单克隆抗体在水产养殖中的应用

水产知识

动物医学进展。0 9 3 ( ) 9—9 2 0,0 9:49Pr g e si e e i r e c n o r s n V t rna y M dii e

单克隆抗体在水产养殖中的应用李晓莉。张以芳，,曾令兵许映芳肖晶童亮，, ,( .南农业大学动物科学学院 .南昆明 6 0 0; .国水产科学研究院长江水产研究所 .北荆州 4 4 0 ) 1云云 5 2 12中湖 3 0 0

摘

要：克隆抗体具有高度特异性、质性及来源稳定并可大量生产的优点，为感染性疾病研究、单均成诊

断和治疗的一个有力手段。随着单克隆抗体技术应用的深入，其在水产养殖中也发挥了很大的作用。论文简要介绍了单克隆抗体的技术原理，对单克隆抗体在水产病原细菌性疾病、病毒性疾病的诊断以及水产激素、水产药物残留检测方面的研究及应用进行了概述，对单抗在水产方面的基础性研究工作进行了总结，并对存在问题和发展前景进行了讨论和展望。

关键词：克隆抗体；单疾病；素；激药物残留；产养殖水中图分类号： 8 2 4 ￥5.3文献标识码： A文章编号： O 75 3 ( O 9 O—0 40 1 O— O 8 2 0 ) 90 9— 6

单克隆抗体 ( n co a a t o y mo o ln l n i d,Mc ) b Ab是由一个 B细胞分化增殖的子代细胞 (细胞 )浆产生的针对单一抗原决定簇的抗体。这种抗体的重链、轻链及其 V区独特型的特异性、和力、物学性状亲生及分子结构均完全相同，用传统免疫方法是不可采能获得这种抗体的。 与多克隆抗体比较，克隆抗体具有无可比拟单的优越性，有高特异性、纯度、质性好、和力具高均亲不变、重复性强、效价高、本低并可大量生产等优成点。单克隆抗体在血清学技术、免疫学基础研究、肿瘤免疫治疗、原纯化、抗抗独特型抗体疫苗研制等方

面得到了广泛应用。

近年来，国水产业发展迅速，殖品种日益增我养

多，养殖规模不断扩大，随着大规模集约化的养殖伴

模式，种疾病的暴发、各蔓延也使水产养殖企业蒙受了巨大损失，而且我国目前水产动物疫病防控还停留在化学疗法阶段。因此我们

必须加快鱼类基础免疫学的研究，促进鱼类病原学、断技术和疫苗学的诊

发展，免疫预防手段引入到水产养殖业中来，将单克隆抗体技术的应用为我们提供了一个有效的手段，本文对单抗在水产养殖方面的应用进行了介绍，并

对存在的问题及发展前景进行了讨论。

收稿日期：0 90~ 4 2 0—5 0 基金项目：央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目中

作者简介：晓莉 (9 1 )女 .东潍坊人 .究实习员，士研究生，要从事鱼类病害以及种质研究。 *通讯作者李 18一，山研硕主

D7李志刚，宝兰，景会 .酸菌对黄曲霉毒素 B吸附作用的 1杨姚乳 研究口]中国食品卫生杂志，0 3 I ( ) 2 22 . 2 0,5 3:1- 1. 5

r0畅晓渊，国荣，平兰 .D mit奶酪中抗黄曲霉毒素活性 2]刘李 o ai物质产生菌的分离鉴定及抑菌作用口]中国农业大学学报， .

[8徐 13

进，冉

陆 .宝兰 .杆菌抑制黄曲霉孢子萌发的研究杨乳捷 .种食品微生物降解黄曲霉毒素作用的研究几

2 0,4 t;2—2 . 0 9 1 () 1 317[ 1张建梅，国军， 23李谷巍 .物脱霉剂对黄曲霉毒素 B的作用生 1

[卫生研究，0 2 3 ( )4—9刀. 20, 13:74 .

[9朱新贵， 1]林

研究[]中国饲料，0 9 5; 12 . J. 2 0 ( )2—3

[营养卫生，0 12 ) 6—8刀. 20 (2:56 .

