保健功能纺织品cas115-2005

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中国标准化协会标准 CAS

115-2005

STANDARDS OF CHINA ASSOCIATION

FOR STANDARDIZATION

保健功能纺织品

Health-care Textiles

200x-xx-xx 发布

索引号

CAS 115-2005(C)

CAS 115-2005

该标准版权为中国保健协会与中国标准化协会共有。除了用于国家法律或事先得到 中国保健协会与中国标准化协会文字上的许可外,不得以任何形式复制该标准。

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CAS 115-2005

前 言

本标准按《中国标准化协会标准管理办法》进行管理,按CAS1.1—2001《中国标准化协会标准结构及编写规则》的规定编制。

本标准由中国保健协会首次提出、归口并负责解释。 本标准由中国保健协会与中国标准化协会共同发布。

使用本协会标准的单位,应按国家有关规定办理企业标准备案,并对技术内容负责。 本标准中的某些条款可能涉及专利权,中国标准化协会及中国保健协会不负责对任何该类专利权的鉴别。

本标准是第一次制订。在本标准实施过程中,如发现需要修改或补充之处,请将意见和有关资料寄给中国保健协会、中国标准化协会,以便修订时参考。

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CAS 115-2005

目次

1 范围 ................................................................ 1 2 规范性引用文件 ...................................................... 1 3 术语和定义 .......................................................... 1 4 分类 ................................................................ 2 5 技术要求 ............................................................ 2 5.1 内在质量、外观质量 ................................................. 2 5.2 保健功能评价指标 ................................................... 2 5.3安全性评价指标 ..................................................... 3 6 试验方法 ............................................................ 3 6.1内在质量、外观质量试验 ............................................. 3 6.2保健功能试验 ....................................................... 3 6.3安全性检测试验 ..................................................... 5 7 保健功能结果判定 .................................................... 5 8 检验规则 ............................................................ 5 9 标志和包装 .......................................................... 5 附 录 A法向发射率测定法 ............................................. 7 附 录 B生物微循环血流量变化率测定法 ................................. 9 附 录 C磁场强度测定法 .............................................. 10 附 录 D抗菌功能测试方法 ............................................ 11 D1 标准空白样 ......................................................... 11 D2 抗菌织物试样洗涤试验方法 ........................................... 11 D3抗菌材料的溶出性测试方法:晕圈法 ................................... 11 D4试验仪器及前期准备 ................................................. 12 D5 抗菌功能测试方法:吸收法 ........................................... 14 D6 抗菌功能测试方法:振荡法 ........................................... 15

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CAS 115-2005

保健功能纺织品

1 范围

本标准规定了保健功能纺织品的发射远红外线功能(以下简称远红外功能)、产生磁场功能(以下简称磁功能)、抗菌功能的范围、术语和定义、分类、要求、试验方法、保健功能结果判定、检验规则、标志和包装等。

本标准适用于具有远红外功能、磁功能、抗菌功能的保健功能纺织品。 2 规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注明日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,同时鼓励根据本标准达成的各方研究使用这些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。

GB 5296.4 消费品使用说明 纺织品和服装使用说明 GB/T 191 包装储运图示标志 GB/T 4856 针棉织品包装标准

GB/T 8629 纺织品 试验用家庭洗涤和干燥程序 GB 9345 塑料灰分通用测定方法

GB 18401 国家纺织产品基本安全技术规范

JIS L 0217 纤维样品试样处理方法及相关标识表示方法

JIS L 1902 纤维制品抗菌性能的试验方法(8 定量试验方法) AATCC 100 抗菌整理织物的试验方法 卫生部 《化妆品卫生规范》(2002年版) 卫生部 《消毒技术规范》(2002年版) 3 术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。 3.1保健功能纺织品

具有远红外功能、磁功能、抗菌功能等作用,旨在调节和改善机体功能,并且对人体不产生任何毒副作用,达到保健目的的一类纺织品。 3.2远红外功能

加载高效远红外线发射材料的一类纺织品,通过发射的远红外线作用于人体,产生热效应,具有促进微循环改善的保健功能。 3.3磁功能

加载磁性材料的一类纺织品,通过磁场的物理能量作用于人体细胞代谢、血液循环、神经调节等,使人体局部微循环得到改善,并加强局部组织营养和氧供应。 3.4永磁材料

指此种磁性材料可以产生恒定磁场,永磁材料的矫顽力大,磁性不易消失。

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CAS 115-2005 3.5磁片

形状呈圆形扁平,表面微凸,直径5-20mm。 3.6磁粒

又称磁珠,形状呈圆形扁平,表面微凸,直径小于5mm。 3.7磁条

形状呈长条形棒状,全称为软质棒状磁条,简称软质磁条。 3.8塑磁

永磁粉末与塑料混合制成的粘结型永磁材料。 3.9橡胶磁

永磁粉末与橡胶混合制成的粘结型永磁材料。 3.10抗菌功能

加载抗菌材料的一类纺织品,运用其自身的物化特性,通过杀灭、抑制或妨碍微生物生长繁殖能力的过程,使其达到清洁卫生的作用。 4 分类 4.1功能分类

一般分为远红外功能、磁功能、抗菌功能,保健功能纺织品可具备一种或多种功能。 4.2产品分类

4.2.1 床上用品:被、床垫、枕、枕套、被套、床单、睡袋等。 4.2.2 服饰制品:内衣类、护身类、袜类、帽子、手套等。 4.2.3 其它用品:窗帘、地毯、垫类等 5 技术要求

