部分马兜铃科药材中马兜铃酸A的含量测定研究

部分马兜铃科药材中马兜铃酸A的含量测定研究

药物分析杂志

,

一

部分马兜铃科药材中马兜铃酸周跃华’,

的含量测定研究’,

周娟

’

,

黄莎莎,

,

,

伍玉娥,

,

王野

杜晓曦路金才,,

’,

“

国家食品药品监督管理局药品审评中心北京四川大学华西药学院成都

四川省药品检验所成都

沈阳药科大学沈阳

摘要

目的在已有文献报道的基础上通过比较研究进一步优化了实验条件建立灵敏度高重现性好的马兜铃酸,、

,

,

、

含量测色谱柱·

定方法并对部分马兜铃科马兜铃属细辛属的药材中马兜铃酸柱检测波长,,,

的含量进行测定至一

。

方法采用高效液相色谱法一

。

林

流动相

碳酸钱用稀盐酸调进样量在二

乙睛,

,

流速二

一

’

柱温

℃二

。

结果马兜铃酸

范围内线性关系良好回归方程为。、

,

方法的回收率

为,

结论建立的含量测定方法准确灵敏专属性强重现,

,

、

性好为含马兜铃酸,

的药材及制剂的质量控制等研究提供了可供借鉴的实验方法同时检测结果也为相关马兜铃科药材。

的合理使用提供了参考关键词马兜铃酸

含量测定高效液相色谱法文献标识码文章编号一一

中图分类号

一

一

一

,

,

,

一一,,

,

一

,

,

一

,

,

,

二,

贾

盯,

,

,

,

,

一

,

,

一【,

、

林一

】·

一一,

℃,,

叮

,

,

马兜铃酸

主要存在于马兜铃。

木通药用标准的通知》禁止关木通药材在市场上流通中成药处方中含有的关木通以木通替换,

,

科的马兜铃属和细辛属植物中细辛属种。

据不完全统计中,

,

国法定药材标准收载的马兜铃属中药材共有巧种

年

月以国药监注

」,

号文发布《关于加强,、

国家食品药品监督管理局在

年

防己等

种药材及其制剂监督管理通知》取消广

月以国药监注仁第一作者

〕

号文发布《关于取消关一一

防己和青木香的药用标准用防己土木香分别替换

嗒

部分马兜铃科药材中马兜铃酸A的含量测定研究

一、

药物分析杂志,、,

,

广防己青木香同时规定含马兜铃寻骨风天仙藤朱砂莲的中药制剂严格按处方药管理目前除了国家明令禁止使用的关木通、、

、

对照品适量加甲醇制成即得。

,

林

·

一

’

的溶液,

,

、

,

、

“

防己青木香外细,

、

供试品溶液,,

取宜宾防己粉碎过一,一

,

,

号筛取,,

辛马兜铃

天仙藤收载于中国药典,

年版一部,

,

精密称定精密加人尹醇,,

酸,,,

寻骨风收载于卫生部部标准中药材第一册其余品种收载于各地地方药材标准作为地方习用药材。

称定重量加热回流醇液一,

放冷再称定重量用甲,

甲酸。汉·

补足减失的垂量摇匀滤过取续滤一

使用

’

离心

。

取上清液即得

,

。

含马兜铃酸的中药材大部分已有马兜铃酸含量测定方法的文献报道但较少对含量测定方法进行全面系统的考察定力法主要有法多一’。、一

实验条件的确定

,

色谱条件的确定马兜铃酸,

。

目前文献报道的马兜铃酸含量测￡【

测定波长的选择一

取马兜铃酸

法川

一’’