Pr g e s o z r De e to c ni e nd Bi d g a t0 f Afa o i o r s n Ha a d, t c i n Te h qu s a 0 e r da i n o l t x nM A ik Zh - e。ZA N n— e Li s n( olg y Anma ce c eh oo e No twet& F U ie s y,Y n l g, h a x, 1 1 0 C i a C l e i lS ine T c n lg, rh s A e o n v ri t agi n S a n i7 20, hn )

Ab t a t A f t x n,a g o p o o i s s r c u a l e a e o s c n a y m e a o ie, r r d c d b o sr c: l o i s r u

ft x n t u t r l r l t d t e o d r t b l s a e p o u e y s me a y tf ung ls r i nd a e ex r me t xiiY a t ans a h v t e o ct .Die e n y ia e ho r c r n l u e f r nt a al tc lm t ds a e ur e ty s d:TLC, HPLC,

ELI A,I S AG— HPL C,e c Th s p p rs mm a ie h e r s a c e e o me to h e e t n a d b o t. i a e u r d t e n w e e r h d v l p n n t e d t c i n i— z o l g c l e r d to fa l t x n . o ia g a a i n o fa o i s d Ke r s a l t x n; a a d d t c i n; i l g c l e r d to y wo d: fa o i h z r; e e to b o o ia g a a i n d

水产知识

李晓莉等：克隆抗体在水产养殖中的应用单

9 5

1用于细菌感染性疾病的诊断 在海水养殖中，菌属的细菌在各类细菌中占弧 有很大的比重，中又以溶藻弧菌、弧菌和副溶血其鳗弧菌优势菌种，各种海洋动物常见致病菌。应用是单抗技术开展海水养殖动物弧菌的快速诊断研究，

后快速准确的检测奠定了试验基础。

爱德华病广泛流行于叉尾鲴、鲡、鳗牙鲆及鲤科经济养殖鱼，死亡率较高，此，晓航等制备其为金抗迟缓爱德华菌的单克隆抗体，立了免疫组织化建学法，够很明确地在鱼患病器官检到病菌，能并进一步探明了该菌的致病机理。秦红等又在此基础上对抗迟缓爱德华菌独特型单克隆抗体轻链可变区基因的克隆及序列进行了分析，进一步制备基因工程为抗体打下了基础。

对于早期确诊并及时控制疾病具有十分重要的意义。夏永娟等[在国内首次制备出抗鳗弧菌单克隆 1 抗体，中的 3株单抗能显著提高受鳗弧菌感染的其牙鲆的存活率，时可延长受大剂量鳗弧菌同 (0 D。感染的牙鲆的平均存活时间， 1 L。)而其中的一

嗜水气单胞菌是养殖及野生鱼、、、虾蛙甲鱼等

株单抗 4保护率达 8,明其针对的是细

菌的 A6 0证中和性表位。在此基础上，研究设计以 4又 A6为免

生物常见的细菌性病原体，通过受伤的皮肤及伤可口感染，可通过食物链感染人，成腹泻、血症并造败等疾病而严重威胁人类健康，我国沿海地区人群是中最常见的致病性弧菌之一。陈瑞等进行了抗嗜水气单胞菌单克隆抗体的制备及初步鉴定，功获得成了一株杂交瘤细胞系，可用于特异性地检测嗜水气单胞菌、建立检测该菌的免疫学方法和以免疫组织化学方法检测出该菌感染的病理标本， Mc该 Ab的

疫原制备出抗鳗弧菌独特型单克隆抗体。C e h nSY等也进行了鳗弧菌单克隆抗体的制备和鉴定，获得一株与其他弧菌无交叉反应的单克隆抗体，为该菌的免疫诊断和亚种鉴定提供了基础。宋跷玲等