保健功能纺织品应符合内在质量、外观质量、保健功能和安全性四个方面的技术要求。 5.1 内在质量、外观质量

内在质量包括干燥质量、强力、缩水率和染色牢度等项指标。外观质量包括表面疵点、规格尺寸及公差等项指标。内在质量和外观质量的指标应符合国家、行业相关标准的要求。 5.2 保健功能评价指标 5.2.1 远红外功能评价指标

5.2.1.1 远红外线波长范围应在4μm-16μm。

5.2.1.2 法向发射率提高值应不小于0.08。其法向发射率应不小于0.80。 5.2.1.3 洗涤30次后,法向发射率提高值应不小于0.06。

5.2.1.4 采用发射远红外线粉体制备的功能化学纤维的灰分指标应不小于3.5%。

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5.2.1.5 动物实验微循环血流量的增加量应不小于50%。 5.2.2磁功能评价指标

5.2.2.1 磁体织物表面磁感应强度应为40mT~110mT。

5.2.2.2 特殊部位:眼近周部用品的磁体织物表面磁感应强度应低于70mT。 5.2.2.3 磁体的数量及分布应科学合理。 5.2.3抗菌功能评价指标

抗菌织物按抗菌功效作用分为普通抗菌织物、高抗菌织物,其抗菌功能评价指标见表1。

表1 抗菌织物的抗菌评价指标 项目及菌种 水洗 次数 0 30 0 30 抑菌率(%) G+ 菌 金黄色葡萄球菌 ≥ 99% ≥ 90% ≥ 90% ≥ 80% G- 菌 大肠杆菌 ≥99% ≥90% ≥90% ≥70% 真 菌 白色念珠菌 ≥90% ≥60% - - 高抗菌织物 普通抗菌织物 5.3安全性评价指标

保健功能纺织品(包括其加载的发射远红外线、产生磁场、抗菌等功能材料)的安全性应符合表2 安全性评价指标要求。

表2 安全性评价指标 项 目 甲醛含量、pH值、色牢度、异味、可分解芳香胺染料 溶出性抗菌织物(抗菌类产品) 皮肤刺激性试验 急性眼刺激性试验(眼近周部用品) 皮肤变态反应试验 致突变性试验 Ames试验 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验 小鼠精子畸形试验(男用内衣制品) 6 试验方法

6.1内在质量、外观质量试验

按照国家、行业相关要求的检测方法检测。 6.2保健功能试验

6.2.1远红外功能检测

6.2.1.1远红外线的波长和法向发射率按照附录A要求进行检测。 6.2.1.2远红外功能织物的灰分按GB 9345 要求进行检测。

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要 求 应符合GB 18401中规定的要求 洗涤一次后,抑菌圈宽度D ≤5mm 无刺激 无刺激 无致敏反应 阴性 阴性 无畸变 CAS 115-2005

6.2.1.3远红外功能织物按照GB/T 8629中规定的8A程序进行洗涤。 6.2.1.4对比样为非远红外功能织物的同类纺织材料,应从洗涤前样品上剪取,不进行洗涤。 6.2.1.5微循环血流量按附录B生物微循环血流量变化率测定法进行检测。 6.2.2磁功能检测试验

6.2.2.1 磁体织物表面磁感应强度按附录C进行检测。 6.2.2.2 磁体数量及分布科学合理。

6.2.2.2.1磁体数量及分布科学合理按表3进行评价。

表3 磁体数量及分布评价表 产品名称 批准文号 磁性材料名称 磁体种类 磁场强度 □ 塑磁 □ 橡胶磁 □其它 □ 磁条 □ 磁片 □ 磁粒(珠) □其它 mT(磁体织物表面) 磁体数量 产品特点描述(材料、功能和用途等): 应附材料 (带下划线的文件必须提供,如为复印件须加盖公章) □ 磁体分布示意图(布局及N、S极方向) □ 保健机理 □ 产品的样品、标签及说明书 □ 磁检验报告 □ 产品检验报告 □ 安全性评价报告 □ 产品的质量标准 □ 相关医学临床试验报告 □ 国内外有关资料 □ 产品技术鉴定报告 □ 其它材料 磁体分布评价 序号 评价项目 1 2 3 4 产品是否保持了一定舒适性? 保健机理是否科学? 磁体分布是否合理? 磁体是否容易脱落? 评价结果 说明 □是 □否 □不确定 □是 □否 □不确定 □是 □否 □不确定 □是 □否 □不确定 评价结论: □ 科学合理 □ 不符合科学、合理的要求 □ 不确定,请说明: 评价专家签名/日期: 专家: 日期: 年 月 日