、

一

法

、

对照品适量以乙睛

碳酸钱溶液用稀盐制成一定浓度的对照品溶,

毛细管电泳法、

等其中以,

,

法应用最法,

酸调

至一

本研究以宜宾防己为代表药材采用,

液在在,

,

波长范围内进行光谱扫描分别,

以分离度最低检测限及定量限为指标对流动相进

,

波长处有吸收其中,

,

,

行

考察对样品的前处理方法和条件进行了研究“”,

,

为最大吸收波长故选择的测定波长。

作为马兜铃酸

并按照中国药典,

年版一部附录新增的中药质进行了含量测定

量标准分析方法验证指导原则

流动相的筛选

对已有文献报道的流动相进一一

方法学验证以期建立具有较好检测灵敏度和重现性的含量测定方法铃酸、。

行综合分析选定比较试验①乙睛一

,

种应用较为·

泛的流动相进行

此外对部分药材进行了马兜。

,

’

磷酸二氢钠溶液

的含量测定以考察该方法的适用性,

用

磷酸调水一

至至。

②乙睛采用马兜铃酸、

一

仪器试药及样品

碳酸钱溶液用稀盐酸调,

③甲对照品定量限

高效液相色谱仪检测器。,

紫外

醇

一

醋酸,

,

色谱工作站北京普析通

溶液对醇溶液

种流动相的检测限信噪比法林·

用仪器有限责任公司紫外可见分光光度仪马兜铃酸

信噪比法进行考察采用马兜铃酸混合对照品甲一

’

对

种流动相中马兜铃酸。

对照品批号,、

一

购购于美国

、

马兜铃酸,

的分离度进行考察的检测限为、

结果流动相,

,

于中国药品生物制品检定所马兜铃酸混合对照品含马兜铃

酸、

马兜铃酸,,

①马兜铃酸马兜铃酸品中马兜铃酸

定量限为在样流动相

马兜铃酸

的分离度为,

公司甲醇乙睛为色谱纯其他试剂均为分析纯宜宾防己采于四川省宜宾地区琪县经四川省食品药品检验所主任药师黎跃成鉴定为马兜铃科

与相邻峰的分离度为的检测限为、

②马兜铃酸,

定量限为在样流动相在样。

马兜铃酸

马兜铃酸

的分离度为,

植物川南马兜铃人

。。

品中马兜铃酸

与相邻峰的分离度为的检测限为、

的干燥根、

其他试、

③马兜铃酸,

定量限为最后至

验样品分别来源于四川省食品药品检验所标本室四川大学华西药学院标本室乐山市药品检验所标本室广西壮族自治区药品检验所荷花池中药材专恤、

马兜铃酸一

马兜铃酸

的分离度为

品中马兜铃酸

与相邻峰的分离度为。

、

、

确定以乙睛

碳酸铰溶液用稀盐酸调为流动相

市场等

。

试验用药材样品均经黎跃成主任药师鉴定〔,

。

色谱条件

样品前处理方法的确定

色谱柱协

提取溶剂的考察号筛取,

取宜宾防己粉碎过,

,

流动相一

碳酸钱溶液用稀盐酸调,

至

,

甲精密称定分别采用不同的溶剂「,、

乙睛

流速。

·

一

’

检测波

醇

一

甲酸、、

‘

甲醇甲醇一

一一

甲酸

、

甲醇一

、

长

柱温溶液制备马兜铃酸

℃

乙醇三氯甲烷

一

醋酸一

、

甲醇

水,

二氯甲烷

甲醇

醋酸,

进〕行考

对照品溶液

精密称取马兜铃酸

察超声处理

,

功率

频率

按

部分马兜铃科药材中马兜铃酸A的含量测定研究

药物分析杂志“”

,

一

项下色谱条件进行测定结果马兜铃酸,

含量,,

品溶液各,

林

,

按

“

”

项下色谱条件进行测定以,,

分别为,·

,

,

,

对照品的进样浓度为横坐标以对应的峰面积为纵坐标得出峰面积与进样量的线性关系回归方程,

一

’。

结果表明以甲醇,

一

甲酸

、

三氯甲烷

一,

甲醇

一

醋酸,

为提取溶一

为,,

剂的测定结果最高故考察提取方法时选择甲醇甲酸和三氯甲烷。

一

甲醇

醋酸,

巧

同,

线性范围为重复性考察

一

时进行比较号筛取表,

取宜宾防己粉碎过,,

号筛取,

提取方法的考察,,

取宜宾防己粉碎过的提取溶剂及提取,

份取样量在,

,

一,

范围内按“”