制备了溶藻弧菌单克隆抗体并建立了单抗 E I A LS快速检测溶藻弧菌的检测技术，敏度高，其他弧灵与

菌无交叉反应。陈晓燕等对溶藻弧菌脂多糖单克隆抗体的制备、定及初步应用进行了研究，鉴首次制备了一株鱼类病原溶藻弧菌 VAF 1的 L S的单克隆 O P抗体 4 5该抗体属于识别 L S核心多糖的单克隆 D, P抗体，识别的 L S多糖的位置、子质量大小与其 P分 Ha g制备的杀鲑气单胞菌 de ( eo n s A rmo a s l ncd )核心多糖单克隆抗体识别的 L S多 amo iia P糖的位置和大小相似。池信才等[制备了一株大黄 3 鱼病原副溶血弧菌单克隆抗体，建立了检测副溶并血弧菌的双抗体夹心 E IA方法，方法对副溶血 LS该弧菌的最小检出量为 5 0个/×1 mL,敏度高，灵特

成功制备也为进一步制备针对该菌的抗独特型疫苗创造了条件。樊海平等[对日本鳗鲡体表溃疡病病 7

原菌进行了分离、鉴定及单克隆抗体制备，鉴定该病原菌为嗜水气单胞菌，制备出 3株抗嗜水气单胞并菌的单克隆抗体，可应用于日本鳗鲡嗜水气单胞菌特异性检测。

随着单克隆抗体技术研究的深入，会有越来将越多的病菌抗体被研究并应用于实践，为各种水产养殖中细菌性疾病的预防提供有效途径。

2用

于病毒感染性疾病的诊断各种病毒性疾病一直是水产养殖上的大患，它

异性强，以用于患病大黄鱼副溶血弧菌的快速诊可断。 哈维弧菌是海洋鱼类常见的病原菌，菌引起此,

具有暴发性强、及面广、愈率极低等特点，水波治使产业蒙受巨大损失。而单克隆抗体的出现，为研究预防和治疗病毒性疾病提供了一个新的方向。从 2 O世纪 8 O年代中期， hn h r等研制出虹鳟病毒 C ic e单抗开始，一技术及其研究成果也应用于水生动这物病毒学研究中。史成银等开展了对虾皮下及造血组织坏死杆状病毒单克隆抗体的 E I A快速检测 LS的研究，制备出针对对虾 HHNB病毒的单克隆抗 V体，并建立了 E IA快速检测法，强制震荡运动 LS以

的大范围发病给养殖业带来巨大的经济损失。郝贵杰等建立了抗哈维弧菌单克隆抗体杂交瘤细胞系

并对其特性进行了鉴定，备的抗哈维弧菌 Mc 制 Ab可为哈维弧菌的检测及防治等提供有用的试剂，在

此基础上又对抗哈维弧菌脂多糖单克隆抗体进行了制备和鉴定，获得一株特异性单克隆抗体。

创伤弧菌 ( irov li i s V bi unf c )是一种嗜盐弧 u菌，泛存在于海水及海产品中，体可通过生食海广人

减低了反应对布朗运动的依赖，大提高了反应速大度，消除了“缘效应”提高了试验的精密性。实并边，验还表明， 0/的脱脂奶粉是最好的封闭剂。 20g L

鲜或经过肢体破损创口接触海水、产品而受其感海染。庞晓雯[对抗创伤弧菌单克隆抗体进行了研 5 究，获得 2分泌抗创伤弧菌单克隆抗体的杂交瘤株细胞株 1 2和 2,中 2在快速检测创伤弧菌 A D6其 D6感染方面具有重要意义，为开展海上工作人员遇险

针对罗氏沼虾肌肉白浊病，问[,冬一等嗍制备刘 8钱]了罗氏沼虾诺达病毒 ( NV)克隆抗体，在此 Mr单并基础上建立了检测罗氏沼虾诺达病毒抗体夹心酶联免疫吸附测定 ( TAS E IA),方法检测灵敏度 _ LS法该

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动物医学进展

20 0 9年

第3卷 O

第 9 (第 1 4期 )期总 9

达 0

9 g左右，间接 E I A法和核酸电泳法有 . 8n比 LS

脑垂体分泌的一种单链多肽类激素，与鱼类生长是

更高的阳性检出率和符合率，用于生产中患病虾适苗和可疑虾苗的病毒检测。对虾白斑综合征是 19 9 2年开始流行于亚洲地区的危害极大的病毒性流行病，染对虾的死亡率高达 10,病原为白感 0其