6.2.2.2.2由中国保健协会专家委员会指定的专家进行判断。

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6.2.2.2.3判断标准:产品具有一定的舒适性,保健机理科学,磁体分布合理,磁体不易脱落。以上要求有一项不满足者,则该产品的磁体数量与分布是不科学合理的。 6.2.3抗菌检测试验

6.2.3.1溶出性、非溶出性抗菌织物按照附录D中D3晕圈法进行判断。 6.2.3.2溶出性抗菌织物按照附录D中D5 吸收法检测。 6.2.3.3非溶出性抗菌织物按照附录D中D6振荡法检测 。 6.2.3.4试验菌株应由国家级菌种保藏管理中心提供。

6.2.3.5试验中使用的洗涤剂按GB/T 8629 附录B的要求配制。 6.2.3.6试验中的洗涤程序按照本标准附录D中D2进行洗涤。 6.3 安全性检测试验

6.3.1保健功能纺织品一般安全性要求试验:甲醛含量、pH值、色牢度、异味、可分解芳香胺染料的检测按GB 18401《国家纺织产品基本安全技术规范》执行。

6.3.2保健功能纺织品和加载的发射远红外线、产生磁场、抗菌等功能材料的安全性检测试验:皮肤刺激性试验、急性眼刺激性试验(眼近周部用品)、皮肤变态反应试验、致突变性试验按卫生部《化妆品卫生规范》(2002年版)中相关规定执行。 7 保健功能结果判定

抽检样品的内在质量、外观质量和安全性检测结果在符合本标准5.1、5.3条款要求的基础上,按照本标准5.2中的远红外功能、磁功能、抗菌功能的评价指标进行功能判定。其中对于采用发射远红外线粉体制备的功能化学纤维以外的特殊功能材料的远红外功能判定,可不受5.2.1.4条款的限制。 8 检验规则

8.1出厂检验应按表4 要求项目进行检测。

表4 出厂检验项目 检验项目 内在质量 外观质量 灰分 磁场强度 抑菌率 安全性指标 8.2型式检验

8.2.1新产品投产前。

8.2.2材料、设计、工艺有重大改进时。

8.2.3型式检验至少三年进行一次检测,检测项目包括本标准中全部项目。 8.2.4国家质量监督机构提出型式检验要求时。

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要求 本标准 5.1 5.1 5.2.1.4 5.2.2.1 5.2.2.2 5.2.3 5.3 表2 第1项 本标准 6.1 6.1 6.2.2.1 6.2.3 试验方法 其它标准 GB 9345 GB 18401 9 标志和包装

9.1标明产品具有远红外功能、磁功能和抗菌功能(高或普通)中的一项或几项。 9.2标明产品的执行标准。

9.3产品使用说明应标明适宜人群和禁忌人群。 9.4产品的使用说明应符合GB 5296.4的要求。

9.5产品的包装应符合GB/T 4856、GB/T 191标准要求。

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附 录 A (规范性附录) 法向发射率测定法

A1 范围

本方法适用于远红外法向发射率大于0.2的各种织物、粉末等材料的样品及导热物体样品的远红外法向发射率的检测。 A2 方法概要

A2.1 斯忒藩—玻尔兹曼定律

斯忒藩—玻尔兹曼定律描述绝对黑体的全辐射出射度与其绝对温度之间的关系:

Mb???T4 (W?m?2) 其中:M为绝对黑体的全辐射出射度;b代表黑体;σ=5.67032×10-8 W/(m2·K4)为斯忒藩—玻尔兹曼常数;T为黑体的绝对温度。 A2.2黑体的辐射亮度

L?M?

