抗肿瘤海洋放线菌ACMA006发酵条件的优化

生物

中国海洋药物杂志２００８年１２月第２７卷第６期Ｃｈｉｎ，ＭａｒＤｒｕｇｓ，２００８Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，Ｖ０１．２７Ｎｏ．６

抗肿瘤海洋放线茵ＡＣＭＡ００６发酵条件的优化△

袁献温，杨瑞丽。。曹雪

（东南大学医学院病原生物学和免疫学系。江苏南京。２１０００９ｌ

摘要：目的为提高海洋放线茵ＡＣＭＡ００６抗肿瘸活性物质的产量而对其发酵条件进行优化。方法包括

对发酵培养基的组成、种龄、温度、通气量和发酵时间等备件的研究，选择最优的发酵条件。结果最佳培养基为：大豆粉１０９，胰蛋白胨５９，酵母膏１０９，可溶性淀粉１５９．甘油１５９，ＫＨ２ＰＯ‘０．５９，陈海水１０００ｍＬ，ｐＨ７．２。最佳培养务件；温度２８℃，种龄６ｄ，装液量３３％（ｖ／Ｖ），发酵时间８ｄ。结论在此优化条件下，蕾株ＡＣＭＡ００６的生物量为７８．１９ Ｌ＿。，发酵液稀释４０００倍时，对人肝癌细胞ＨｅｐＧ２的抑制率为９３．７％。关键词：海洋放线茵；抗肿瘤活性物质；发酵；优化

中图分类号：Ｒ９３１．７１１，ＴＱ４６０文献标识码：Ａ文章编号：１００２—３４６１（２００８）０６—０００５—０５

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Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｍａｒｉｎｅａｃｔｉｏｎｍｙｃｅｔｅｓ；ａｎｔｉｔｕｍｏｒｓｕｂｓｔａｎｃｅ；ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ；ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ

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海洋微生物由于其生存环境的复杂性，

形成了独特的代谢途径，其次生代谢物通常具有极大的多样性、复杂性和高生物活性。已报道的生物活性主要包括抗菌、抗病毒、抗肿瘤、免疫抑制、酶及酶抑制、维生素、毒素等，其中抗肿瘤活性已经成为当今天然产物

研究的热点［１］。本课题组前期研究发现海洋放线菌ＡＣＭＡ００６具有很强的抗肿瘤活性，能够抑制Ｈｅｌａ细胞、Ｌｏｖｏ细胞、ＨｅｐＧ２细胞、７７２１细胞、ＳＰ２／０细胞等多种肿瘤细胞的生长，并且能够诱导肿瘤细胞发生凋亡［２］。

为了获得最多的天然活性物质，必须寻

△基金项目：江苏省卫生厅课题（Ｈ２００７５８）

作者简介：袁献温，男。项士Ｅ－ｍａｉｌ；ｙｘｗｌ４６１２（孕ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｅｌｌ－通讯作者：Ｔｅｌ：１３８１４１５７１６６ｒＥ－ｍａｉｌ；ｙｒｌ８１２＠ｓｏｈｕ．ｃｏｒｎ。

５

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生物

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求一个最优的条件使得菌株在发酵时发挥最大的潜力，从而使菌株在这种条件下发酵具有最大的生长量及最大的活性强度。本文以菌体生物量和发酵液抗肿瘤活性强度为标准，对该菌株的发酵条件，包括培养基、温度、种龄、通气量、接种量、发酵时间等方面进行了优化，为以后的大批量发酵提供理论依据。１材料与方法１．１材料

１．１．１

菌株：放线菌ＡＣＭＡ００６从连云港

海域采集所得的海泥样品分离所得。现已保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会，专利菌种保藏编号为ＣＧＭＣＣＮｏ．２０２７。

