化妆品中7种禁用物质检测方法

附件1：

化妆品中氢化可的松等7种禁用物质的检测方法

（征求意见稿）

1 适用范围

本方法规定了采用液相色谱-串联质谱法测定化妆品中7种禁用物质：米诺地尔（CAS：38304-91-5），氢化可的松（CAS：50-23-7），螺内酯（CAS：52-01-7），雌酮（CAS：53-16-7），坎利酮（CAS：976-71-6），醋酸曲安奈德（CAS：3870-07-3），黄体酮（CAS：57-83-0）的方法。

本方法适用化妆品中禁用物质：米诺地尔，氢化可的松，螺内酯，雌酮，坎利酮，醋酸曲安奈德，黄体酮含量的测定。 2 方法提要

样品经过提取后，用液相色谱-串联质谱法测定，以多反应离子监测模式进行监测，采用特征离子丰度比进行定性，待测化合物峰面积定量，以标准曲线法计算含量。本方法的检出限、定量限和取样品1 g时的检出浓度、定量浓度见表1.

表1 各违禁成分的检出限和检出浓度

化合物 米诺地尔 氢化可的松 螺内酯 雌酮 坎利酮 醋酸曲安奈德

黄体酮

3 试剂和材料

检出限 （ng） 0.5 1 0.5 50 0.5 0.1 0.2

定量限 （ng） 1 2 1 100 1 0.2 0.5

检出浓度 (ng/g) 10 25 25 500 10 5 10

定量浓度 (ng/g) 25 50 50 1000 25 10 25

1

除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为去离子水。 3.1 乙腈，色谱纯。 3.2 甲醇，色谱纯。

3.3 乙腈溶液[φ（乙腈）= 90%]：量取10 mL水于100 mL量瓶中，加乙腈（3.1）稀释至刻度，混匀。

3.4 混合标准储备溶液[?（待测成分）= 1 mg/mL]： 精密称取米诺地尔，氢化可的松，螺内酯，雌酮，坎利酮，醋酸曲安奈德，黄体酮标准品10 mg（精确到0.01 mg）置于同一10 mL量瓶中，加甲醇（3.2）使溶解并定容至刻度，摇匀，即得质量浓度为1 mg/mL的混合标准储备溶液。

3.5 系列浓度标准溶液：用90%乙腈（3.4）稀释混合标准储备溶液，精密配制得质量浓度为10，20，50，100，200，500，1000，1500 ng/mL的系列浓度标准溶液。 4 仪器

4.1 液相色谱-三重四极杆质谱联用仪。 4.2 分析天平：感量0.001 g。 4.3 超声波清洗仪。 4.4 离心机 4.5 涡旋混合仪 5 测定步骤 5.1 样品处理

准确称取样品约1.0 g（精确至1 mg），置于10 mL比色管中，加入1mL饱和氯化钠溶液，涡旋30s后加入乙腈，定容至刻度，涡旋30 s，超声提取30 min，涡旋1 min，4500 rpm离心5 min，取上清液经0.45 μm微孔滤膜过滤后，滤液作

2

为待测液备用。

5.2 液相色谱-三重四极杆质谱联用分析条件 5.2.1 色谱条件

色谱柱： Waters Symmetry C18 (3.5 μm, 2.1*150mm)或同等柱效色谱柱； 流动相：溶液A：0.2%甲酸水，溶液B：甲醇（含0.2%甲酸），梯度程序见表2

表2 流动相的梯度程序

时间（min）

0 2 4 11 18

流速：0.3 mL/min； 柱温：30 ℃； 进样量：5 μL。 5.2.2 质谱参考条件

离子源： 电喷雾离子源（ESI源）；

监测模式： 正离子监测模式； 监测离子对及相关电压参数设定见表3 喷雾压力： 40 psi； 干燥气流速： 8 L/min； 干燥气温度： 325 ℃； 毛细管电压： 4000 V；

0 – 3.5 min：不进入质谱仪分析, 3.5 – 18 min：进入质谱仪分析。

3

溶液A（%）

95 75 45 20 10

溶液B（%）

5 25 55 80 90

表3 三重四极杆离子对及相关电压参数设定表

编号 1 2 3 4 5 6 7

*：定量离子对 5.3 定性判定

用液相色谱-串联质谱法对样品进行定性判定，在相同试验条件下，样品中被测禁用物质的质量色谱峰保留时间与标准溶液中对应物质的质量色谱峰保留时间一致；样品色谱图中所选择的监测离子对的相对丰度比与相当浓度标准溶液的离子相对丰度比的偏差不超过表4规定范围，则可以判断样品中存在对应的禁用物质。