其中:L为黑体的辐射亮度,M为黑体的全辐射出射度。

A2.3样品法向发射率采用与标准黑体法向全辐射亮度比较的方法测量。其计算公式为:

?FrtLt???????TLbMb?bMt???? ?4其中:ε为样品法向发射率;Lt是温度为t时样品法向全辐射亮度;Lb是与样品温度相同时黑体的法向全辐射亮度;Mt是样品的全辐射出射度;Mb是与样品温度相同时黑体的全辐射出射度;Frt是样品的全辐射温度(K);Tb是与样品温度相同时黑体的绝对温度。 A3 试验仪器

A3.1红外光谱仪/红外辐射计

A3.2黑体炉有效发射率应大于0.998,光栏孔径不小于10mm。 A4试样

A4.1 织物试样

从每个远红外织物样品上,距布边至少10cm处剪取测试样。

从相应非远红外织物样品上,剪取对照品测试样一块,作为对比样。

分别将试样和对比样粘在铜片上。 A4.2纤维及非织造布试样

从每个样品上取适量的纤维或非织造布,剪为约0.5mm长的碎末,用水玻璃调制成糊状,均匀地涂在直径为2cm的铜片上(涂覆厚度与一般织物相近),再在其表面撒一层干碎末。

用同样的方法制作相应的非远红外功能的纤维或非织造布的对比样。

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CAS 115-2005 A5步骤

A5.1将试样和对比样放在烘箱中,温度100℃,烘2h。

A5.2测量黑体炉能量发射曲线,或者测量黑体炉的辐射亮度,温度100℃。

A5.3将试样放入黑体炉内,升温至100℃,测出试样的法向发射率曲线,或者测出试样的辐射亮度。

A5.4将对比样放入黑体炉内,升温至100℃,测出对比样的法向发射率曲线,或者测出对比样的辐射亮度。

A6 数值处理和不确定度分析 A6.1 数据处理

A6.1.1计算机通过程序将黑体炉的辐射亮度、试样的辐射亮度、对比样的辐射亮度进行数据处理,并计算出4μm~16μm波段的法向发射率。 或者计算机通过程序将黑体炉能量发射曲线、试样的法向发射曲线、对比样的法向发射曲线进行数据处理,并计算出4μm~16μm波段的法向发射率。

A6.1.2以试样法向发射率减去对比样的法向发射率的差值作为法向发射率提高值。 A6.2 不确定度分析

A6.2.1黑体炉本身的误差:±0.8%

A6.2.2样品全辐射亮度或全辐射温度测量误差:±0.5% A6.2.3黑体温度测量带来的误差:±0.2% A6.2.4样品温度测量带来的误差:±0.5%

A6.2.5样品制作带来的误差:±1.0%~±1.5% A6.2.6合成标准不确定度(uC):±1.5%~±1.9% A6.2.7扩展不确定度(U):±3.0%~±3.8% (k=2)

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附 录 B (规范性附录)

生物微循环血流量变化率测定法

B1 范围

本方法用于测定大鼠肌肉(提睾肌,脊斜肌)或肠系膜的血流量变化率。 B2 方法概要

B2.1在显微镜下观察到肌肉或肠系膜的血管,用红细胞跟踪仪测定该血管(小动脉或小静脉)的红细胞血流速度(Vrbc),由Vrbc换算出平均血流速度Vm,用电视测微仪测定该血管

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口径(D),通过公式计算出该血管的血流量(Q,Q=Vm*π*D/4)。 B2.2 把功能纺织品放在肌肉标本上,20分钟后取下纺织品,观察和检测作用前后流量变化。 B3仪器、设备、材料

B3.1 95型半导体点温计

B3.2 WX多部位微循环显微仪和电视录像系统及配套YK-MICAS微循环图像分析系统

B3.3 13.3%乌拉坦-1%氯醛糖麻醉剂、pH7.4平衡Kreb氏清液及SD大鼠、对照样品和测试样品。

B3.4 1441型Thermomix 恒温灌流器 B3.5 VI-550型电视测微仪

B3.6 102-B型红细胞跟踪相关仪 B4实验步骤

B4.1 以Gray法制备大鼠脊斜肌活体微循环观察标本。

B4.2 用恒温灌流器将37℃、pH7.4平衡Kreb氏液滴流标本,以保持其温度、湿度、pH值和离子强度的恒定。

B4.3 将对照样品和测试样品剪成2.0cm×2.0cm大小,轻轻覆盖在肌肉标本表面20分钟 B4.4 用微循环显微仪观察,用测微仪测定微血管口径D(μm)。 B4.5 用红细胞跟踪相关仪测量血流速度V (mm/s)。 B5计算方法

B5.1平均血流速度Vm=V/1.6(mm/s) B5.2血流量变化率 A?Q2?Q1?100% Q1 式中:A —血流量变化率

Q1 —作用前血流量(P1/S) Q2 —作用后血流量(P1/S)

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Q = Vm * π* D/4(P1/S)

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附 录 C (规范性附录) 磁场强度测定法

C1 范围

本方法适用于测定加载永磁体的磁功能磁体织物表面磁感应强度。 C2 方法概要

用霍尔探头感应织物内永磁体在其表面的磁感应强度。 C3试验仪器 数字特斯拉计。 C4检测环境

室温18℃~25℃,采光明亮。 C5检测界面

永磁体在纺织品表面的投影处(纺织品与人体的接触面)。 C6检验步骤:

