导师制实验报告-肠道菌群检测-模板 - 图文

三级学科 微生物学及检验 项目编号码_______________

项目——导师制实验报告

实验名称: 肠道菌群分离培养、鉴定及药敏分析 学生姓名: 曾正勇 年 级: 2013医检1班 专 业: 医学检验学 指导教师: 王健 教授 实验日期: 2015年11月4日

安徽理工大学医学院 二O一五 年 十一 月

一、实验概述

细菌:广义的细菌即为原核生物。是指一大类细胞核无核膜包裹，只存在称作拟核区（nuclear region)（或拟核）的裸露DNA的原始单细胞生物，包括真细菌（eubacteria）和古生菌（archaea）两大类群。人们通常所说的即为狭义的细菌，狭义的细菌为原核微生物的一类，是一类形状细短，结构简单，多以二分裂方式进行繁殖的原核生物，是在自然界分布最广、个体数量最多的有机体，是大自然物质循环的主要参与者。

肠道菌群是肠道菌群，人体肠道的正常微生物，如双歧杆菌，乳酸杆菌等能合成多种人体生长发育必须的维生素，如B族维生素（维生素B1、B2、B6、B12），维生素K，烟酸、泛酸等，还能利用蛋白质残渣合成必需氨基酸，如天冬门氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸和苏氨酸等，并参与糖类和蛋白质的代谢，同时还能促进铁、镁、锌等矿物元素的吸收。这些营养物质对人类的健康有着重要作用，一旦缺少会引起多种疾病。人体肠道内寄生着10万亿个细菌，它们能影响体重和消化能力、抵御感染和自体免疫疾病的患病风险，还能控制人体对癌症治疗药物的反应.根据可培养细菌的数量分类在肠道菌群中，可以培养到的细菌有400余种，依据其数量多少可以分为主要(优势)菌群(predominant mieroflora)和次要菌群(sub—dominant microflora)。

①主要(优势)菌群：指肠道菌群中数量大或种群密集度大的细菌，一般在10～10cfu/g以上，包括类杆菌属、优杆菌属、双歧杆菌属、瘤胃球菌属和梭菌属等专性厌氧菌，通常属于原籍菌群。优势菌群是对宿主发挥生理功能的菌群，在很大程度上影响着整个菌群的功能，决定着菌群对宿主的生理病理意义。

②次要菌群：数量在10～10cfu/g以下，主要为需氧菌或兼性厌氧菌，如大肠杆菌和链球菌等，流动性大，有潜在致病性，大部分属于外籍菌群或过路菌群。乳杆菌在数量上归为次要菌群，在回肠中含量较高，但是其具有较为重要的功能，因此在功能上归属于优势菌群。

优势菌群与微生境的特征密切相关，以厌氧菌为主的优势菌群，一般生存在清除速率较低、营养丰富的微生境，如结肠，所以菌群密集度和多样性高；而兼性或需氧菌群一般生活在清除速率高的微生境，如小肠近端，其菌群密集度和菌群多样性较低，由于菌群密集度低，很难称得上是“优势菌群”；在酸性微生境中，耐酸、产酸的细菌成为优势菌群。微生境的改变，可使菌群中的优势菌群发生替换，如便秘时大便优势菌群主要是革兰阴性厌氧菌，慢性腹泻时常见革兰阳性杆菌为优势菌群，而在严重急性腹泻时大便中的优势菌群为致病性细菌或某些兼性/需氧细菌。在肠道中，尽管专性厌氧菌是主要菌群，占据优势，但这些菌群又依赖于需氧菌或兼性厌氧菌等次要菌群的存在，因为后者在增殖过程中消耗氧气，保证前者的生长条件。一个生理性组合的肠道菌群是有益的，而病理性组合的肠道菌群是有害的。

人体肠道内的微生物中，超过99%都是细菌，存活着数量大约有100兆个，有500～1000个不同的种类。这些数目庞大的细菌大致可以分为三个大类：有益菌、有害菌和中性菌。