１．１．２基础培养基：大豆粉１０９，胰蛋白胨

１０９，可溶性淀粉１０９，ＫＨ２Ｐ０４０．５９，陈海水

１０００ｍＬ，ｐＨ７．２。

１．１．３种子培养基：可溶性淀粉２０９，ＫＮ０８

ｌｇ，ＮａＣｌ０．５９，Ｋ２ＨＰＯ，０．５９，ＦｅＳ０４０．０１９，

ＭｇＳＯ。０．５９，琼脂２０９，重铬酸钾０．１９，陈海水１０００ｍＬ，ｐＨ７．２～７．４。

１．１．４发酵培养基：蛋白胨５９，酵母提取物１９，陈海水１０００ｍＬ，ｐＨ８．０。

１．１．５

细胞株：ＨｅｐＧ２细胞由本实验室常

规保存。

１．２

方法

１．２．１样品的制备：将菌株从斜面培养基转接至种子培养基，从种子培养基中以一定比例接种至发酵培养基中，摇床振荡培养。发酵结束后，将发酵液取出后转移至１５ｃｍ３离１．２．２

抗肿瘤活性的测定方法：根据文

６。

万方数据

中国海洋药物杂志２００８年１２月第２７卷第６期

３７℃、５％Ｃ０２的条件下培养２４ｈ后加入２０ｆｚＬ不同稀释倍数的待测样品，阴性对照为２０ｔ．ｃＬ的ＲＰＭｌｌ６４０培养基，每个样品和对照均有３个平行；继续培养７２ｈ，取出培养板，每孔加入２０／ｘＬ以ＰＢＳ配制的５ｍｇ ｍＬ－１的ＭＴＴ，３７℃下反应４ｈ；将９６孔板１０００ｒ ｒａｉｎ－１离心３ｒａｉｎ，弃去上清液，每孔加入ＤＭＳ０１５０肛Ｌ，振荡２ｍｉｎ，然后用酶标仪（ＢｉｏＲａｄ，Ｍ５５０）测定各孔的吸光值，设定测定波长为４９２ｎｍ，以阿霉素作为阳性对照。按下面公式计算各菌株发酵液对肿瘤细胞的抑制率。发酵液活性以ＩＤ。。衡量，ＩＤ。。为抑制率为５０％时发酵液所稀释的倍数。抗癌药物的活性以ＩＣ５。衡量，ＩＣ。。为抑制率为５０％时药物的浓度。

抑制率计算公式如下：

抑制率（％）＝ＵＡ对照一Ａ实验）／Ａ对照］×

１００

１．２．３

菌体生物量的测定方法嘲：取１０ｍＬ

发酵液于离心管中，１２０００ｒ ｍｉｎ－１离心１０ｒａｉｎ后，６０℃烘干过夜，称重，即为菌体干重。

１．２．４统计学分析：实验数据以三±５表示，碳源对菌株ＡＣＭＡ００６抗肿瘤活性的在基础培养基中，分别以蔗糖、甘油、葡

出菌株发酵液活性最高的的碳源为可溶性淀用统计软件ＳＰＳＳ分别进行方差分析。２结果与讨论

２．１

心管中，超声破碎仪破碎４ｍｉｎ，４℃下１００００Ｉｔ＂ ｍｉｎ＿１离心１０ｍｉｎ，小心吸出上清，以０．２２ｍｍ３微孔滤膜过滤除菌，分装于ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管中，一２０℃保存，用时以ＲＰＭｌｌ６４０培养液适当稀释。

影响

萄糖代替可溶性淀粉作为不同的碳源，以无碳源的培养基作为对照，分别测定其抗肿瘤活性。实验结果如图１。从实验结果可以看粉，其次为甘油，蔗糖和葡萄糖的效果较差，无碳源培养基发酵所得的发酵液活性最低，其中抑制率为发酵液稀释倍数为４０００时计算所得。