,

“

”

项

精密称定按表“

下的方法制备供试品溶液按

项下

色谱条件进为

方法进行提取按,

,

”

项下色谱条件进行测定结果的方的测定结一,

行测定结果马兜取铃酸·

含量,

表明采用索式提取和加热回流,

一

’

,

为重现性考察、

。

法测定结果无明显差异超声处理

取宜宾防己在四川省药检所“”

果偏低甲醇酸,

一

甲酸,

和三氯甲烷。

甲醇

一

醋

中药室实验室四川大学华西药学院实验室和沈阳医科大学实验室分别按,

提取结果也无明显差异一

考虑到三氯

项下的方法制备供。

甲烷毒性较大最后选定以甲醇表

甲酸。

为提

试品溶液按,

“

”

项下色谱条件进行测定,,

结果马·

取溶剂采用加热回流的方法进行提取不同提取方法的考察结果《

兜取铃酸平均·

含量分别为·

一

’

一

’

,

为

。

准确度考察马兜铃酸提取方法一

取已测含量含量,

·

含量甲醇一一

。

,

。一。。

·

。。。

。

一

一

’

的宜宾防己样品约”

份平均分为,,

,

二抓甲烷

一

醋酸,

甲醇一。二

一

甲酸一

「

。

〕,

几

,,。一

组每组分别加人马兜铃酸“

,

对照品溶液适量按“”

、〔

、

」

《毛

〕

项下的方法制备供试溶液按。

项下色谱条

索式提取、,‘,

件进行测定为表。

结果见表

,

平均加样回收率

一一,、

、

。。

·

加样回收试验考察结果

加热回流,卜

一比

加人马兜铃酸超声处卫【一七,‘

的以,、

平均回收率,

《

。

、,

卿

味

‘,

,‘八、勺、气乙

尹气了「气

〔

【

…提取时间的考察

取宜宾防己粉碎过,,,

号筛取约,,,,

,

精密称定精密加人甲醇,

一

甲酸,,

耐用性试验稳定性考察溶液浓度为林,

分别在不同提取讨间进行提取按含量,,,

精密吸取马兜铃酸·

对照品项下色谱

而,

“

’,

项下色谱条件进

哪,,,,

一

’

林,

及供试品溶液

行测定结果马兜铃酸,

,

。

分别为·

,

分别在和,

,

,

按

“

”

,

一

’。

结果

条件进行测定

,

,

计算峰面积值的

分别为

表明加热回流,

,

一

测定结果没有明显的。

。

差异最后确定加热回流时间为

流动相比例的考察品溶液在流动相

取同一宜宾防己供试

方法学验证

碳酸钱溶液用稀盐酸调。

线性范围的考察量加甲醇制成浓度为一,,,,,

精密称取马兜取铃酸,,

适,,

至时按“”

一

乙睛不同比列

,

项下色谱条件进行测定,,

结果马兜铃酸·

,

,

,

,

含量分别为。

一

’

为。

,

,

,

,

,

,

,

哪

·

一

’

的系列对照品溶液

。

精密吸取上述对照

结果表明该方法耐用性较好流动相中变化的考察取同一宜宾防

部分马兜铃科药材中马兜铃酸A的含量测定研究

一己供试品溶液在流动相,

药物分析杂志

,

碳酸钱溶液,

一

乙睛

溶液分别采用不同色谱柱,

,

不同,,·

·

,

时按为

“

”

项下色谱,

林

,

,

条件进行测定结果马兜铃酸一

含量分别为。。

林

,

,

,

’

结果

卜

按」为

“

”

项下色谱条件进行测定,,

。

结果马兜铃·

表明该方法耐用性较好,

。

酸

含量分别为二。。

一

’