有益菌，也称之为益生菌，主要是各种双歧杆菌、乳酸杆菌等，是人体健康不可缺少的要素，

可以合成各种维生素，参与食物的消化，促进肠道蠕动，抑制致病菌群的生长，分解有害、有毒物质等。

有害菌，数量一旦失控大量生长，就会引发多种疾病，产生致癌物等有害物质，或者影响免疫系统的功能。

中性菌，即具有双重作用的细菌，如大肠杆菌、肠球菌等，在正常情况下对健康有益，一旦增殖失控，或从肠道转移到身体其他部位，就可能引发许多问题。

人体的健康与肠道内的益生菌群结构息息相关。肠道菌群在长期的进化过程中，通过个体的适应和自然选择，菌群中不同种类之间，菌群与宿主之间，菌群、宿主与环境之间，始终处于动态平衡状态中，形成一个互相依存，相互制约的系统，因此，人体在正常情况下，菌群结构相对稳定，对宿主表现为不致病。有研究指出，体魄强健的人肠道内有益菌的比例达到70%，普通人则是25%，便秘人群减少到15%，而癌症病人肠道内的益生菌的比例只有10%。

药敏试验是指体外抗菌药物敏感性试验简称药敏试验（AST），是指在体外测定药物抑菌或杀菌能力的试验。目前，临床微生物实验室进行药敏试验的方法主要有纸片扩散法，稀释法（包括琼脂和肉汤稀释法），抗生素浓度梯度法（E-test法），和自动化仪器等。

本实验以在校医学生粪便标本为样品，探讨肠道菌群的分离、培养、鉴定和药敏，了解在校医学生肠道菌群分布状况及对常用抗生素的敏感性，为预防肠道细菌感染和合理使用抗生素提供实验依据。

二、实验目的和意义

1、掌握培养基的配制方法

培养基的配置过程主要包括：调配、溶化、校正pH值、澄清过滤、分装、灭菌及检定和保存。调配：溶化：校正pH值：澄清过滤：分装：灭菌：鉴定：保存：

2、熟悉湿热灭菌的原理和应用

湿热灭菌一般采用高压蒸汽灭菌，在103.4KPa蒸汽压下，温度能达到121.3℃维持15~20分钟，就能杀死包括细菌芽胞在内的所有微生物，是一种彻底的灭菌方法。

3、掌握肠道标本的采集方法

标本的收集、存放与运送的得当与否，直接关系到检验结果的准确性。应采取新鲜粪便，

盛于洁净、干燥无吸水性的有盖容器内，不得混有尿液、水或其他物质，以免破坏有形成分，使病原菌死亡和污染腐生性原虫、真菌孢子、植物种子、花粉易混淆检验结果。采集标本时应用干净竹签选取含有粘液、脓血等病变成分的粪便；外观无异常的粪便须从表面、深处及粪端多处取材，其量至少为大拇指末段大小（约5g）。标本采集后一般情况应于1h 内检查完毕，否则可因p H 及消化酶等影响导致有形成分破坏分解。

4、掌握肠道正常菌群、肠道致病菌和肠道条件致病菌

肠道正常菌群：指肠道菌群中数量大或种群密集度大的细菌，对人体有益无害并与人体保持平衡。肠道致病菌：除大肠正常菌群之外可导致疾病发生的菌种，主要是沙门氏菌、志贺氏菌变形杆菌、大肠埃希菌耶尔森菌；肠道条件致病菌：与人体共同生活，以兼性厌氧菌为主是肠道非优势菌群，如肠球菌，肠杆菌，在肠道微生态平衡时，对人体无害，但在特定条件下会具有一定的致病性。