２．２氮源对菌株ＡＣＭＡ００６抗肿瘤活性的

影响

献［３棚作适当修改，消化收集的细胞并制成单细胞悬液，接种细胞于９６孔板，每孔加入１８０ｔｔＬ含５０００个细胞的培养液；’细胞在

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图１不同碳源对菌株ＡＣＭＡ００６

抗肿瘤活性的影晌

碳源

Ａ．可溶性淀粉；Ｂ．甘油；Ｃ．蔗糖｝Ｄ．葡萄糖｝Ｅ．对照

在基础培养基中，分别以酵母膏、硫酸铵、硝酸钾代替胰蛋白胨作为不同的氮源，以无氮源的培养基作为对照，分别测定其抗肿瘤活性，实验结果如图２。从实验结果可以看出，菌株发酵液活性最高的氮源为胰蛋白胨，其次为酵母膏，硫酸铵和硝酸钾的效果很差，无氮源培养基发酵所得的培养基活性最低，其中抑制率为发酵液稀释４０００倍时计算

所得。

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图２不同氮源对西株ＡＣＭＡ００６

抗肿瘤活性的影响

氯源

九胰蛋白胨｛＆酵母膏ＩＣ．硫酸铵｝Ｄ．硝酸钾ｆＥ．对照

２．３碳源氮源的正交优化试验

根据单因素实验结果，以可溶性淀粉、甘油、胰蛋白胨和酵母膏作为碳氮源，采用Ｌ９（３４）正交表进行碳氮源配比优化实验，每个处理重复３次，结果见表１。对菌株ＡＣ—

ＭＡ００６抗肿瘤活性的影响顺序为：酵母膏＞

可溶性淀粉＞胰蛋白胨＞甘油。其中抑制率

为发酵液稀释４０００倍时计算所得。对正交

实验进行方差分析发现各因素的Ｐ值均小

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于０．０５，因此，４种因素对实验均具有显著性的影响，由表２可以看出，Ｆ值由大到小依次为Ｄ、Ａ、Ｃ、Ｂ，Ｆ数值越大表明该因素的变化对结果影响越大，因此可以看出对菌株发酵液抗肿瘤活性的影响顺序为：Ｄ、Ａ、Ｃ、Ｂ，

这与直观分析的结果基本一致。

袭ｌ碳氮源正交实验结果

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１４．６

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Ｆｏ．０５（２．１８）＝３．５５，Ｆｏ，ＯＩ（Ｚ。１８）＝６．０１，各组数据的Ｆ值均大于６．０１，即Ｐ＜０．０１，均具有显著性差异。

２．４

种龄对菌株ＡＣＭＡ００６生长和合成抗

肿瘤活性物质的影响

将菌株ＡＣＭＡ００６由斜面培养基转接至种子培养基，种子培养基发酵至第３、４、５、６、７、８、９天时，分别按ｌｏ％比例转接至发酵培养基，发酵至第６天时，分别测定其菌体生物量以及抗肿瘤活性，结果见图３。从实验

７’

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Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，Ｖ０１．２７Ｎｏ．疗

结果可以看出，随着种龄的延长，菌株的生长量逐渐增大，发酵液的活性逐渐增强，当种龄为６ｄ时，菌株生长量和发酵液的活性都达到最高峰，当种龄继续增大时，菌株的生长量和发酵液的抗肿瘤活性都开始降低，因此菌株ＡＣＭＡ００６的最适发酵种龄为６ｄ。

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图３种龄对菌株ＡＣＭＡ００６生长和抗肿瘤活性的影响

２．５

温度对菌株ＡＣＭＡ００６生长和合成抗肿瘤活性物质的影响

将菌株ＡＣＭＡ００６由斜面培养基转接

至种子培养基，当发酵至第４天时，按１０％的比例转接至不同温度（２０，２４，２８，３２，３６和３９℃）的发酵培养基中，发酵至第６天时，分别测定其菌体生物量以及抗肿瘤活性，结果见图４。从实验结果可以看出，随着温度的升高，菌株的生长量和发酵液抗肿瘤活性也逐渐增大，当发酵温度为２８℃时，菌株的生物量和发酵液抗肿瘤活性都达到了最大值，当温度继续升高时，生物量开始降低，发酵液的抗肿瘤活性也开始降低，因此该菌株的最通气量对菌株ＡＣＭＡ００６生长和合成通气量是通过一定容积的容器中装液量