碳酸铰溶液浓度的考察液在流动相碳酸钱用稀盐酸调睛时按的碳酸钱不同浓度“”

取同一供试品溶至,

结果表明该方法耐用性,

一

乙,

较好

结论的耐用性较好样品测定,

根据以上考察的结果可知该方法。

项下色谱条件进行测定,,

。

结果马·

兜铃酸一

含量分别为为。

’

。

。

结果表明该方法耐用“

’取药材按,,

”

项下的方法制备供试品溶液,

,

性较好

按’项下的色谱条件进行测定按外标法以峰面不同品牌色谱柱的考察

取同一供试品表

积计算样品含量结果见表

。

样品测定结果

拉丁学名一

名称

样品号

收载标准,,〔

药用部位

马兜铃酸一

含量

。

一

”

厉了。之

〔

乙

冕犷防己,,,、「、,

四川省中药材标准周

根或块根

〔,

。,

。,》

即

乙

‘乙人

川

,

四川省中药材标准,

根或块根

。。

一

四川省中药材标准,

根或块根

。〕

一

四川省中药材标准一

根或块根

一

川,

了〕 (

训玉

,

淮通

四川省中药材标准几,

藤茎一

一

四川省中药材标准,

膝茎

四川省中药材标准一

藤茎

。

词

,

“几臼‘

￡

广元防己群引

四川省中药材标准一,

根或块根一

。。、,

】

四川省中药材标准,

根或块根

。

四川省中药材标准‘

根或块根

一

二

。

,

四川省中药材标准以,

根或块根一

一

四川省件药材标准,,

根或块根一

。

,

心

记一

瀚

八,

优

宜宾防己目

四川省中药材标准,

根或块根

一。

一

’勿

。‘

她

比以

马兜铃

中国药典

以〕

年版一部

果实加

部分马兜铃科药材中马兜铃酸A的含量测定研究

药物分析杂志

,

一续表

一

拉丁学名

名称

样品号

收载标准一

药用部位

二

马兜铃酸

含量

肠用

一

。

肠

口

湍

寻骨风

四川省中药材标准

增补版

地卜分部

耐一,

卫生部部标准

中药材第一册罗,

全草口,,

朱砂莲一

四川省中药材标准,

块根

占

门祝‘岑

北细辛

中国药典

年版一部

全草

《闷

一

中国药典一即

年版一部

根及根茎

苔叶细辛

四川省中药材标准三

增补版

全草

,

,一

四川省中药材标准增补版一一,

全草

南坪细辛一〕

四川省中药材标冷。‘,

、

全草

卜却门君已

乃

似

湘细辛石

湖南省二〔

,

药材标准,

全草

一

‘

鳍‘遥

面

山慈姑

广酉中药材标准一一,

邵

全草

的药材马兜铃酸,

,

含量相对较高便于进行方法。,

,

学研究故以宜宾防己为对象进行研究人,

声

本研究在查阅大量国内外文献资料的基础上以马兜铃酸

三王

与马兜铃酸

的分离度马兜铃酸,

、

的检测限及定量限为评价指标对九万骊几下丽‘

法测定马,

石

在图

‘

兜铃酸酸调

常用的,

种流动相进行了比较研究研究一

结果表明流动相乙睛图

碳酸铰溶液用稀盐的适应性较好。

药材样品的

值至,

马兜铃酸

对照占,

、

冕

本研究对样品的前处理方法进行了较全面的研究在综合分析国内外文献报道所采用提取溶剂的基础上选择、

寸防己,

号样品罗,

目目,

,

厂元防己

一

号样品

荞‘细辛北细辛号样品,

产号样万,

,

种提取溶剂进行比较研究同时对。

提取方法提取时间进行了考察酸一,

确定以甲醇一

一

甲

淮通宜宾防己马兜铃酸

号样品日,

为提取溶剂加热回流提取。

为样甲醇