发育关系密切的最重要的激素之一。它具有促进个体生长发育、节新陈代谢和提高食物转化率等重调要作用，参与蛋白质、肪的合成和代谢；并脂此外，还能调节体内渗透压，海河洄游型的鱼类适应高盐使和低盐环境的转换。大量试验已经证实，源性生外长激素具有与鱼体内天然激素相同的生物活性，对鱼体具有明显的促生长作用，因此从功能上说，鱼类生长激素是一种重要的生长促进剂，有广泛的开具发应用前景。

斑综合征病毒 ( i so s n rme iu, Wht p t y do vr s eW S V)由于 WS V的囊膜与靶细胞相互作用从 S。 S

而介导病毒对宿主的感染，此探明这一机理并进因而阻断，为防控 WS V感染的重要途径。王轶南成 S等口在获得 WS V多种囊膜蛋白单克隆抗体的基叩 S础上，成功筛选到两株能够明显中和 WS V的单 S抗，为进一步应用中和抗体阻断 WS V感染提供这 S了工具；同时，用 VP 8单抗表明了提纯的 VP 8应 2 2

科学家们正在进行鱼类生长激素基因工程方面的研究，希望能通过基因工程的方法大幅度提高的产量，这就迫切需要建立鱼类生长激素快速、敏的灵检测方法。现代免疫学技术的发展为建立快速、灵敏、准确的检测方法提供了可能。邓文涛等分离纯

可通过与宿主细胞发生特异性结合作用，明确为WS V囊膜蛋白在病毒感染中的作用提供了参考 S和依据。姜有声等妇对对虾白斑综合征病毒囊膜

化出草鱼生长激素，立了分泌抗草鱼生长激素单建克隆抗体的杂交瘤细胞系，成功建立了既能测定并生长激素生物活性、能测定其免疫活性的酶标受又

蛋白 VP 9的单克隆抗体制备及其定位进行了研 1究，制出抗 VP

9的单抗，利用免疫胶体金技术研 1再

对病毒蛋白 VP 9行定位，果显示，体金粒子 1进结胶位于 WS V病毒的囊膜上，明病毒蛋白 VP 9位 S说 1于 WS V囊膜上。 S

体测定方法。杨锋等建立了草鱼生长激素的单克隆抗体，为人们使用血清学技术定量研究草鱼生长激素提供了可能。GH对鱼类生长的促进作用是通过丘脑下部刺激鱼的摄食行为和提高饲料转换效率、 降低饲料系数等作用来完成的，这些作用都与鱼而类的各消化器官有密切关系，了解鱼类胃肠胰中 GH抗原存在的部位，为进一步研究 GH促进鱼类生长作用机理提供线索和证据。因此，之平等还方

中华鳖病毒病是制约中华鳖养殖业发展的瓶颈之一，研发中华鳖病毒的检测技术，入开展病原学深和疫苗学的研究已成为鳖病防控的当务之急。朱春

华n。开展了中华鳖虹彩病毒单克隆抗体的制备、特性分析及应用研究，备出分泌抗中华鳖虹彩病毒制

特异性单克隆抗体的细胞系，析了中华鳖虹彩病分

做了关于草鱼 GH单克隆抗体对九种硬骨鱼的免疫细胞化学定位的研究，因工程技术的发展为体基外大量生产重组鱼类 GH提供了可能。研究表明，

毒单克隆抗体的免疫生物学特性，建立了能够用于检测中华鳖虹彩病毒的 E I A、F方法，用中 L S IA应

华鳖虹彩病毒单克隆抗体对蛙虹彩病毒属 S I T V、R GV、 j 3株病毒的抗原性进行了初步的比较分 F w析，单抗对中华鳖虹彩病毒抗原高度特异、敏，灵可用于中华鳖虹彩病毒的检测和结构蛋白分析。鲤春病毒血症 ( p ig vre ao ap S ) S r i mi fcr, VC n a