表4 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差

相对离子丰度（k） 允许的最大偏差 5.4 定量测定

在“5.2”项液相色谱-三重四极杆质谱联用分析条件下，用系列浓度标准溶液

4

物质名称 米诺地尔

氢化可的松

螺内酯

雌酮 坎利酮

醋酸曲安奈德

黄体酮

母离子（m/z） 210．0

363.1 341.1 271.2 341.1 477.1 315.2

Frag.(V) 110 110 125 125 147 165 105 105 147 165 100 100 140 140

子离子（m/z） 193.2 164.1* 327 121* 107.1* 90.9 253.1* 132.8 107.1* 90.9 457.2* 439.1 109 97*

CE（V）

10 25 10 25 35 65 5 22 35 65 5 10 25 23

k≥50% ±20% 50 %> k ≥ 20 % 20 %> k ≥ 10 % ±25% ±30% k≤ 10 % ±50%

（3.6）分别进样，以禁用物质的系列浓度为横坐标，禁用物质的峰面积为纵坐标，进行线性回归，建立溶液标准曲线，其线性相关系数应 大于0.99。取“5.1”项下处理得到的待测溶液进样5 μL，禁用物质的峰面积比代入溶液标准曲线，计算禁用物质的质量浓度，按“6 项计算”，计算样品中禁用物质的质量分数。 5.5 平行实验

按以上步骤操作，对同一样品独立进行测定获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。 6 计算

D? V

w（违禁成分）= ——————

m×10 3

式中：w（违禁成分）——化妆品中禁用物质的质量分数，μg /g；

m ——样品取样量，g；

? ——代入回归方程计算得到的待测样液中禁用物质的质量浓度，ng/mL； V——定容体积，mL；

D —— 稀释倍数（不稀释则为1）。 7 回收率和精密度

多家实验室验证的平均方法回收率为90.4%~113.0%，相对标准偏差小于8.6%。 8 色谱图

5

1234567

7种禁用物质混合标准溶液的HPLC-MS/MS色谱图

色谱峰：1：米诺地尔（TR=6.7 min），2氢化可的松（TR=10.8 min），3螺内酯（TR=12.5 min），4雌酮（TR=12.7 min），5坎利酮（TR=13.1 min），6醋酸曲安奈德（TR=13.7 min），7黄体酮（TR=15.1 min）

6

化妆品中氢化可的松等7种禁用物质的检测方法编制

说明

第一部分 基本信息

1 简介

米诺地尔、氢化可的松、螺内酯、雌酮、坎利酮、醋酸曲安奈德、黄体酮具有促进发毛增长作用。除此以外6种激素还具有抗皱、祛痘等作用。《化妆品卫生规范》2007年版中规定米诺地尔和甾体结构的激素类化合物为禁用物质，这7种禁用物质是易于添加至育发和抗皱、祛痘类化妆品中的禁用物质。 2 属性信息 2.1米诺地尔

2.1.1 中文名：米诺地尔 2.1.2 英文名称：Minoxidil 2.1.3 分子式：C9H15N5O 2.1.4 分子量：209.25 2.1.5 CAS号：38304-91-5 2.1.6 结构式：

2.1.7 理化特性

本品为白色或类白色结晶性粉末，无臭。在冰醋酸中溶

解，在乙醇中略溶，在氯仿或水中微溶，在丙酮中极微溶解。熔点270~273℃（分解）。

2. 2氢化可的松

2.2.1 中文名：氢化可的松 2.2.2 英文名称：Hydrocortisone 2.2.3分子式：C21H30O5

7

2.2.4 分子量：362.46 2.2.5 CAS号：50-23-7 2.2.6结构式：

2.2.7 理化特性

白色或类白色结晶性粉末，无臭，味苦。遇光变质。熔点214-220℃(分解)。

本品不溶于水，难溶于乙醚，微溶于氯仿，溶于丙酮、乙醇。可溶于浓硫酸液并呈绿色荧光。 2.3 螺内酯

2.3.1中文名：螺内酯

2.3.2 英文名称：Spironolactone 2.3.3分子式：C24H32O4S 2.3.4分子量：416.57 2.3.5 CAS号：52-01-7 2.3.6 结构式：