5、掌握肠道菌群在肠道选择培养基上的生长特点

肠道菌群在选择性培养基上生长特点：肠道菌群需氧或兼性厌氧，菌落中等大小，表面光滑湿润，液体培养基混浊生长。

6、掌握肠道菌群的生化反应

肠道菌群生化反应活泼。乳糖发酵试验：肠道非致病菌+，肠道致病菌-（除外变形杆菌）。肠杆菌科定科试验主要项目是革兰阴性杆菌、触酶阳性，氧化酶阴性，硝酸盐还原试验阳性。

7、掌握肠道菌群的鉴定要点

鉴定肠道菌群首先要保证粪便的新鲜且没有受到污染，掌握菌落的基本形态特征，要熟悉各种菌落的生化反应的特点。

8、掌握细菌的药敏试验

体外抗菌药物敏感性试验简称药敏试验（AST），是指在体外测定药物抑菌或杀菌能力的试验抗菌药对细菌性传染病的控制起到了非常重要的作用，随着新型致病菌的不断出现，抗菌药的防治效果越来越差。并且各种致病菌对不同的抗菌药物的敏感性不同，同一细菌的不同菌株对不同抗菌药物的敏感性也有差异。长期以来，各种致病菌耐药性的产生使各种常用抗菌药物往往失去药效，以及不能很好的掌握药物对细菌的敏感度，所以一个正确的结果，可供临床医师选用抗菌药物的参考，并提高疗效

三、实验应具备的物质条件

1、试剂：革兰染液，触酶及氧化酶试剂，蒸馏水等。

培养基：ss培养基，麦康凯培养基，普通培养基，半固体培养基，克氏双糖铁培养基 系统生化管：J2026纤维二糖 杭州微生物试剂有限公司 批号 20071109 J2019木糖 杭州微生物试剂有限公司 批号 20080108 J2018阿拉伯糖 杭州微生物试剂有限公司 批号 20080527 J2044七叶苷 杭州微生物试剂有限公司 批号 20080102

J2016甘露醇生化管 杭州微生物试剂有限公司 批号20070914 β-半乳糖苷（OPNG） 杭州微生物试剂有限公司 批号 20090422 麦芽糖 杭州微生物试剂有限公司 批号 20090331 枸橼酸盐生化管 杭州微生物试剂有限公司 批号 20090409

赖氨酸脱羧酶生化管 杭州微生物试剂有限公司 批号 20090325 尿素生化管 杭州微生物试剂有限公司 批号 20090317

精氨酸脱羧酶生化管 杭州微生物试剂有限公司 批号 20090105

鸟氨酸脱羧酶生化管 杭州微生物试剂有限公司 批号 20090219 药敏纸片： 氯霉素 （30ug/片） 杭州微生物试剂有限公司 批号 20150305 庆大霉素（10ug/片） 杭州微生物试剂有限公司 批号 20150202 环丙沙星（30ug/片） 杭州微生物试剂有限公司 批号 20150210 红霉素 （15ug/片） 杭州微生物试剂有限公司 批号 20150106

7、分别取正常菌落和可疑菌落行单纯药敏试验；

①在培养基中用接种针分别挑取正常菌落和可疑菌落分别用密集画线法接种于MH药敏培养基，使待检细菌在MH培养基上近似均匀分布。

青 丁 红 氯庆

密集画线 药敏纸片均匀贴在培养基上

青 丁 红 氯庆

药敏实验结果

②在含菌的MH培养皿中均匀贴上不同药敏纸片（氯霉素药敏纸片、庆大霉素药敏纸片、青霉素药敏纸片、红霉素药敏纸片、丁胺卡那药敏纸片），使药敏纸片呈梅花状分布。

③将MH培养皿放于37℃恒温培养箱18~24小时，并观察抑菌环大小，测量、记录抑菌环直径。 8、取可疑菌落做迁徙实验

①用灭菌过的接种环取可疑菌落，点状接种在普通培养基上。

②将普通培养基放于37℃恒温培养箱18~24小时，并观察记录有无迁徙生长现象。

七、实验路线及方法变更

粪便标本（1g±）

?