将基因重组 GH注射或投喂到鱼体内后，以明显可刺激鱼苗的生长，因此开展鱼类 GH基因克隆和重组 GH生产的研究，仅对于鱼类 GH结构与功能不的基础研究，而且对于开发鱼类促生长剂均有重要

意义和应用价值。陈松林等对我国主要淡水养殖鱼类鲢的 GH c DNA克隆、达载体构建及在大肠埃表希菌中表达进行了研究，验应用 R - C试 T P R技术从白鲢垂体 mR NA中扩增出 GH全

长 c NA片段， D

是鲤科鱼类的一种急性、高致死率的传染病，被世界动物卫生组织 ( E Y为必须申报的疫病之一。邴 OI ) 1]国霞等n。制备了鲤春病毒 ( VC单克隆抗体， S V)获

得了一株稳定分泌 S V抗体的杂交瘤细胞株 VC2 9经 S uh r ite E, o tenBoeh试剂盒测定，交瘤细胞杂

构建了 p SsGHe NA克隆，建了白鲢 GHe— B—c D构 D NA表达质粒 p S T sGH将此表达质粒转化 R E—c B 2(E ) L 1 D 3大肠埃希菌， WTG诱导后，经在转化的大肠埃希菌中检测到 GH蛋白的存在， sen印 Wetr

2 9为 IG2 E g b亚类，免疫印迹分析表明 2 9株单抗 E

腹水与 S V的分子质量约 4 u处蛋白结合， VC 7k而与正常 E C(鱼上皮瘤细胞 )反应，一步证实 P鲤不近了 2 9株单抗是针对 S V的特异性抗体。 E VC

迹表明该蛋白带与草鱼 GH单克隆抗体具有强烈的免疫反应，分证明了获得的重组鲢 GH是具有充活性的。鲢鱼 GH表达载体的构建及在微生物中的成功表达，为研究鱼类 GH的结构与功能及大量

3在水产激素方面的研究及应用 鱼类生长激素 ( r wt omo e go h h r n,GH)由鱼是

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李晓莉等：克隆抗体在水产养殖中的应用单

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生产鱼类重组 GH奠定了基础。杨学明等刈分析了革胡子鲶生长激素 c NA克隆与蛋白质结构， D得到了革胡子鲶生长激素基因 c DNA的开放阅读框 ( p nra igfa, RF序列，原性分析表明， o e edn rme O )抗 在氨基酸序列中的 4个区域均可形成优势抗原表

的单克隆抗体细胞株，对这些单克隆抗体的特性并进行了分析，实欧洲鳗黏膜抗体在抗原性方面有证

别于血清 IM,功制备的单抗可用于鳗黏膜免疫 g成球蛋白的检测及其结构和功能分析，欧洲鳗黏膜为免疫的进一步研究提供工具。

位，其结构特点非常适合改造成为重组生长激素疫苗或单克隆抗体制剂加以开发利用。

在单克隆抗体的基础方法方面，i X C等 Ja 叫报道了一种纯化

单克隆抗体的新方法——多通路竞

4在水产基础方面的研究及应用应用单抗研究鱼类免疫球蛋白结构与功能，以加快鱼类基础免疫学的研究是近年来兴起并迅速发展的一项新的研究方向。在过去十年中，外一些国

争抗体框并法，用于单克隆抗体的提纯和微量检可测。w uF B等∞3行了利用链霉素一物素分离 进生技术排除在实时免疫荧光测定血清中甲状腺素的基质干扰的研究。

学者对鱼类白细胞亚群以及 I g分子标记的单抗的

5在水产品药物残留中的应用水生生物病害的治疗，多仍停留在药物治疗大阶段，是大量药物的滥用使得水产品中药物残留但十分严重。随着人们对食品安全的重视和对农兽药滥用造成危害的认识加深，兽药残留分析现在已农变得更加紧迫和重要。

制备进行了大量的研究，建立了部分淡水鱼类 I g的

单克隆抗体。冯绢等制备了抗紫红笛鲷血清 1 g的单克隆抗体，并利用单抗进行了同目不同属、同目不之间部分鱼血清 I g的特异性分析，而证明鱼类血从清在同属不同种之间相似度很高，目不同属之间同