2.3.7 理化特性

有轻微硫醇臭，在氯仿中极易溶解，在苯或醋酸乙酯中易溶，在乙醇

中溶解，在水中不溶。本品的熔点为203～209℃，熔融时同时分解。 2. 4 雌酮

2.4.1中文名：雌酮 2.4.2 英文名称：Estrone 2.4.3 分子式：C18H22O2 2.4.4分子量：270.37 2.4.5 CAS号：53-16-7

8

2.4.6 结构式：

2.4.7理化性质

本品为白色板状结晶或结晶性粉末，在空气中稳定。几乎不溶于水，溶于

二氧六环、吡啶和氢氧化碱溶液，微溶于乙醇(1：400)、丙酮、苯、氯仿、乙醚和植物油。动物实验证明，有潜在致癌作用。熔点 258-260 °C。 2.5 坎利酮

2.5.1中文名：坎利酮 2.5.2 英文名称：Canrenone 2.5.3 分子式：C22H28O3 2.5.4 分子量：340.46 2.5.5 CAS号：976-71-6 2.5.6结构式：

2.5.7理化特性

微黄色或乳白色结晶性粉末（乙酸乙酯）。熔点149-151℃，165℃固化并

重熔。

2. 6 醋酸曲安奈德

2.6.1中文名：醋酸曲安奈德

2.6.2 英文名称：Triamcinolone acetonide acetate 2.6.3 分子式：C26H33FO7 2.6.4 分子量：476.534 2.6.5 CAS号：3870-07-3 2.6.6 结构

式：

9

2.6.7 理化特性

本品为白色或类白色的结晶性粉末；无臭。本品在三氯甲烷中溶解，

在丙酮中略溶，在甲醇或乙醇中微溶，在水中不溶。 2. 7 黄体酮

2.7.1中文名：黄体酮 2.7.2 英文名称：Progesterone 2.7.3 分子式：C21H30O2 2.7.4 分子量：314.47

2.7.5 CAS号：57-83-0 2.7.6结构式：

2.7.7 理化性质

本品为白色粉末状固体，熔点 128-132 °。水溶解性 <0.1 g/100 mL（19℃）。 2.8 禁用标准

2007版《化妆品卫生规范》禁止在化妆品中添加使用这7种物质，为禁用物质。

10

第二部分 方法选择与优化

1 分析方法及其条件的选择与优化

根据文献报道，该7种禁用物质适于采用高效液相色谱-串联质谱法分离与检测。2007版《化妆品卫生规范》中规定了―化妆品中雌三醇等7种性激素‖的检测方法。本方法的建立参考了《化妆品卫生规范》中有关性激素的检测方法和相关文献报道方法，本方法的具有更好的检测灵敏度，对复杂基质中禁用物质阳性结果的的判定依据更充分和准确。 1.1 提取方法的选择

化妆品基质复杂，按样品物理状态分可以有液体，半流体，固体三大类。本研究根据易于添加这7种禁用物质化妆品为育发、祛痘和抗皱产品，因此主要针对液体，半流体状化妆品。由于此类化妆品乳化现象明显，在前处理步骤中添加等量的饱和氯化钠溶液减少乳化。另外甲醇和乙腈对这7种禁用物质均有良好的提取效率，通过实际样品处理发现，甲醇提取后的样品乳化现象较乙腈明显，为了保证定容的简便和准确，本研究采用乙腈作为提取溶剂。 1.2 液相色谱条件的建立

文献调研表明这7种禁用物质常用缓冲溶液添加一定比例的有机溶剂作为流动相。而甲醇作为有机相对待测化合物分离效果明显好于乙腈，所以实验选择甲醇作为有机相。考虑到加入适量的酸可以提供质谱的离子化效果，最后选择甲醇（含0.2%甲酸）体系作为流动相。由于液质联用，质谱具有第二次分离的能力，色谱条件不需要达到7种禁用物质完全基线分离，这样节省了分析样品的时间，提高了分析效率。 1.3 质谱条件的建立