SS、MacConkey平板 ?18~24h 可疑菌落、正常菌落

? ? ?

Gram’s stain染色 初步生化 纯培养（SS或MacConkey平板） ? ? ?

镜检 系统生化 大肠杆菌质粒DNA抽提 ? ↙ ↘ ?

验证染色镜检在肠道 血清学检查 药敏试验 OD260/OD280比值测定 G-杆菌鉴别诊断价值 ? ?

单纯药敏试验 确定DNA纯度 ?

联合药敏试验

八、实验内容与预期目标

1、实验内容 ①培养基的制备

②粪便细菌标本的分离培养 ③可疑菌落的染色镜检 ④可疑菌落的生化反应 ⑤细菌的药敏试验 ⑥迁徙实验 2、预期目标

①掌握各种培养基的配置方法和鉴定

②学会湿热灭菌和高压蒸汽灭绝菌锅的使用方法 ③掌握肠道细菌分离培养方法和步骤 ④掌握肠道细菌的鉴定方法、鉴定要点和步骤 ⑤掌握K-B法细菌药敏试验

九、结果

1、肠道细菌在肠道选择培养基上的生长特点

肠道菌群在MacConkey平板呈粉红色的菌群，呈条状分布，且分布不规则均匀；在SS上呈乳白色点状生长，从一区到四区递减分布。具体情况见图13~图17。 2、可疑菌落的涂片、革兰氏染色、镜检

可疑菌落在显微镜下（油镜）看到为红色菌落，是革兰氏阴性菌，菌体两端钝圆，有明显的多形性，呈球型或丝状，分布不均匀，成团或成簇分布。具体情况见图25~图28 3、肠道细菌的初步生化反应

正常菌落的初步生化反应结果：产酸产气，动力实验为阳性；可疑菌落在KIA培养基中呈黑色分布，产硫化氢，培养基底部有小个空泡，在斜面上呈点状菌落分布，在MIU培养基中，细菌沿穿刺线放射生长，动力试验呈阳性。具体情况见图19~图21。 4、肠道细菌的系统生化反应

可疑菌落的系统生化反应结果是：甘露醇黄色呈阳性，，麦芽糖黄色呈阳性，七叶棕色呈阴性，枸橼酸盐绿色呈阴性，赖氨酸紫红色呈阳性，精氨酸浅棕色呈阳性，鸟氨酸淡黄色呈阳性，尿素黄色呈阴性，硫化氢黑色呈阳性，蛋白胨水红色呈阳性，纤维二糖蓝色呈阴性，VNPG黄色呈阳性。具体情况见图22~图24

5、肠道细菌的K-B法药敏试验

根据抑菌圈的大小（不同抗生素其抑菌圈大小的标准不一致），判断为敏感（S），耐药（R）或中介度（I）。用刻度尺量的抑菌圈如下，具体情况见图29~图32

氯霉素 (2.5cm） 庆大霉素 （R) 环丙沙星 (2.8cm）

红霉素 (R) 青霉素 （R) 6、可疑菌落的迁徙实验

可疑菌落在普通琼脂平板上可蔓延波纹状薄膜布满整个培养基表面，迁徙生长实验呈阳性。具体情况见图18。

肠道细菌分离培养与鉴定 图1：学生在普通实验室进行实验 图2：教师在实验室指导学生进行实验 图3：主要实验试剂 图4：主要实验试剂（KIA，自制） 图5：主要实验仪器-恒温培养箱、干烤箱 图6：主要实验仪器-高压灭菌锅 图7：主要实验仪器-半自动细菌生化分析仪 图8：主要实验仪器-定量PCR仪

实验结果 图9：主要实验仪器-5415D型速离心机 图10：主要实验仪器-Microfuge 18型高速离心机 图11：主要实验仪器-斜角式离心机 图12：主要实验仪器-水平式离心机

