高效液相色谱柱效能的评价
更新时间:2024-01-19 03:27:01 阅读量: 教育文库 文档下载
实验一 高效液相色谱柱效能的评定
1. 实验目的和要求
1.1了解高效液相色谱仪的基本结构。 1.2初步掌握高效液相色谱仪的基本操作方法。
1.3 学习高效液相色谱柱效能的评定及分离度的测定方法。
2. 实验原理
苯、甲苯分子非极性部分的总表面积不同,缔合能力不同,其保留时间也不同。通过计算色谱峰的理论塔板数以及各个化学物质间的分离度评价色谱柱的效能。
3. 实验仪器与试剂
3.1 仪器
高效液相色谱仪(带自动进样器,或配置微量进样器) 分析天平 3.2 试剂
苯、甲苯(均为分析纯) 甲醇(色谱纯) 高纯水
4. 实验步骤
4.1 色谱条件
色谱柱:C18,4.6×150mm,5μm 流动相:甲醇-水(80:20,v/v) 流速:1mL·min-1 检测波长:254nm 柱温:30℃ 进样量:20μL 4.2 操作步骤
? 精密配制含苯、甲苯贮备液;
? 分别精密吸取贮备液制备成混合溶液。按照上述色谱条件操作,进样,
1
记录色谱图。
? 计算各色谱峰的理论塔板数及各峰间分离度。 4.3 实验数据处理
? 记录实验条件,测试各试样后记录苯、甲苯的保留时间、峰宽、半峰宽,
计算出各物质对应的理论塔板数。根据保留时间与峰宽信息,计算相邻物质对间的分离度。
组分 试验号 1 苯 2 平均 1 甲苯 2 平均 tR(min) W(min) W1/2(min) n(塔板·m-1) ? 柱效计算
n?16(tR2t)?5.54(R)2WW12式中:tR为峰值保留时间(min),W1/2为半峰宽(min),W为峰宽(min)
? 分离度计算
K?tR1?tR22(t?t)?R1R2(W1?W2)/2W1?W2式中:tR1和tR2分别为相邻两组分的峰值保留时间(min)
W1和W2分别为相邻两组分色谱峰的峰宽(min)
5. 问题与讨论
5.1 如何用实验方法判别混合液色谱图上苯、甲苯的色谱峰归属? 5.2 如何改变色谱条件,可以减小苯、甲苯的保留时间?
5.3 若实验中的色谱峰无法完全分离,应如何改变实验条件以获得改善?
2
正在阅读:
高效液相色谱柱效能的评价01-19
2019年度高三物理一轮复习限时规范特训:第一章 第1讲 描述运动的基本概念10-20
基层矛盾纠纷有效化解途径11-28
仔猪黄白痢的原因及防治07-25
踢毽子作文350字06-26
【行政事业单位固定资产管理研究】行政事业单位固定资产管理制度05-08
祝福朋友脱单的双十一光棍节祝福语短信100句精选.doc05-01
小学传染病防控管理制度08-24
《计算机组成原理》总结完整版09-27
- exercise2
- 铅锌矿详查地质设计 - 图文
- 厨余垃圾、餐厨垃圾堆肥系统设计方案
- 陈明珠开题报告
- 化工原理精选例题
- 政府形象宣传册营销案例
- 小学一至三年级语文阅读专项练习题
- 2014.民诉 期末考试 复习题
- 巅峰智业 - 做好顶层设计对建设城市的重要意义
- (三起)冀教版三年级英语上册Unit4 Lesson24练习题及答案
- 2017年实心轮胎现状及发展趋势分析(目录)
- 基于GIS的农用地定级技术研究定稿
- 2017-2022年中国医疗保健市场调查与市场前景预测报告(目录) - 图文
- 作业
- OFDM技术仿真(MATLAB代码) - 图文
- Android工程师笔试题及答案
- 生命密码联合密码
- 空间地上权若干法律问题探究
- 江苏学业水平测试《机械基础》模拟试题
- 选课走班实施方案
- 色谱柱
- 液相
- 效能
- 高效
- 评价
- 成都市市政工程规划管理技术规定2008 - 图文
- 必修五第四单元知识点
- 高档公寓交房标准
- 2014奥鹏高起专试油与试采在线作业答案
- 桂阳的历史与文化
- 现代管理学第三套
- 江苏省人才工作领导小组办公室
- 以诈赌方式获取钱财的行为如何定性 doc
- 江苏职业学校培训基地框架结构教学楼及配套服务用房施工组织设计 - 图文
- 市直机关网络舆情管理办法
- 关于大学生创业问卷调查分析报告实践总结
- 流水行船问题“王字”记忆法
- java部分
- TSG特种设备安全技术规范TSGQ7008-2007
- 管理学选择题判断题题库
- 南京工业大学专业 历史 历任院长简介
- 管理学第七次作业 - 图文
- 第四十一课 激进神学
- 初中数学命题原则(最经典)
- 起重机械安全管理人员和作业人员考核大纲