为了获得最好的质谱条件，针对每个化合物，分别进样，进行质谱条件优化。

11

主要选择参数有：气流，源温，电压，以及定性和定量离子对的选择等。

12

第三部分 验证

1 实验室内验证 1.1 方法特异性

空白溶剂（乙腈）和经过处理的空白化妆品样品、空白化妆品样品加对照品以及阳性化妆品样品，在选定的分析条件下注入液质联用仪进行分析，分析图谱见图1-图4，结果表明化妆品基质对7种待测化合物测定无干扰，说明所建方法适用于7种待测化合物的测定。

定量离子对

1234567 图1 空白溶剂HPLC-MS/MS色谱图（峰编号：1：米诺地尔，2氢化可的松，3螺内酯，4雌酮，5坎利酮，6醋酸曲安奈德，7黄体酮）

定性离子对

13

1234567 图1 （续）

定

量

离

子

1对

234567 图2空白样品A的HPLC-MS/MS色谱图（峰编号：1：米诺地尔，2氢化可的松，3螺内酯，4雌酮，5坎利酮，6醋酸曲安奈德，7黄体酮）

定性离子对

14

1234567 图2 (续) 定量离子对

1234567 图3 空白样品A加混合对照品溶液的HPLC-MS/MS色谱图（峰编号：1：米诺地尔，2氢化可的松，3螺内酯，4雌酮，5坎利酮，6醋酸曲安奈德，7黄体酮）

定性离子对

15

1234567 图3 （续）

定量离子对

1234567 图4 阳性样品HPLC-MS/MS色谱图（峰编号：1：米诺地尔品，2氢化可的松，3螺内酯，4雌酮，5坎利酮，6醋酸曲安奈德，7黄体酮）

定性离子对

16

1234567 图4 （续） 1.2 线性及线性范围 1.2.1溶液标准曲线的配制

将7种禁用物质对照品配制成1 g/L的混合标准储备液，再稀释成10，20，50，100，200，500，1000，1500 ng/mL的系列浓度混合对照品标准溶液，经0.45 μm微孔滤膜过滤后，得系列标准工作溶液

移取5 μL系列标准溶液，注入高效液相色谱-串联质谱联用仪中进行测定，以峰面积对目标化合物的浓度制作标准曲线。 1.2.2 基质标准曲线的配制

将7种禁用物质对照品配制成1 g/L的标准储备液，再分别加入空白样品中，空白样品每份为1g，加入相应的标液量，经过前处理后，得浓度为0.1，0.2，0.5，1，2，5，10，15 μg/mL的系列基质标准工作溶液。

移取5 μL系列基质标准工作溶液，注入高效液相色谱-串联质谱联用仪中进行测定，以峰面积对目标化合物的浓度制作标准曲线。 1.2.3标准曲线和线性范围

17

在设定的分析条件下，测定系列浓度的混合对照品标准溶液和两种空白化妆品基质标准溶液，以待测化合物的浓度（C）为横坐标，以待测化合物的峰面积（Y）为纵坐标，进行线性回归和标准曲线的绘制。测定的回归方程、相关系数、线性范围见表1-2。

表1 溶液标准曲线的回归方程、相关系数及线性范围

化合物 米诺地尔 氢化可的松 螺内酯 雌酮 坎利酮 醋酸曲安奈德

黄体酮

回归方程 Y=279.8097x+592.9543 Y=43.0701x+66.4987 Y=66.5807x+146.5370 Y=55.4775x+99.3666 Y=116.2751x+237.6620 Y=149.5623x+292.6211 Y=260.9797x+393.9815

相关系数r 0.9995 0.9998 0.9997 0.9999 1.0000 0.9998 0.9999

线性范围 10~1500ng/mL 10~1500ng/mL 10~1500ng/mL 10~1500ng/mL 10~1500ng/mL 10~1500ng/mL 10~1500ng/mL

表2 空白样品标准曲线的回归方程、相关系数及线性范围

空白样品A

化合物

回归方程

米诺地尔 氢化可的松 螺内酯 雌酮 坎利酮 醋酸曲安奈德

黄体酮

Y=259.7031x-103.7321 Y=46.9925x+98.6579 Y=67.5324x+8.0041 Y=55.3177x+39.1988 Y=120.1576x-36.0510 Y=156.3006x+50.2798 Y=286.4736x+228.6359

r 0.9992 0.9989 0.9996 0.9997 0.9994 0.9996 0.9994

回归方程 Y=267.9463x+810.1858 Y=44.2867x+114.5602 Y=68.0233x+299.2467 Y=60.8372x+329.9762 Y=125.6104x+763.6544 Y=164.0432x+1098.9391 Y=291.7662x+1925.6788

r 0.9988 0.9989 0.9974 0.9979 0.9981 0.9952 0.9951

0.1~15μg/g 0.1~15μg/g 0.1~15μg/g 0.1~15μg/g 0.1~15μg/g 0.1~15μg/g 0.1~15μg/g

空白样品B

线性范围

1.3 检出限和定量下限

稀释并检测7种禁用物质标准溶液，测定峰高信噪比为10:1时7种禁用物质的浓度确定为本方法的定量下限；测定峰高信噪比为3:1时7种禁用物质的浓度确定为本方法的检出限，结果见表3所示。