． ８。

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温度（℃）

图４温度对菌株ＡＣＭＡ００６

生长和抗肿瘤活性的影响

测定其菌体生物量及抗肿瘤活性，结果见图５。从结果可以看出，随着装液量的增大，该菌株的生长量和发酵液的抗肿瘤活性都逐渐增大，当装液量为５０ｒａＬ时，达到峰值，当装液量继续增大时，菌株的生长量和发酵液的抗肿瘤活性都开始降低，所以该菌株发酵的最佳装液量为３３％（ｖ／Ｖ）。

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图５通气量对菌株ＡＣＭＡ００６生长和抗肿瘤活性的影响

将菌株ＡＣＭＡ００６由斜面培养基转接适发酵温度为２８℃。

２．６

２．７发酵时间对茵株ＡＣＭＡ００６生长和合成抗肿瘤活性物质的影响

至种子培养基，种子培养基发酵至第４天时，转接至不同的发酵培养基中，发酵３，４，５，６，７，８，９，ｌＯ，１１，１２，１３和１４ｄ时，测定其生物量以及抗肿瘤活性，结果见图６。随着发酵时间的增加，菌株的生物量逐渐升高，其中第８天时生物量最高，所以该菌株生长的最适发酵时间为８ｄ；随着发酵时间的增加，发酵液的活性逐渐升高，所以该菌株合成抗肿瘤活性物质活性最高的发酵时间为９ｄ，综合菌体生物量和抗肿瘤活性两方面的因素，确定

抗肿瘤活性物质的影响

的多少来衡量的，本实验通过１５０ｍＬ三角烧瓶中装液量的多少来观察通气量对菌株ＡＣ—ＭＡ００６生长和合成抗肿瘤活性物质的影响。将菌株ＡＣＭＡ００６由斜面培养基转接至种子培养基，种子培养基发酵至第４天时，分别按１０％比例转接至装有１０，２０，３０，４０，５０和６０ｍＬ的三角烧瓶中，发酵至第６天时，分别

生物

中国海洋药物杂志２００８年１２月第２７卷第６期Ｃｈｉｎ．，ＭａｒＤｒｕｇｓ，２００８Ｄｅｃｅｍｂｅｒ。Ｖ０１．２７Ｎｏ．疗

菌株ＡＣＭＡ００６的最适发酵时间为８ｄ。

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种最好的条件，使微生物具有最大的生物量，

使发酵液中抗肿瘤活性物质的活性最高。

通过单因素优化实验和正交实验，发现菌株ＡＣＭＡ００６发酵液抗肿瘤活性最高的培养基组成为：大豆粉１０９，胰蛋白胨５９，酵母膏１０９，可溶性淀粉１５９，甘油１５９，ＫＨ２

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发酵时间（ｄ）

０．５９，陈海水１０００ｍＬ。综合考虑菌株生

长和发酵液抗肿瘤活性两方面的因素，确定菌株ＡＣＭＡ００６的最佳发酵条件为：温度２８℃，种龄６ｄ，装液量３３％（ｖ／Ｖ），发酵时间８ｄ。在以上最优条件下，菌体生物量和抗肿瘤活性都有了很大的提高，测定菌株ＡＣ—ＭＡ００６的生物量为７８．１９／Ｌ，对肿瘤细胞的抑制率为９３．７％，这为以后大规模工业发酵生产提供依据。

致谢：本教研室林陵、廖静怡、马素霞等老师对本文的部分工作给与了很多帮助。参考文献：

ｉ－１３赵俊凌，古静燕，侯大斌．海洋放线菌抗肿瘤活性物质研究进展［刀．绵阳师范学院学报，２００７，２６（２）：９１．

图６发酵时间对菌株ＡＣＭＡ００６

生长和抗肿瘤活性的影响

２．８优化验证实验

采用优化过的培养基作为发酵培养基，将菌株由斜面培养基转接至种子培养基，２８＂Ｃ振荡培养６ｄ，按１０％比例接种于内装有５０ｍＬ发酵培养基的１５０ｍＬ三角烧瓶中，发酵至第８天测定菌株ＡＣＭＡ００６的生物量和抗肿瘤活性，结果表明菌株的生物量为７８．１９ Ｌ～，发酵液稀释４０００倍时的抑制率达到９３．７％。３结论

