ml水中,再加浓硫酸0.5ml混匀,加水稀释至500ml。 乙液:取173g酒石酸钾钠及71 g氢氧化钠溶于500ml水中,上述二液分别贮于瓶中备用。

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附录二:

常用商品酸碱浓度表

━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 名 称 浓 度(W/W) 当 量 浓 度 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 盐 酸 36.39 12N 硫 酸 94.93 36N 硝 酸 65.68 15N 冰醋酸 99.60 17N 氢氧化铵 25.28 14N ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━

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不同的部分,同时注意学生的反应,吸收老师的优点。同时简单记下自己的疑惑,想老师为什么这样讲。课后及时找老师对本节课的教学进行交流,学习老师的教学方法,体会教师应具备的教态及掌控课堂的方法。 2.备课与上课

来到均中的第2周,科任老师开始叫我备课,内容是蛋白质一节。自己终于有机会走上讲台,真正以一名教师的身份面对阅读,然后查看相关的教案及教学设计,上网查看相关教学视频。在把握好本节课的教学重难点后,就是对教授班级的学生进行学情的分析,不同的学生知识水平是不同的。在备人生的第一节课中,真的是用了很大的功夫。由于是在普通班上的课,考虑到学生对相对抽象的知识学习比较困难,所以采用类比和直观教学,将直观教学法充分贯穿在本节课的教学设计当中。写好教案做好课件后请老师提出修改意见...... 本文来自公务员之家,查看正文请使用公务员之家站内搜索查看正文。

第三篇:师范专业中学教育实习总结

作为师范生地我怀着希望与期盼的心情来到腾冲县第一中学,开始了我的教育实习工作,转眼就到了月30日,我的实习生活也划上了圆满的记号,在这段时间里我紧张过努力过深思过,自信过,指导老师们,学生们见证着我的成长,在这段时间里,我既是学生又是老

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师,作为学生我虚心求教,不耻下问,作为人师,我兢兢业业,倍感骄傲,这段时间我付出很多,收获的更多,也是在这段时间了使我完成了由学生到老师的心理准备和转变,现在我将我学习的情况做如下报告:实习的内容包括两部分课堂教学和班主任工作,基本情况如下; 一课堂教学内容:

本次教学课堂实习主要是实习高一(班级)的地理课教学,课堂实习工作主要是对地理课进行听课,备课,讲课,课后评课课外知道批改作业等。 1,听课

听指导老师在不同班级上课的情况,学习指导教师的讲课方法和教学模式流程,,同时在听课过程中了解学生的情况,听课后设想假如自己上会怎样设计前后进行对比。 2备课

参考之前的听课记录,认真备教材备学生,根据各班学生的特点,预测教学课堂中肯能出现的各种情况,参考配套练习册,结合指导教师的教学方法和教学模式流程及教学标准学校的具体情况设计不同的教学方法,教学环节,写出教案后给指导老师评价,在指导老师指出需要注意的地方后进行修改,最后充分熟悉教案。 3讲课

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经过充分的备课之后进行的是讲课,讲课是根据自己的备课本来讲的同时根据课堂的具体情况来灵活处理各种预测不到的情况,及时改变教学方法,讲课是面对全体学生,以学生为主教态自然仪表大方教学语言简洁声音洪亮语速语调适中,讲课过程中不仅要完成课程内容,还要在课堂上布置课堂练习,观察学生的听课效果,为课后的评课做做准备,也为以后的课堂教学积累经验。 4评课

上完课之后对所上的课进行评价,记下课堂上出现的问题和指导老师提出的意见并再完善和调整教案,课后反思,争取每一次出现的问题下次不再出现 5课外辅导

课后结合课堂效果针对不同的学生进行课后辅导帮助他们解决课堂上不懂的问题 6,批改作业

收课外作业进行批改,对每一本作业本都细心批改,找出学生出错的地方并改正,让学生可以知道自己错在哪,在批改作业的同时在作业中发现问题了解学生的情况,在接下的课堂上做相应的改变进。 再整个实习期间总共完成:,听课讲课修改作业。

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二:班主任工作

我本次班主任实习方面,我在原班主任某某的指导下,完成了很多班主任日常工作,班级工作,与原班主任沟通工作,比如早读,晚自习,课间操,清洁卫生班会,课外活动及自习课堂纪律等,在此期间我对班主任工作做了详细的记载,使自己在实习过程中能够全面的了解教学工作的真理,在班主任实习中我积极主动的和学生交流......

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第四篇:大学生中学教育实习总结

教育实习是师范教育的重要组成部分,是师范教育贯彻理论与实践相结合原则的体现,是培养适应21世纪需要的合格教师的重要环节。作为一名有着教师梦的人来说,教育实习可提高我们各项教师技能。本次教育实习,本人有幸参加学校的混合编队,实习学校是韶关乐昌城关中学。 一、实习目的

1、使自己在大学三年学习到的专业知识、基础理论和教师技能得到一个检验和巩固的机会,并作为自己踏上真正的教学岗位之前的一次演练。

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2、通过观察和了解实习学校教师在教学岗位上的具体工作,向优秀教师学习,更好的提高自己教师技能。

3、通过实习,也可以检查自己在面对真正走上教学岗位的时候还存在哪些方面的不足,从而及时调整与改进,争取以最佳状态走上日后的教学岗位。

4、进一步培养在实际工作中发现问题、分析问题、设计和实施解决问题的能力。

5、在本次教育实习中,更好的学会与人相处,协调自己的各项组织能力,更有团队精神。

二、实习时间安排和主要任务要求 1、准备阶段:月下旬至月20日

钻研教学大纲和教师参考书等资料,认真搜集积累相关的教学资料,认真备课,编写详细教案。完成五个一,根据教育要求认真学习教育实习相关文件,学习教学论和班主任工作在理论知识,进行试讲微格教学,练好三笔字等。

2、见习阶段:第一周月20日至月25日

(1)听实习学校领导介绍学校基本情况,特别是实施素质教育情况,本学期工作计划和学校在管理、教改、科研方面的经验和特色。

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本文来源:https://www.bwwdw.com/article/9v6v.html

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