18

1.4 检出浓度和最低定量浓度

向不含7种禁用物质的空白样品中定量添加7种禁用物质标准溶液，按前处理方法处理后，测定峰高信噪比为10:1时添加的7种禁用物质量确定为方法的最低定量浓度；测定峰高信噪比为3:1时添加的7种禁用物质量确定为本方法的检出浓度，结果见表3所示。

表3 7种禁用物质的检出限、定量限、检出浓度、定量浓度 化合物

检出限 （ng）

米诺地尔 氢化可的松 螺内酯 雌酮 坎利酮 醋酸曲安奈德

黄体酮

0.2 1 1 5 1 0.2 0.5

定量限 （ng） 0.5 2 2 10 2 0.5 1

检出浓度 (ng/g) 2 10 10 50 10 2 5

定量浓度 (ng/g) 5 20 20 100 20 5 10

1.5 基质效应

两种空白化妆品（空白样品A和空白样品B）的基质效应测定结果见表4-5。从数据中可以看出，7种禁用物质的基质效应并不十分明显。

表4空白样品A的基质效应测定结果表

分析物

浓度

峰面积(×104)

绝对

19

(ng/mL) Set 1(n=6) Mean±SD

RSD(%) 0.9 0.7 2.0 1.1 2.0 1.8 0.7 2.2 2.0 1.8 5.0 6.5 7.0 7.3

Set 2(n=6) Mean±SD 4.94±0.15 24.3±0.3 0.775±0.014 3.82±0.03 1.17±0.02 5.96±0.11 0.992±0.024 4.94±0.07 2.10±0.04 10.74±0.11 2.92±0.06 14.7±0.2 4.83±0.45 24.4±0.1

RSD(%) 3.0 1.3 1.8 0.9 1.6 1.9 2.4 1.5 2.0 1.0 2.0 1.2 0.9 0.6

基质效应(%) 101.5 102.3 98.4 96.7 94.8 95.9 92.2 90.6 93.7 95.1 98.5 98.7 92.5 91.0

米诺地尔 200 999

4.86±0.04 23.8±0.2 0.787±0.012 3.95±0.04 1.23±0.02 6.22±0.11 1.08±0.01 5.45±0.12 2.24±0.03 11.3±0.2 2.96±0.15 14.9±1.0 5.22±3.86 26.8±1.97

氢化可的松 199 994

螺内酯 200 1000

雌酮 198 991

坎利酮 200 1000

醋酸曲安奈德 195 975

黄体酮 199 995

表5空白样品B的基质效应测定结果表 浓度 (ng/mL) 200 999

氢化可的松

199 994

螺内酯

200 1000

Set 1(n=6) Mean±SD

米诺地尔

4.86±0.04 23.8±0.2 0.787±0.012 3.95±0.04 1.23±0.02 6.22±0.11

RSD(%) 0.9 0.7 2.0 1.1 2.0 1.8

峰面积(×10)

Set 2(n=6) Mean±SD 5.74±0.11 27.5±0.9 0.807±0.015 3.98±0.06 1.33±0.02 6.42±0.09

RSD(%) 1.9 3.2 1.8 1.6 1.8 1.3

118.0 115.4 102.4 100.8 108.4 103.2

2

分析物

绝对基质效应(%)