肠道菌群分离培养与鉴定 图13：肠道菌群在SS、Mac培养基生长情况 图14：肠道菌群在SS、Mac培养基生长情况

图15：肠道菌群在SS、Mac培养基生长情况 图16：肠道菌群在SS、Mac培养基生长情况 图17：大肠杆菌在分离培养基生长情况 图18：变形杆菌迁徙生长现象 图19：大肠杆菌接种KIA、MIU培养基（培养前） 图20：大肠杆菌接种KIA、MIU培养基生长情况

肠道菌群分离培养与鉴定

图21：大肠杆菌在KIA、MIU培养基生长情况 图22：大肠杆菌在KIA、MIU培养基生长情况 图23：大肠杆菌系统生化反应结果（反应前） 图24：大肠、变形杆菌在KIA、MIU培养基生长情况 图25：大肠杆菌 Grame’s stain ×1000 图26：大肠杆菌 Grame’s stain ×1000

肠道菌群分离培养与鉴定 图27：大肠杆菌 Grame’s stain ×1000 图28：大肠杆菌 Grame’s stain ×1000 图29：MH细菌药敏培养基 图30：K-B法药敏实验 图31：K-B法药敏实验结果-3 图32：K-B法药敏实验结果-4 十、讨论

肠道菌群是指一大类存在于人类和动物肠道内的形态、生物学特性十分相似的G-杆菌，大多数细菌对人体有益，广泛分布在自然界中，包括植物、土壤、水、以及人和动物的肠道。多数是人肠道正常叫菌群的重要成员在机体的其他部位较少。如大肠杆菌能合成人体所需的VitB12、VitK、叶酸等，它们彼此相互联系、相互依存，共同维持肠道内微环境的稳定。少数细菌可引起人类腹泻或肠外感染，其中具有肯定致病作用的细菌有志贺氏菌属、沙门氏菌属、耶尔森氏菌属等；具有条件致病作用的细菌有枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、粘质沙雷氏菌属、变形菌属等。当宿主抵抗力下降、寄居部位改变或肠道菌群失调，则可引起肠内或肠外感染。

1、肠道细菌在肠内的分布特点和功能

健康人的胃肠道内寄居着种类繁多的微生物，这些微生物称为肠道菌群。在人类胃肠道内的细菌可构成一个巨大而复杂的生态系统，一个人结肠内就有400个以上的菌种。从口腔进入胃的细菌绝大多数被胃酸杀灭，剩下的主要是革兰氏阳性需氧菌。胃内细菌浓度<10 3 CFU/ML（CFU即colony forming unit菌落形成单位）小肠菌群的构成介于胃和结肠之间。近端小肠的菌丛与胃内相近，但常能分离出大肠杆菌和厌氧菌。在远段回肠，厌氧之间。近端小肠的菌丛与胃内相近，但常能分离出大肠杆菌和厌氧菌。远段回肠，厌氧菌的数量开始超过需氧菌，其中大肠杆菌恒定存在，厌氧菌如类杆菌属、双歧杆菌属、梭状芽胞杆菌属，都有相当数量。在回盲瓣的远侧，细菌浓度急剧上升，结肠细菌浓度高达10.11 ～10.12 CFU/ml，细菌总量几乎占粪便干重的1/3。其中厌氧菌达需氧菌的10.3 ～10.4 倍。主要菌种为粪杆菌属、双岐杆菌属和真杆菌属。

正常菌群的功能：1、吸收水分，粪便较软，较易排泄。在胃部分解消化的食物，经由小肠吸收营养后，成为粘稠状物体送至大肠。然后再经过18小时将水分及矿物质吸收，就变成容易排泄的粪便。肠道内环境良好时，粪便的软硬适中，排便会较为顺利。