相似度较低而在不同目之间相似度极低。血细胞在鱼类机体免疫防御中起重要作用，接参与鱼类机直

常规的农兽药残留检测一般用气相色谱、高效液相色谱等仪器分析，该法除需要使用昂贵的仪但器设备外，品的提取、样净化、生化等前处理步骤衍相当烦琐，难适应当前现场简单快速和大批量样很品残留分析的要求。要想有效监测农产品的农药残留，必须采取简便、速、异、快特灵敏的检测方法。单

体非特异性和特异性免疫反应，时对自身生理变同化和外界刺激非常敏感，反映鱼类健康状况和生是活环境质量的重要指标。邢婧等通过研制抗牙鲆红细胞单克隆抗体，究牙鲆红细胞单抗与 5种常见研养殖鱼类红细胞的交叉反应，现该单抗能特异地发

克隆抗体在农药免疫分析中的应用，使上述要求将成为可能。国际上已有上百种农药可用免疫分析法

与 6种鱼红细胞结合，反应稳定，受红细胞形态和不发育阶段影响，为鱼类红细胞在分子生物

学方面的

检测，已制成商品化快速检测试剂盒或试低条。且 目前我国已研制出农药残留酶联免疫检测试剂盒 6个，体金免疫快速检测试纸 1胶 6个，外研制出高另

研究提供了有利工具。甲壳动物的免疫反应主要依靠吞噬、包囊和凝集，于非特异性免疫，翠鸾等属姚也对甲壳动物血细胞及其在免疫防御中的功能进行了研究。王凡等L 1备了鳜鱼免疫球蛋白单抗，制并对鳜 I g的结构进行分析，为鳜血清 I认 g结构可能是以四聚体形式存在的。沈锦玉等开展了银鲫血清免疫球蛋白(g单克隆抗体的研究，图将单克隆 I)试抗体运用于银鲫 I M结构与功能的分析， g银鲫体液免疫应答规律的研究，原诊断和流行病学和血清病

效快速地检测生物毒素的免疫检测试剂盒 1 3个和免疫胶体金纸条 5个；制出兽药残留酶联免疫检研

测试剂盒 1个，中有些试剂盒已实现产业化， 1其取得了显著的经济效益和社会效益。 Ya gJY等[] n 2制备了亲和力高、 特异性强的农

药克百威单克隆抗体，抗体亚类为 IG1亲和力其 g,常数为 2 5× 1。/ lI 5 1 1 g mL最低 . 4 0 L mo,Co为 . 8n/,

学调查研究。罗霞等[ 1鳜皮肤黏液 IM样蛋白对 g的纯化进行了研究，多种免疫球蛋白的纯化方法对进行了比较。AnL H等[ 1报道了鲫鱼卵黄蛋白单

检测限为 0 0 g mL。与克百威降解产物呋喃酚 . 1n/的交叉反应率为 4 5×1 .9 O,另外几种结构类似的氨基甲酸酯类农药的交叉反应率均小于 3 0× .