20

雌酮 198 991

1.08±0.01 5.45±0.12 2.24±0.03 11.3±0.2 2.96±0.15 14.9±1.0 5.22±3.86 26.8±1.97

0.7 2.2 2.0 1.8 5.0 6.5 7.0 7.3

1.11±0.01 5.72±0.09 2.36±0.02 11.4±0.2 3.21±0.06 16.1±0.2 6.03±0.06 29.2±0.5

1.3 1.5 1.0 1.5 1.8 1.4 1.0 1.6

103.5 105.0 105.2 100.9 108.4 108.4 115.5 108.9

坎利酮 200 1000

醋酸曲安奈德 195 975

黄体酮 199 995

1.6 精密度

对制备的两个浓度的精密度样品分别连续进样6次进行HPLC-MS/MS分析，测得的峰面积代入随行的溶液标准曲线，计算检出的浓度以及RSD和准确度，结果见表6-7。

表6 空白样品A中7种待测物质的精密度（n=6）

化合物

浓度（μg/g）

2.00 9.99 1.99 9.94 2.00 10.0 1.98 9.91 2.00 10.0 1.95

检出浓度（μg/g）

2.06±0.03 9.76±0.19 1.94±0.04 9.18±0.13 1.86±0.03 9.76±0.03 1.93±0.03 9.65±0.10 1.80±0.04 9.16±0.06 1.83±0.03

21

RSD（%） 1.3 2.0 1.9 1.32 1.6 0.3 1.7 1.0 2.4 0.6 1.7

准确度（%）

103 97.6 97.5 97.8 93.1 97.6 97.4 97.4 90.1 91.6 93.6

米诺地尔

氢化可的松

螺内酯

雌酮

坎利酮 醋酸曲安奈德

9.75

黄体酮

1.99 9.95

9.41±0.08 1.97±0.01 9.72±0.03

0.9 0.6 0.4

96.5 99.1 97.7

表7空白样品B中7种待测物质的精密度（n=6）

化合物 米诺地尔

浓度（μg/g）

2.00 9.99

氢化可的松

1.99 9.94

螺内酯

2.00 10.0

雌酮

1.98 9.91

坎利酮

2.00 10.0

醋酸曲安奈德

1.95 9.75

黄体酮

1.99 9.95

检出浓度（μg/g）

2.30±0.03 10.9±0.1 2.17±0.04 10.8±0.2 21.2±0.04 10.6±0.2 2.05±0.01 10.7±0.1 2.08±0.02 10.6±0.4 2.15±0.03 10.7±0.2 2.10±0.03 10.8±0.1

RSD（%） 1.1 1.3 1.8 1.8 2.0 2.0 0.4 1.3 0.7 3.5 1.5 1.5 1.4 0.8

准确度（%）

115.0 108.8 109.1 108.7 105.8 106.2 103.5 108.8 103.8 106.5 110.0 110.2 105.6 108.3

1.7回收率

对制备的回收率样品进行HPLC-MS/MS分析，测得的峰面积分别代入随行的溶液标准曲线和基质标准曲线，计算测得浓度，然后除以理论加入浓度，获得方法的回收率。两种不同基质化妆品的回收率数据见表8和表9。可以看出，采用溶液标准曲线和基质标准曲线计算回收率均能满足要求。

。

表8 空白样品A加标样品代入不同标准曲线所得回收率

中浓度（2 μg/g）

化合物

标曲类型

回收率a(%)

RSD(%)

高浓度（10 μg/g） 回收率a(%)

RSD(%)

22

米诺地尔 溶液 基质A

110.2±3.8 107.6±3.7 116.0±2.9 102.3±2.6 97.0±2.8 98.2±2.8 98.3±3.1 100.5±3.2 102.0±2.9 94.3±2.6 103.3±4.8 98.5±4.5 109.5±3.8 104.3±3.6

3.5 3.5 2.5 2.5 2.9 2.9 3.2 3.2 2.8 2.8 4.6 4.6 3.5 3.4

101.1±2.5 98.1±2.5 111.1±2.9 98.2±2.5 97.0±2.9 97.3±2.9 96.4±2.7 97.9±2.8 101.0±2.5 91.8±2.3 102.7±3.0 97.0±2.9 104.2±3.2 98.3±3.2

2.5 2.5 2.6 2.6 3.0 3.0 2.8 2.8 2.5 2.5 3.0 3.0 3.2 3.2

氢化可的松 溶液 基质A

螺内酯 溶液 基质A

雌酮 溶液 基质A

坎利酮 溶液 基质A

醋酸曲安奈德 溶液 基质A

黄体酮 溶液 基质A

a: 平均回收率±标准偏差

表9 空白样品B加标样品代入不同标准曲线所得回收率

中浓度（2 μg/g）

化合物

标曲类型

回收率a(%)