C6.1检测点数

C6.1.1使用磁片或磁粒的床上用品、服饰用品,检测点为10个,枕为5个。随机抽取。 C6.1.2使用磁条的床上用品(被、床垫等)检测4根软质棒状磁条,随机抽取。

C6.2检测时探头密切接触检测点的表面,用力均匀,在检测点上反复移动,以找出磁感应强度的最高点。检测磁条时,探头应从磁条的一端,逐渐移动至磁条的另一端,找出该磁条磁感应强度最高点。 C7磁感应强度的计算

C7.1磁片检测后各点的最高值,其算术平均值,则为该检测样品的织物磁体表面磁场强度检测结果。

C7.2软质磁条的最高值,其算术平均值,则为该检测样品的织物磁体表面磁场强度检测结果。

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附 录 D (规范性附录) 抗菌功能测试方法 D1 标准空白样

D1.1工艺制备方法

坯布→煮炼(NaOH 15~20g/L,100℃,3小时 )→ 漂白 (H2O2 3~4 g/L,100℃,3小时)→ 洗涤 → 检验 D1.2检验方法

按本标准规范性附录D中D5所示吸收法做细菌生长试验,接种活菌计数为10cfu/mL

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的菌液培养18小时后应可达到生长活菌数>10cfu/ml,否则不能作为标准空白样。

D2 抗菌织物试样洗涤试验方法

D2.1提示

本方法参照GB/T 8629、日本标准JIS L 0217 中103进行制定。 D2.2 设备和材料

D2.2.1 洗衣机:家用洗衣机。

D2.2.2 洗涤剂:按照GB/T 8629附录B无磷ECE和IEC标准洗涤剂中的规定配制。

D2.2.3 垫洗织物:由若干块两层100%的涤纶针织物或涤棉混纺机织物组成,其单位面积质量约为试验织物单位面积质量相近(±25%),每块尺寸为30±3cm×30±3cm,两层织物的边缘应缝合在一起。 D2.3 洗涤条件及程序

D2.3.1 洗涤程序参照日本标准JIS L 0217 中103方法执行。

D2.3.2 在家用洗衣机中使用GB/T 8629附录B所规定的洗涤剂0.2%(即2g/l)及自来水,浴比1:30,水温40℃±3℃,投入试样,洗涤5min。然后,于常温下用清水清洗。

D2.3.3 第一遍清洗2min,捞出织物,脱水30s,然后,于常温下用清水进行第二遍清洗。 D2.3.4 第二遍清洗2min,捞出织物,脱水30s。

D2.3.5 上述D2.3.2,D2.3.3,D2.3.4三步为一个循环,计为洗涤1次。重复这三个步骤,直到预定的洗涤次数。为防止残留的洗涤剂干扰抗菌测试,注意最后一次洗涤采用大量的清水将其彻底清除,脱水后,织物按GB/T 8629中的干燥程序进行烘干,方可用于抗菌性能测试。

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D3抗菌材料的溶出性测试方法:晕圈法

D3.1 提示

本方法适用于抗菌织物所用抗菌材料的溶出性测试,可用于判定试样是否为溶出性抗菌织物。为防止抗菌织物在加工过程中残留的浮离化学物质的干扰,用于试验的织物试样均应按本标准规范性附录D中D2进行一次洗涤然后测试。 D3.2 试验准备

D3.2.1 试样准备:将已各洗涤一次的标准空白试样、抗菌织物试样或非抗菌的同类织物试样,距布边10cm以上取2.5×2.5cm的试样5~6块。将试样用小纸片包好,在103KPa灭菌15min,备用。

D3.2.2 接种菌液准备:将D4.5.1制备的细菌悬液(或D4.5.2真菌悬液),用0.03M PBS

56缓冲液稀释至活菌数为5×10~5×10 cfu /ml。

D3.2.3 琼脂培养基的准备:向已消毒的平皿中倒入营养琼脂培养基(或沙氏琼脂培养基)约15ml,盖上盖,室温下静置15min,使培养基凝固。 D3.3 试验操作

D3.3.1试样接种:用无菌棉拭子蘸取接种菌液,在平皿的琼脂培养基表面均匀涂抹3次,每涂抹1次,平皿转动60度,最后将棉拭子绕平皿边缘涂抹一周。盖上盖,置室温干燥5min。 D3.3.2 贴试样:将试样平贴在培养基上,用无菌镊子轻压样片,使其紧贴于培养基表面。每个平皿内可贴一块空白织物试样及两块抗菌织物试样。各样片边缘相距1.5cm以上,与平皿边缘也相隔1.0cm以上,每次试验作两个平皿。 D3.4培养及计数