克隆抗体的研究进展及应用。冯守明等[3用单】采 克隆抗体免疫组化标记等技术，大菱鲆免疫相关对组织中免疫球蛋白(g I )阳性细胞进行了检测，为认

1 O

。为建立克百威简便、速、异的免疫检测快特氯霉素 (hoan p e i lC ) c lrl h ne, AP曾作为广谱抗 o

方法奠定了基础。

大菱鲆的免疫相关组织 (黏膜组织 )具备一定的含完成特异性免疫的细胞基础，不同组织之间的免且疫细胞数量存在显著差异。杨金先等u制备

了分泌抗欧洲鳗 ( g i aa g il )黏膜免疫球蛋白 An ul n ul l a

生素广泛应用于养殖业。由于其具有严重的毒副作用，留于动物性食品中的 C残 AP严重威胁着人类健

康，巍巍等L制备氯霉素单克隆抗体的基础宋 2在。上，电化学传感器与固相酶联免疫分析技术相结将

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20 0 9年

第3 O卷

第 9期 (总第 1 4 ) 9期

合，立快速、效、确的检测 C建高准 AP残留的 AL P(碱性磷酸酶 )p P对硝基苯磷酸 )析体系，一NP (分从而为动物性食品中药物残留的检测提供有力的技术支持。基于 Mc Ab的胶体金微粒免疫色谱快速检测试纸条可特异、速、便地检测农药或药物残快简留，对水产品中氯霉素残留较高的情况，挺针杨等[ 2行了动物源食品中氯霉素残留速测金标试 进纸条的研制，得的金标试纸条亲合性好，异性获特

建立了能分泌喃西林代谢物衍生物单克隆抗体的杂交瘤细胞株，并用单克隆抗体建立了检测呋喃西林谢物残留的 E IA方法， LS为商品化试剂盒的组装奠定的了基础。

6问题与展望单克隆抗体虽然具有很多优点，在我国的水并产事业中发挥了巨大作用，是仍然存在不少问题。但一

高，用时短，对虾肉样品的最低检出限为 1 5p, . -适 g用于动物源食品中氯霉素残留的快速检测。 恩诺沙星 ( nolx c, F e rf ai E )曾因为其抗菌谱 o n广、菌作用强、抗价格低廉等优点，医学、医及水在兽产养殖中很快被普遍使用。但长期用药所产生的不良反应、在动物产品中的残留、药性的增加以及在耐环境中的生态效应等方面已引起广泛关注。赵银丽等通过细胞融合技术制备恩诺沙星单克隆抗体 ( E NR mAb )杂交瘤细胞株，内诱生腹水法生产体

是目前单克隆抗体目前主要的研究重点是在

人体上，对水产品研究相对薄弱，鱼类的免疫特异性错综复杂，总体鱼类免疫机制的研究还很不系统和完善，以单抗在水产动物体内作用的机理有待进所一

步深入；是单克隆抗体在水产病害上的应用目二

前主要集中在诊

断方面，对其进一步的治疗作用研究较少；三是虽然目前很多水产工作者已经开展单

克隆抗体方面的研究，是有些单抗产品的临床效但果要小于理想值。其原因有待于深入研究。另外，单克隆抗体在水产中的应用也存在与在其他动物上应

E NR单抗，用 E 应 NR mAb研制 E NR残留间接竞

争 E IA ( i L I A)快速检测试剂盒 ( NR LS c S E E—Ki,动物源性食品中恩诺沙星 (E t为 ) NR)残留的

用中类似的问题，如生产条件苛刻，于大规模化生难产，导致单抗药物费用昂贵，于普及；抗作用机难单理还取决于生物学环境，内系统降解情况不明，体要进行长期的安全和疗效评价及风险评价；克隆抗单

快速免疫学检测奠定基础。 己烯雌酚 (deh lt b sr l D S在畜牧、 itysi eto, E ) l水

产养殖业上的广泛运用，多研究表明己烯雌酚能许引发人的癌症，以国际上对 D S的应用进行了严所 E格的限制，常小斌等利用杂交瘤技术建立了 1株稳定分泌己烯雌酚单克隆抗体的杂交瘤细胞。无色孔雀石绿 ( u o lc i re, MG) 1 cma ht g en L e a e或

体在农药免疫分析的应用中，先需要合成农药人首工抗原，要许多化学交联和光谱学方面的知识；需而动物免疫和细胞培养方面又要应用到许多医学方面的知识和技能，因此制备和发展农药单克隆抗体到用于建立其免疫测定方法的整个过程需要多学科的人才共同协作。

称隐性孔雀石绿，孑雀石绿 (是 L MG)生物体内的在主要代谢产物和存在形式， MG的还原产物，是其残留时间更长，害更大。随着社会公众对水产品危

虽然存在上述问题，我们应该清楚的意识到但

单抗的潜在益处是巨大的，别是在鱼类的病害的特诊断和治疗方面，者认为可以从以下方面开展工笔

安全的进一步关注，界各国均加强了对违禁使用世孔雀石绿的检测和查处力度，中 L其 MG是主要检测目标物。为此，春城等制备抗无色孔雀石绿赵抗体 (含多克隆抗体和单克隆抗体两种形式 )并包，进行相关鉴定，为建立免