号样占

、

品的前处理方法

研究结果表明三氯甲烷甲醇一

醋酸一

、

水,

的提取效率与甲一

讨论本研究采用的宜宾防己为自行采集并经鉴定

醇

甲酸,

基本一致的其他提取溶剂提取效甲醇一

率相对较低考虑到三氯甲烷

醋酸

部分马兜铃科药材中马兜铃酸A的含量测定研究

一

一

药物分析杂志,

,

的毒性较大甲醇,

一

水,

提取的杂质相对较一

功效相同的其他药材代替以避免不良反应的发生

,

。

多故进行方法学研究时采用甲醇为提取溶剂。

甲酸,

梁于马兜铃酸,

在马兜铃科的药材中相对较的含量。

低或不含故此次试验未测定马兜铃酸相同的色谱峰可能有杂质干扰故,,

由于马兜铃科植物所含成分

各不相同保留时间与马兜铃酸参考文献飞

在对不同种属的植物进行含量测定研究时需对色

仃〕

,

』

,

歇,

,

、

出,

〔

“

,

一

〕

谱峰的专属性进行研究检测器对马兜铃酸此外还采用铃酸确认为马兜铃酸,

。

本试验中采用二极管阵列,

,

一

‘

书

‘·

对照品及样品中相同保留时。,

行,,

,

,

,

间的色谱峰进行了光谱扫描确认二者的一致性一

￡

一

,

。

·

法对宜宾防己样品中与马兜,

出一

一

丈“

对照品相同保留时间的色谱峰进行了考察。,

金理一

了

,

,

『

,

」

,

,

拓翎‘

一一,

样品含量测定结果表明马兜铃属药材中马兜铃酸、

“

龟,一,〕

咭张兰翻」,,,

,

,

的含量高于细辛属药材以根及根茎人药的含量较高同一植物来,,

一

‘,,

一

,,

崔晓红‘,

,

马兜铃属药材中马兜铃酸

哀志芳

。

飞

。,

〔

源不同的药用部位可能都含有马兜铃酸

但其材及其制剂中马兜铃酸

〔

〔、

一

法测定。‘

’’

药

分布情况有待进一步研究

。

的含带

尸

药物分析」

马兜铃酸的急性毒性长期毒性实验研究结果以及含有马兜铃酸的药品临床研究结果显示马兜,

、

杂志

,

,

姜旭由丽双,

,

一

。

几刊心。〔

,

一

铃酸叮引起肾脏毒性一

。

此次测定用样品均为国家现,

一

一

测定不同了

吞二

地‘‘

行中药材标准或地力中药材标准收载的品种马兜铃属,

青木香和细辛中马兜铃酸,,,

的含量

种药材细辛属,

、

种药材均检测出马兜铃酸的含量

药杂志

,

,

,

,

‘

一·

竺

由于历史原因药材标准中均未规定马兜铃酸的,

〔

、

‘飞‘

了

一

·

一

〕

控制指标该研究为建立药材中马兜铃酸、

一一

‘

皿。。,

,,

,

,

测定方法及制定合理限度规定合理的药材使用剂量和时间提供了实验基础和参考数据,

,

卜付水吞·

一

,万

赵、·

萍

,

。

陈文,

,

本试验首次对湘细辛、

二

薄层扫描法测定龙胆泻肝丸中当兜铃酸的含景药物分析杂志,,

‘

,

,

苔叶细辛、

,

妇慈姑,

鳍

种已有法

月一一

定药材标准的马兜铃科药材进行了马兜铃酸

的,

即

仃

,

滩

,

含量测定为合理用药以及相关品种的安全评价提

供了参考依据

。

并再次证实马兜

铃属植物中含有马。

,

,

,

之

〔,

兜铃酸的普遍性

除了中成药生产中应尽量避免使,,

仃,,,

用含马兜铃酸的药材在地方习用药材的使用中也应充分关注含马兜铃酸药材的使用状况尽量改用

本文于

左三

收到

本文来源：https://www.bwwdw.com/article/8651.html