2、缓和的蠕动，能顺利将粪便排出藉由肠的蠕动，将粪便缓慢的推送至肛门。如果蠕动过快或太慢，都将影响粪便的构成，导致便秘或者腹泻。而如果肠内干净，则蠕动的速度就相当的有规律，粪便可顺利排出。

3、有助维他命的合成。比菲德氏菌等好菌能维护肌肤的健康，并具有合成有助热量产生的维他命B1、B2及B6等，以及与止血、骨骼形成有关的维他命K等之功用。健康的肠道，好菌会不断繁殖，维他命的合成也可顺利进行。

4、迅速排出有害物质。健康的肠道并非完全没有坏菌的存在，有害物质多少会产生。当然还包括，吃进体内的食品化学添加物或是无法成为营养成分的物质。只要肠内环境良好，这些物质在开始危害身体前就被排出体外。

5、避免病原菌的侵害比菲德氏菌等好菌可以刺激并提高身体的免疫机能，而且易引起食物中毒等病原菌因具怕酸特质，所以像是含有好菌的乳酸饮料或健康食品等，都可抑制病原菌在肠内繁殖。

肠道有菌群除了以上功能之外，对人体还有营养作用，如糖尿病、高血压、高血脂等。B族维生素

和非必需氨基酸对人类的毛发具有重要的作用，当缺少这些营养元素，会导致头发脱落或毛发发黄、发叉，容易折断等现象。

致病菌群的功能：当机体处于有害菌侵袭时，往往会肠内黏膜粗糙，血液不流通而呈暗红色。主要表现为1、排泄不顺畅，肠内囤积粪便为帮助排便，粪便的软硬程度要适中，但不健康的肠则因膳食纤维的不足，导致粪便囤积大肠，无法顺利排泄；又或者是因坏菌的繁殖引起细菌感染，而产生腹泻的发生。

2、蠕动过快或太慢肠不健康，可能会影响肠的蠕动速度过快或太慢，妨碍粪便顺利排出。粪便更会因此变太硬或太稀，最终导致便秘，肠道中过路菌群更因此加速繁殖，如此恶性循环下去。

3、产生有害物质。不健康的肠道是坏菌繁殖的绝佳场所，大量的坏菌会导致阿摩尼亚，硫化水素及粪臭素等有害物质的产生。这些物质不但是恶臭屁的来源，更会加速肠壁的老化，产生导致癌症的物质，成为大肠癌的发病根源。

4、再次地吸收对身体有害的物质。有害物质不会乖乖地待在肠内，它会随着肠的吸收而跟着血液循环全身，引起疲倦、肌肤干燥、头痛、呕吐等身体不适，会发生恶臭的物质更会经由血液，透过嘴巴或身体而散发出来。

5、病原体容易侵入不健康的肠内，乳酸菌等好菌的量会变少，肠内呈碱性。另外，因坏菌所产生的有害物质使肠壁所具有的免疫功能下降，导致肠内杀菌作用变弱，细菌或病原菌更容易侵入。 2、标本采集，分析采集标本的影响因素：

在临床上采集粪便标本时应用干净竹签选取含有粘液、脓血等病变成分的粪便；外观无异常的粪便须从表面、深处及粪端多处取材，其量至少为大拇指末段大小，采取新鲜粪便，应盛于洁净、干燥无吸水性的有盖容器内，不得混有尿液、水或其他物质，以免破坏有形成分。采集标本的影响因素：在采集粪便时，粪便和尿液混合，你尿液中的尿酸会破坏粪便的正常环境，影响正常粪检。采集的标本如果放在不合适的容器内，也会影响检验结果。 3、在肠道选择培养基上菌落特征

在培养基培养时无需添加生长因子，向培养基中加入伊红美蓝遇大肠杆菌，菌落呈深紫色，并有金属光泽，可鉴别大肠杆菌是否存在。 4、肠道选择培养基上菌落Gram’s stain特点