微生物天然产物的产生是由两方面的因素决定的，一方面由内在的遗传特性所决定，另一方面受外部环境的限制。微生物的发酵受外部环境条件的影响较大，不同的环境条件往往使得微生物具有不同的生长状态和不同的代谢途径，从而产生出不同的代谢产物。在前期的研究中我们筛选得到了一株具有较强抗肿瘤活性的放线菌菌株ＡＣＭＡ００６，为了获得更高产量的目的化合物，我们对其进行了一系列发酵条件优化试验，力求寻找一

［２］扬瑞丽，袁献温，郑杰，等．一株海洋放线菌发酵液抗肿瘤活性初探［Ｊ］．台湾海峡，２００７，２６（３）：３５１．［３］ＤａｒｉｕｓｚＰ，ＴｏｍａｓｚＷ，ＩｒｅｎｅｕｓｚＭ．Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ

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ＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙＰａｒｔＣ：Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ＆Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，￥００６，

１４４（１）；８５．

［４］杨智源，郑忠辉，黄耀坚，等．海洋放线菌细胞毒抗肿瘤括性物质的初筛［Ｊ］．中国海洋药物 １９９９，７０（２），５２．［５］杨东靖．纳他霉素高产菌株的链霉素抗性选育及其发酵工艺的优化［Ｊ］．药物生物技术，２００３ １０（２）；８４．

（收稿日期：２００８－０５－２１）

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９

万方数据

生物

抗肿瘤海洋放线菌ACMA006发酵条件的优化

作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：引用次数：

袁献温， 杨瑞丽， 曹雪， YUAN Xian-wen， YANG Rui-li， CAO Xue东南大学医学院病原生物学和免疫学系,江苏,南京,210009中国海洋药物

CHINESE JOURNAL OF MARINE DRUGS2008，27(6)0次

参考文献(5条)

1.赵俊凌.古静燕.侯大斌 海洋放线菌抗肿瘤活性物质研究进展[期刊论文]-绵阳师范学院学报 2007(2)2.杨瑞丽.袁献温.郑杰.王淑军.李丹 一株海洋放线菌发酵液抗肿瘤活性初探[期刊论文]-台湾海峡 2007(3)3.Dariusz P.Tomasz W.Ireneusz M Comparative study of DNA damage,cell cyde and apoptosis in humanK56Z and CCRF-CEM leukemia cells:Role of BCR/ABL in therapeutic resistance 2006(1)4.杨智源.郑忠辉.黄耀坚 海洋放线菌细胞毒抗肿瘤活性物质的初筛 1999(2)

5.杨东靖.陈冠群.王敏.杜连祥 纳他霉素高产菌株的链霉素抗性选育及其发酵工艺的优化[期刊论文]-药物生物技术 2003(2)

相似文献(10条)

1.期刊论文 凌娜.季宇彬.茅云翔.邓丹 海洋微生物抗肿瘤活性物质研究进展 -中国海洋药物2008,27(3)

概述2000年以来海洋微生物抗肿瘤活性物质的研究进展,着重介绍海洋细菌、海洋放线菌及海洋真菌抗肿瘤活性物质取得的成果,并展望该领域研究的广阔应用前景.

2.学位论文 杨智源 海洋放线菌抗肿瘤活性物质的体外筛选及其初步研究 1998

3.期刊论文 王正平.张庆林.胡艳红 海洋微生物抗肿瘤活性物质的研究进展 -化学工程师2004,18(4)

从海洋微生物中寻找和开发抗肿瘤药物是前途广阔的新领域.近年来,从海洋微生物中分离到许多结构新颖的抗肿瘤活性物质.本文按微生物种类,综述近几年海洋细菌、海洋放线菌及海洋真菌抗肿瘤活性物质的研究进展.