D3.4.1倒置平皿,放入培养箱中培养。金黄色葡萄球菌、大肠杆菌37℃培养16~18h,白色念珠菌37℃培养24~48h。

D3.4.2 用游标卡尺测量抑菌圈尺寸(包括样片)及试样尺寸,并作记录。测量时,应选择均匀而完全无菌生长的抑菌圈进行,应以抑菌圈外沿为界。

D3.4.3 为降低误差,对同一试样,至少应作三次平行测试,取其平均值报告抑菌率。 D3.5 抑菌圈宽度计算

用下式计算抑菌圈宽度

D?T?R 2式中: D — 抑菌圈宽度(mm)

T — 抑菌圈外沿总宽度(mm) R — 抗菌织物试样总宽度(mm) D3.6 试验有效性判断

阴性对照的标准空白试样抑菌圈宽度DW = 0,否则试验无效,需重作全部试验。 D3.7 试样是否为溶出性抗菌织物的判断

若抗菌织物试样按附录F进行一次洗涤然后测试,抑菌圈宽度D > 1mm,可判定为溶出性抗菌织物;若抑菌圈宽度D≤1mm,则可判定为非溶出性抗菌织物。

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D4 试验仪器及前期准备

D4.1 安全提示

本试验所采用的测试菌种都是能使人感染并致病的微生物,因此必须采用一切必要的防护措施(生物安全Ⅱ)。试验应由在微生物学技术应用方面训练有素试验人员进行操作。 D4.2 仪器和试剂

D4.2.1 仪器

D4.2.1.1 恒温振荡器(摇床)温控精度为±1℃ D4.2.1.2 生化培养箱 温控精度为±1℃ D4.2.1.3 高压蒸汽消毒器(简称灭菌锅) D4.2.1.4 天平 感量为±0.01g D4.2.1.5 生物安全柜

D4.2.1.6 100级层流超净工作台 D4.2.2 器皿

D4.2.2.1 三角烧瓶 容量为100ml,250ml,500ml,1000ml D4.2.2.2培养皿(简称平皿),皿底直径为9cm或10cm D4.2.2.3 定量刻度吸管 容量为0.2ml,0.5ml,1ml和10ml D4.2.2.4 试管 15mm×100mm,20mm×100mm

D4.2.2.5 带盖管形瓶 直径26~30mm,容量为30~50ml D4.2.2.6 酒精灯

D4.2.2.7 4mm铂接种环 D4.2.2.8 游标卡尺 D4.3 试验培养基溶液配制

D4.3.1 营养肉汤

D4.3.2 营养琼脂培养基 D4.3.3 沙氏琼脂培养基 D4.3.4 0.03M PBS缓冲液

D4.3.1-D4.3.4按卫生部《消毒技术规范》(2002年版)附录A配制。 D4.3.5 稀释用生理盐水:0.85%生理盐水

D4.3.6 洗脱用生理盐水:每1000mL 0.85%生理盐水中添加入2g吐温-80。 D4.4 试验菌种及菌种保存

D4.4.1 试验标准菌株:金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、大肠杆菌(8099或ATCC25922)或白色念珠菌(ATCC 10231)。

D4.4.2 菌种转种及保存:储存的菌种每一个月应转种一次,转种次数不超过10代,转种保存一个月或更长时间,不能用来下一次转种。菌种转种后放于5~10℃条件下保存。 D4.5 接种菌液的制备

D4.5.1细菌接种菌悬液制备:从3~10代的菌种试管斜面中取一接种环细菌,在培养皿里的营养琼脂培养基上划线,然后,在37℃±1℃,培养20~24h。取营养肉汤20ml放入100ml锥瓶中,用接种环在已培养20~24h的培养皿中挑一个典型的菌落,接种到营养肉汤中,在37℃±1℃,130r/min、振荡培养18~20h,即制成了接种菌悬液。菌液用比浊法或稀释法测

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定,活菌计数应达到1~5×10cfu/ml。新鲜菌液不可放在冰箱内保存,须在规定的时间内

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完成稀释接种操作,以保证接种菌的活性。

D4.5.2 白色念珠菌等真菌接种菌悬液制备:从3~10代的菌种中取一接种环,在另一支装有沙氏琼脂培养基试管斜面上划线,培养24~48 h,加入3~5 ml 0.03M PBS缓冲液,反复吹吸,洗下新鲜菌苔,然后用5ml吸管将洗液移至另一只无菌试管中,在手上振摇80次,使其均匀,即制成了接种菌悬液。此菌悬液用比浊法或稀释法测定,活菌计数应达到1~5×8