选择培养基菌落革兰染色后，菌落被染色成紫红色，菌落散在或者聚集成簇存在。 5. 细菌典型生化反应及其概率

细菌生化反应：各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质的分解能力也不一样，因而代谢产物或多或少地各有区别，可供鉴别细菌之用。用生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物，从而鉴别细菌的种属，称之为细菌的生化反应。

6. 细菌的鉴定要点 （1）细菌的形态学检查：细菌的形态学检查包括不染色标本检查法和染色标本检查法，显微镜是观察细菌形态所必备的基本工具。镜检不仅可以迅速了解标本中有无细菌及大致的菌量，而且根据细菌形态、结构和染色性有助于对病原菌的初步识别和分类，为进一步作生化反应、血清学鉴定提供依据。对某些细菌，如痰中的抗酸杆菌和脑脊液中的脑膜炎奈瑟菌等，通过形态学检查可得到初步诊断，对临床早期诊断和治疗疾病有一定的参考意义。 （2）细菌的生化反应：由于细菌产生的酶系不同，因而对底物的分解能力不同，其代谢产物也不同。用生物化学方法测定这些代谢产物，可用来鉴定细菌，这种生化反应测定方法也称生化试验。细菌的生化试验是将已分离纯化的待检细菌，接种到一系列含有特殊物质和指示剂的鉴别培养基中，观察该菌在这些培养基内的pH变化，或是否产生某种特殊的代谢产物，现代细菌学已普遍采用微量、快速、自动化等鉴定系统，已有很多相应的配套试剂供种属鉴定使用。 7、药敏结果分析，分析抑菌圈产生的机制，分析抑菌圈大小的意义，影响抑菌圈大小的因素，如何指导临床合理使用抗生素 综上所述，肠道细菌的形态学鉴定是简便、价廉、有效的方法，分离培养是肠道细菌鉴定的金标准，生化反应鉴定更能准确的鉴定细菌的种属（单一的生化反应不能准确鉴别应用联合的生化反应鉴定细菌的种属）。由于肠道细菌为一大群G-中等大小杆菌，形态学难以鉴别，少量初步生化反应不易鉴别，通常采用系统生化反应和血清学鉴定。肠道细菌对常用抗生素已具有一定耐药性，临床上一旦出现由此菌导致的感染，应选用敏感的抗生素。粪便标本中除常见的大肠杆菌外，还分离出普通变形杆菌，该菌为条件致病菌，其对丁胺卡那、氯霉素、庆大霉素敏感，对青霉素、红霉素明显耐药。 十一、结论 1、肠道菌群是一类形态、生物学特性相似的G-杆菌，主要有大肠杆菌、克雷伯氏菌、粘质沙雷氏菌、变形杆菌等 2、肠道细菌的形态学鉴定是简便、价廉、有效的方法，分离培养是肠道细菌鉴定的金标准 3、初步生化和系统生化反应在肠道菌群各属种的鉴定中有重要意义 4、药敏试验可准确筛选出耐药菌株，为合理应用抗生素提供可靠实验依据 参考文献 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/ ① Scidmore MA, Fischer ER, Hackstadt T. T. Sphingolipids and glycoproteins are differentially trafficked to the chlamydia trachomatis inclusion[J]. J Cell Biol. 1996;134(2):363-374 ② 王健, 钱中清, 朱玉霞, 杨庆贵. 淮南工业学院学生肠道菌群初步调查[J]. 中国学校卫生, 2002;23(1):28-29. ③ 刘恭植. 微生物学和微生物学检验[M].北京: 人民卫生出版社 1987.143-15

十二、导师意见 围绕实验目的、方法、技术路线、结果、分析讨论逐层分析，并注意文字表达是否流畅。 导师签名：_____________ 2013 年 10 月 31 日 十三、教研室意见 同意授课教师意见。 2015 年 11 月 4 日 十四、医学院意见 □ 优 □良 □中 □差 2015 年 11 月 5 日

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