4.学位论文 袁献温 抗肿瘤海洋放线菌ACMA006菌株的筛选、鉴定及其活性物质的初步分离纯化 2008

目的： 1.从海洋微生物中筛选出1株或几株具有较强抗肿瘤活性的菌株。 2.对筛选出的目的菌株进行分类、鉴定。 3.对目的菌株的培养条件进行优化,并初步分离纯化目的菌株发酵液中抗肿瘤活性物质,为活性物质结构鉴定和进一步利用奠定基础。 方法： 1.通过MTT法从海洋微生物中筛选具有较强细胞毒活性的菌株,并检测目的菌株对正常细胞的毒性。 2.采用圆形纸片法测定该菌株的抗菌活性。 3.通过荧光染色法、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪(Annexin V-FITC/PI)方法研究菌株发酵液诱导肿瘤细胞凋亡能力。 4.通过形态特征、培养特征、生理生化特征、细胞壁化学成分分析和16SrDNA序列测定,对活性菌株进行分类、鉴定。 5.采用单因子实验和正交设计实验筛选活性菌株的最佳培养基配方；研究温度、种龄、通气量和发酵时间对该菌株的生长和产生抗肿瘤活性物质的影响。 6.采用活性跟踪的方法对活性菌株发酵液中的活性物质进行初步分离纯化。 结果： 1.MTT筛选结果显示,在供试的96株海洋微生物菌株(31株海洋放线菌,63株海洋细菌,2株海洋真菌)中,约13％的放线菌和3％的细菌发酵液具有细胞毒活性；其中放线菌ACMA006细胞毒性很强,且能抑制多种肿瘤细胞的生长。 2.进一步研究表明：菌株ACMA006发酵液对人正常肝细胞LO2的毒性较小,ID50约为2200,对HepG2细胞的毒性较大,ID50约为5000;而且能够抑制革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的生长。经菌株发酵液作用的HepG2细胞,出现典型的凋亡细胞的形态学特征,部分细胞的核收缩、碎裂,形成凋亡小体；有明显的DNA梯形凋亡条带(ladder shape);并且,随着发酵液量的增加,HepG2细胞凋亡率逐渐升高。 3.经过形态特征、培养特征、生理生化特征、细胞壁化学成分分析和16SrDNA序列测定,初步将菌株ACMA006鉴定为链霉菌属中卡伍尔链霉菌华盛顿亚种的一个新的分离菌株。 4.通过单因子实验和正交实验发现放线菌ACMA006的最佳碳氮源浓度为：可溶性淀粉1.5％,甘油1.5％,胰蛋白胨0.5％,酵母膏1％。菌株ACMA006的最适发酵条件为：温度28℃,种龄6d,150mL三角烧瓶中装液量为50mL,发酵时间8d。 5.稳定性实验结果表明,发酵液中抗肿瘤活性物质的热稳定和碱性条件稳定性好,经50℃～100℃处理2h后,或者在pH7～10时,发酵液活性没有明显改变；但pH2～4时,发酵液活性显著下降。乙酸乙酯能够萃取到发酵液中大部分的抗肿瘤活性物质：经薄层层析发现乙酸乙酯相中共有6种组分,其中3个组分对HepG2细胞有较强的毒性。 结论： 1.从96株海洋微生物中筛选得到6株具有细胞毒活性的菌株,其中放线菌ACMA006对肿瘤细胞的毒性很强,对正常细胞毒性较小。 2.菌株ACMA006发酵液具有一定的抑菌活性,且能诱导肿瘤细胞发生凋亡。

3.菌株ACMA006属于链霉菌属,是卡伍尔链霉菌华盛顿亚种的一个新的分离菌株。 4.培养基的成分和培养条件对菌株的生长和产生活性物质的能力会产生不同的影响,优化的培养基能够使菌株ACMA006生长和发酵液中的抗肿瘤活性物质的活性得到最佳发挥。 5.从菌株ACMA006发酵液的乙酸乙酯萃取物中得到3个对HepG2细胞有较强毒性的组分,为活性物质结构鉴定和进一步研发奠定基础。

5.期刊论文 彭建柳.陈育.袁学丈.PENG Jian-liu.CHEN Yu.YUAN Xue-wen 海洋微生物抗肿瘤活性物质的研究进展 -国际医药卫生导报2009,15(12)

海洋微生物因其特殊的生存环境而具有产生新型生物活性物质的巨大潜力,从海洋微生物中寻找和开发抗肿瘤药物是一个前途广阔的新领域.近年来,从海洋微生物(海洋放线菌、真菌和细菌)分离鉴定了许多结构新颖的抗肿瘤活性物质,这些化合物显示了良好的抗肿瘤生物活性.本文就近几年从海洋微生物中分离得到的抗肿瘤活性物质的研究进展作了综述.