10cfu/ml。新鲜菌液不可放在冰箱内中保存,须在规定的时间内完成稀释接种操作,以保证接种菌的活性。

D5 抗菌功能测试方法:吸收法

D5.1提示

本方法参照日本标准JIS L 1902及美国标准AATCC 100中的定量试验方法制定,适用于吸水性较好的溶出性和非溶出性抗菌织物。 D5.2 试验准备

D5.2.1 试样准备:取0.4g,边长约18mm的正方形叠起来作为一个试样。准备6个由附录D中D1制备的标准空白试样,3个已抗菌织物试样。

D5.2.2 试样灭菌:将试样分别放入管形瓶中,把管形瓶放入到一个网状金属篮子里,在篮子上面盖一层铝箔,并且各个管形瓶口用铝箔扎起来,把篮子放到灭菌锅里保持121℃,103KPa灭菌15min,让它自然冷却到100℃,立即从灭菌锅里取出来,拿走篮子上的铝箔,放到超净工作台上晾干1h,备用。 D5.2.3 接种菌液的准备:

D5.2.3.1吸管从D4.5.1制备的细菌悬液中吸取0.3~1 ml,用稀释20倍的营养肉汤以10倍

5

稀释法制成含活菌计数为0.7~1.5×10 cfu/ml接种液。 D5.2.3.2用0.03M PBS缓冲液作为稀释液,把D4.5.2制备的白色念珠菌悬液稀释成含活菌

5

计数为1.0~1.3×10 cfu/ml,用以对试样接种。 D5.3 试验操作

D5.3.1 试样接种:用一支吸管吸取已准备好的接种菌液0.2ml,接种到已准备好的试样上面(注),在试样上均匀地以几个点滴上接种菌液,并把管形瓶盖子扎紧。 注:如试样拒水,难于浸渍接种液时,可在接种菌液中另加入0.05%非离子表面活性剂,如果加了表面活性剂,应记载在试验报告里。

D5.3.2 试样培养:培养管形瓶里已接种的试样(3个标准空白试样、3个抗菌处理试样及3个未经抗菌处理试样),在37℃±1℃培养18±1h。 D5.3.3 洗脱试样上的细菌:

D5.3.3.1空白试样接种后“0”接触时间洗脱。分别向刚接种的3个标准空白试样管形瓶中加入洗脱试样上的试验菌用冰冷生理盐水20 ml,扎紧管形瓶盖子,用手击打(30次,幅度30cm)或摇床振动(5s/次、5次),把每个空白试样的试验菌洗脱下来。

D5.3.3.2接种细菌培养18h后的试样试验菌洗脱。分别向接种细菌,培养18h后的9个试样中加入洗脱试样细菌用冰冷生理盐水20 ml,扎紧管形瓶盖,用手击打(30次,幅度30cm)或摇床摇动(5s/次、5次),把每个试样上的试验菌洗脱下来。

D5.3.4 洗脱液稀释:用1 ml吸管吸取1 ml洗脱液,放入装有稀释用冷生理盐水9±0.1 ml的试管,摇匀,然后用另一支1 ml吸管吸取1 ml,放入到另一支装有稀释用冷生理盐水9±0.1ml的试管,摇匀,重复这些步骤,用10倍稀释法准备一个稀释系列。

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D5.3.5 培养:从各个稀释度的试管中每次吸取1ml,分别放入到2个培养皿中。在培养皿中加入温度为45℃~46℃的营养琼脂培养基(或沙氏琼脂培养基)约15ml,在室温下凝固。倒置平皿,放入生化培养箱里培养,温度37℃±1℃,时间24~48h(白色念珠菌48~72h)后计数。

D5.3.6 计算活菌数目:按照下式计算所获的活菌数目(保留两位有效数字):

N M = E×10×20 式中:M — 活菌数目

E — 菌落数目(两个平皿中的平均数) N — 稀释倍数,N = 0,1,2,?? 20 — 生理盐水的体积

D5.3.7 为降低误差,对同一试样至少应作三次平行测试,取其平均值报告抑菌率。 D5.4 试样抗菌效果计算

Y?Mb?Mc?100%

Mb式中:

Y — 抑菌率

Mb — 18h培养后标准空白试样的活菌数 Mc — 18h培养后抗菌处理 D5.5 试验有效性的判断

按照下式计算生长值F(保留两位有效数字),对于金黄色葡萄球菌及大肠杆菌,当F≥1.5,对于白色念珠菌,当F ≥1.0时,试验被判定有效,否则判定为无效,要重新进行试验。

F?Mb?Ma

式中:F —生长值

Mb — 18h培养后标准空白试样的活菌数目的常用对数值

Ma — “0”接触时间标准空白试样的活菌数的常用对数值

D6 抗菌功能测试方法:振荡法

D6.1 提示

本方法参考美国道康宁公司开发的振荡烧瓶法Shake Flask Method制定,适用于非溶出性抗菌织物。对于试样的吸水性要求不高,并且纤维状,粉末状,有毛或羽的衣物,凹凸不平的织物等任意形状的试料都能使用。 D6.2 试验准备