溶液

米诺地尔

基质B 溶液

氢化可的松

基质B 溶液

螺内酯

基质B

雌酮

溶液

104.1±2.3 107.7±1.5

2.2 1.4

106.9±1.4 110.0±0.9

1.3 0.8

107.0±2.7 111.2±2.4

2.5 2.2

108.4±1.1 114.0±1.5

1.0 1.3

111.1±2.5 111.2±2.7

2.2 2.5

107.5±1.7 112.0±1.1

1.5 1.0

124.6±2.7

RSD(%) 2.2

回收率a(%) 119.5±1.8

RSD(%) 1.5

高浓度（10 μg/g）

23

基质B 溶液

坎利酮

基质B 溶液

醋酸曲安奈德

基质B 溶液

黄体酮

基质B

103.8±1.5 111.3±4.1 104.1±3.8 111.7±2.9 107.0±2.8 109.3±1.3 105.3±1.3

1.4 3.4 3.7 2.6 2.6 1.2 1.2

107.0±0.8 112.8±2.6 105.8±2.4 114.2±2.3 110.0±2.2 111.6±1.2 108.0±1.2

0.8 2.3 2.3 2.0 2.0 1.1 1.1

a: 平均回收率±标准偏差

1.8 稳定性 1.8.1 日内稳定性

分别在0h、2h、4h、6h, 8h,12h和24h测定制备的两浓度日内稳定性样品，测得的峰面积代入随行的溶液标准曲线，计算检出浓度以及RSD和准确度，结果见表10-11，表明样品处理后室温放置24h是稳定的。

表10空白样品A中7种待测物质的日内稳定性（n=7）

化合物

浓度（μg/g）

2.00 9.99 1.99 9.94 2.00 10.0 1.98 9.91 2.00 10.0 1.95 9.75 1.99 9.95

检出浓度（μg/g）

2.10±0.02 10.4±0.1 1.99±0.02 9.80±0.17 1.78±0.03 9.20±0.13 1.93±0.06 9.81±0.10 1.80±0.08 9.44±0.37 1.81±0.03 9.47±0.25 1.77±0.05 9.27±0.20

RSD（%） 1.0 0.9 1.0 1.7 1.5 1.4 3.2 1.1 4.5 4.0 1.7 2.7 2.5 2.2

准确度（%）

104.9 103.7 102.1 101.5 89.8 92.8 97.2 98.7 89.8 94.4 90.8 95.2 88.5 92.7

米诺地尔

氢化可的松

螺内酯

雌酮

坎利酮

醋酸曲安奈德

黄体酮

24

表11 空白样品B中7种待测物质的日内稳定性（n=7）

化合物

浓度（μg/g）

2.00 9.99 1.99 9.94 2.00 10.0 1.98 9.91 2.00 10.0 1.95 9.75 1.99 9.95

检出浓度（μg/g）

2.16±0.03 10.1±0.1 2.02±0.05 9.40±0.15 2.07±0.04 9.67±0.17 1.96±0.05 9.31±0.25 2.00±0.07 9.43±0.26 1.94±0.06 9.22±0.49 1.99±0.11 9.45±0.54

RSD（%） 1.3 0.6 2.4 2.4 1.7 1.8 2.4 2.7 3.3 2.8 3.0 5.3 5.5 5.7

准确度（%）

108.1 101.0 101.5 101.5 103.5 96.7 98.9 94.0 100.2 94.3 99.7 94.6 100.0 95.0

米诺地尔

氢化可的松

螺内酯

雌酮

坎利酮

醋酸曲安奈德

黄体酮

1.8.2 日间稳定性

连续6天分别测定制备的两浓度日间稳定性样品，测得的峰面积代入随行的溶液标准曲线，计算检出浓度以及RSD和准确度，结果见表12-13，结果表明样品在4℃冰箱放置6天是稳定的。

表12 空白样品A中7种待测物质的日间稳定性（n=6）

化合物

浓度（μg/g）

2.00 9.99 1.99 9.94 2.00

检出浓度（μg/g）

2.08±0.05 10.4±0.3 2.08±0.07 10.4±0.3 1.95±0.15

25

RSD（%） 2.6 2.4 3.1 2.7 7.7

准确度（%）

104.0 104.6 104.6 104.8 97.7

米诺地尔

氢化可的松 螺内酯

本文来源：https://www.bwwdw.com/article/7bih.html