疫分析法检测无色孔雀石绿打下基础。

作：展鱼类免疫机制的基础性研究，开这是开展单抗在水产中应用工作的基础；同时针对目前鱼病用药不规范，治疗效果欠佳及水产品中药物残留严重的现象，加大单抗在鱼类病害治疗方面的力度，之要使成为新型的水产品安全药物；此外，制具有高度特研

呋喃西林 ( i o ua)硝基呋喃类药物的一 nt fr1是 r种。由于它以及其代谢物均具有很强的致癌副作用，已引起世界各国的高度重视。呋喃类物质在动

异性的单抗载体也是重要的方面，使该载体与对病原具有很强杀伤作用的药物、扰素、素等偶联，干毒将其携带至病灶局部，以特异性地杀灭病原，可同时能降低对正常组织细胞和宿主的损害。参考文献：[]夏永娟， 1黄威权，金晓航，抗鳗弧菌单克隆抗体免疫保护作等.用的实验研究[]海洋湖沼通报，0 0 6 3;-. J. 2 0,( ) 69 [] ChnSY, h n ,MoZL rp rt na diet ct n 2 e Z a gP J .P e aai n dni ai o i f oo n co a nt o i sa a n ti i a g ia u J.Hi f mo o l n la i d e g i s b o n u l m[] b vr lr g h.

物体内稳定性较差，代谢物与组织蛋白结合可以而

形成稳定的化合物，在各国均禁止其在畜牧生产现上应用，因此对于呋喃类物质代谢物的研究和检测

的意义就显得更为重要。Ga oA Z等∞报道了农药呋喃西林代谢物——氨基脲衍生物单克隆抗体制备的相关研究。李军平等口运用单克隆抗体技术

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Ap i a i n o o o l na plc to f M n c o lAntb d e n t e Aqu c lu e i o is i h a ut rL a—i。 IXio l’,Z ANG—a g,Z H Yifn

ENG n— ig,XU n—a g, AO i g,TONG a g Lig bn。 Yig f n。 XI Jn Lin( . o lg fAn ma ce c u n n Ag iut r lU ie s y,Ku ig, u n n, 5 2 1 C ia 1 C le e o i lS in eY n a rc l a n v r i u t mn n Y n a 6 0 0, h n{2 Ya gteRi e s e isRee r h I siue,CAFS,Jigz o . n z v rFih re sa c n tt t n h u,H u e, 3 0 0, hia) b i4 4 0 C n

Ab t a t As a fe tv e h fr s a c n i g s si he i f c i us d s a e。 o con la i d e sr c: n e f c i e m t od o e e r h a d d a no i n t n e to i e s s m no l a ntbo i s

( c )h v o fa v n a e,s c s h g e r e o p cfct,h m o e e t M Ab a e a l to d a t g s u h a i h d g e fs e i iy i o gn i y,s a l e o r e W ih t b er s u c . tt e de t fa plc ton,M c a r a o e i he a ua ulu e The a tc e i r du e h h or f h p h o p ia i Ab pl y a g e t r l n t q c t r . r i l nt o c d t e t e y o

M c,s mm a i e h n e tg to n p l a i n o c n t e a u c lu e i c u i g t e d a n ss Ab u rz d t e i v s i a i n a d a p i t f M Ab i h q a u t r, n l d n h ig o i c oo a t ra nd via a ho e fb c e i l a r lp t g ns,a d t xa i a i fh m o n dii e i ue,dic s e x s i g n hee m n ton o or ne a d me c ner s d s s u s d e itn p ob e n o pe t o c b i h qu c lur . r l ms a d pr s c fM A n t e a a u t e Ke r s mon l na ntb y; i e s

y wo d: oco Ia i od d s a e;ho m o r ne;me i i e i d cne r sdue; u c l u e aq a u t r

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