D6.2.1 试样的准备 D6.2.1.1 取样:将抗菌织物试样、非抗菌同类织物试样及由附录D中D1制备的标准空白试样,距布边10cm,中间取样。

D6.2.1.2 剪样:将所有试样分别剪成0.5cm大小的碎片。 D6.2.1.3 称样:称取抗菌织物试样、非抗菌织物试样及标准空白试样0.75g±0.05g若干份。将试样用小纸片包好,在103KPa灭菌15min,备用。 D6.2.2 接种菌液的准备

D6.2.2.1用吸管从D4.5.1制备的细菌悬液中吸取2 ~ 3 ml,加入到装有6ml营养肉汤培养

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基的试管中,充分混合均匀后再按10倍稀释法以0.03M PBS缓冲液稀释至含活细菌计数为

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3~4×10 cfu/ml。

D6.2.2.2用吸管从D4.5.2制备的白色念珠菌悬液中吸取1ml,加入到9ml 0.03M PBS缓冲

5

液中,进行10倍系列稀释操作,制成活菌计数为2.5~3×10cfu/ml菌液。 D6.3 试验操作

D6.3.1准备3个灭过菌的250ml锥形烧瓶,在其中一个烧瓶中加入标准空白试样0.75g±0.05g,一个烧瓶中加入抗菌织物试样0.75g±0.05g,另一个烧瓶不加试样用于阳性对照,然后在每个烧瓶中加入70±0.1ml 0.03 M PBS缓冲液。

D6.3.2 用灭菌吸管往每一个烧瓶中加入5ml菌悬液。盖上烧瓶盖, 放在往复式振荡器上, 在23±1℃,以250~300 r/min,振荡1min ± 5s。

D6.3.3立即从“0”接触时间烧瓶中取样。用移液管分别从每个烧瓶中吸取1±0.1ml溶液移入另一支装有9±0.1ml 0.03M PBS缓冲液的试管中,用微型旋涡器混匀;再用十倍稀释法用0.03 M PBS缓冲液进行又一次稀释后,从试管中吸取1±0.1ml,分别加入灭菌的平皿中,接着往每一平皿中倒入营养琼脂培养基(或沙氏琼脂培养基)约15ml,盖上盖,室温下静置15min,使培养基凝固;倒置平皿,37±1℃培养24~48h(白色念珠菌48~72h),计数。

D6.3.4 将已完成“0”接触时间取样的烧瓶,盖好烧瓶盖,置于往复式振荡器上,在23±1℃,以150 r/min,振荡18h后,从每个烧瓶中用移液管吸取1±0.1ml试液,放入有9±0.1ml0.03 M PBS缓冲液的试管中,摇匀。重复这些步骤,用10倍稀释法进行系列稀释。用新移液管从每个稀释度的试管中分别取1ml加入两个灭菌平皿内室温放置,再向每平皿中倒入营养琼脂培养基(或沙氏琼脂培养基)约15ml,盖上盖,待琼脂凝固,倒置平皿,37±1℃培养24~48h(白色念珠菌48~72h)。

D6.3.5 记录结果,对测试同一样品的两个平皿,求出平均菌落数,再乘以稀释倍数,即可求出试样烧瓶内菌液浓度的平均数:

K?Z?10N

式中:K — 试样烧瓶内的活菌浓度(cfu/ml)

Z — 活菌数目(两个平皿的平均值)

N — 稀释倍数,N = 0,1,2,??

D6.3.6 为降低误差,对同一试样至少应作三次平行测试,取其平均值报告抑菌率。 D6.4 试样的抗菌效果计算

Y?

W?Q?100% W式中:

Y — 抑菌率

W — 标准空白试样与细菌接触18h后的活菌数(cfu/ml)

Q — 抗菌试样或未经抗菌织物试样与细菌接触18h后的活菌数(cfu/ml) D6.5 试验有效性的判断

若阳性对照样与标准空白试样烧瓶中的活菌数接近,且对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌等细菌:lgW - lgW0≥1.0,对白色念珠菌等真菌:lgW - lgW0≥0.5,说明试验菌活性较强,试验有效,否则须重作全部试验。

式中:W — 标准空白试样与细菌接触18h后的活菌数(cfu/ml) W0 — 标准空白试样与细菌“0”接触时间的活菌数(cfu/ml)

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本标准起草工作组构成 1 主要起草人及单位:

陈 冲 广州市康佰健康卧室有限公司 冯爱娣 天津市健龙保健品有限公司 雷 勤 天年生物(中国)有限公司 叶民勤 中脉科技(集团)公司 王彩虹 中国保健协会 2 主要参与起草人及单位:

齐 鲁 天津工业大学生物与纺织材料研究所 周万松 北京军区总医院

陈仪本 广东省微生物分析检测中心 姚鼎山 中国科学院上海技术物理研究所 赵克森 南方科技大学病理生理教研室

郭宝岚 中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所

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本文来源:https://www.bwwdw.com/article/7vv2.html

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