6.期刊论文 赵俊凌.古静燕.侯大斌.ZHAO Jun-ling.GU Jing-yan.HOU Da-bin 海洋放线菌抗肿瘤活性物质研究进展 -绵阳师范学院学报2007,26(2)

与陆生放线菌相比,海洋放线菌已经进化出了独特的代谢途径,它们的次级代谢产物显示出化学结构多样性、复杂性以及更强的生物活性,这些活性物质为新药研究、开发,特别是抗肿瘤药物开发提供丰富的先导化合物.本文对海洋放线菌抗肿瘤活性物质的研究进展进行了概述.

7.学位论文 李军 海洋放线菌N350抗肿瘤活性物质的研究 1999

生物

该文以改进的生化诱导分析(BIA)固体法作为抗肿瘤活性物质的初筛模型,对从台湾 海峡厦门海区潮间带分离到的655株海洋微生物进行筛选,得到16株能产生作用于DNA的抗肿瘤活性物质的菌株,筛选得率约为2.4﹪.结合体外肿瘤细胞抑制模型MTT分析法,从16株阳性菌中复筛出一高活性菌株放线菌N350.对该菌株的分类地位进行研究,根据其形态、培养特征及理化性质,将其暂定为浅绛红链霉菌海洋变种.

8.期刊论文 陈钢.朱卫.CHEN Gang.ZHU Wei 海洋微生物抗肿瘤活性物质研究进展 -浙江海洋学院学报（自然科学版）2008,27(3)

近年来,从海洋微生物中已分离到许多结构新颖的抗肿瘤活性物质.对来自海洋放线菌、海洋真菌及海洋细菌中的抗肿瘤活性物质的研究进行了综述.并对该领域未来的研究重点进行了展望.

9.会议论文 杨好.许强芝.焦炳华 海洋微生物抗肿瘤研究进展 2004

自从美国1967年提出“向海洋寻求药物”的口号，“蓝色药物”引起了各国的重视，短短几十年便有一万多种新化合物被发现，其中两百多种已申请专利，最初研究的焦点主要在海藻和软体动物身上，并且得到了许多极具潜力的先导化合物，但海洋动植物资源有限，分离纯化复杂，难以工业化生产等弊端一直是阻碍海洋药物研究进一步开展的棘手问题，而海洋中种类最为多样的海洋微生物以其代谢产物多样和可培养逐渐吸引研究者的目光，尤其在抗肿瘤活性方面。有学者预言最有前途的抗肿瘤药物来自海洋，而海洋微生物在此领域有着巨大的潜力。 本文介绍了海洋微生物的多样性和异质性，简述了海洋细菌来源的抗肿瘤活性物质：别单孢菌属、土壤杆菌属、芽饱杆菌属、假单孢菌属等。并对海洋放线菌来源的抗肿瘤活性物质、海洋藻青菌来源的抗肿瘤活性物质进行了分析。研究发现与陆地微生物不同，海洋真菌而并非放线菌成为海洋微生物抗癌药物的主要来源。

10.期刊论文 刘燕兰.肖丽华.吴敏.陈帅.杨瑞丽 海洋微生物抗肿瘤活性物质研究的新进展 -中医药导报2007,13(6)

文章对近5年来海洋微生物抗肿癌活性物质研究进展进行了综述.详细介绍了海洋细菌、海洋放线菌及海洋真菌抗肿瘤活性物质研究取得的成果,展示了该研究的广阔前景.

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下载时间：2010年3月17日

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