菌种的衰退、复壮和保藏

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第八节 菌种的衰退、复壮和保藏

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性状稳定的菌种是微生物学工作最重要的基本 要求，否则生产或科研都无法正常进行。

影响微生物菌种稳定性的因素：a)变异； b)污染；

c)死亡.

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一、菌种的衰退(degenration)1. 衰退的表现1)原有形态形状变得不典型； 2)生长速度变慢； 3)代谢产物生产能力下降； 4)致病菌对宿主侵袭力下降； 5)对外界不良环境的抵抗力下降。

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2. 衰退的原因1)根本原因在于基因自发突变； 2)传代次数的影响，使负突变株的比例逐渐占 了优势； 3)与培养条件有关。

衰退是发生在微生物细胞群体中的一 个由量变到质变的逐步演变的过程。

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二、衰退的防止与复壮(一)防止衰退的措施1. 减少传代次数； 2. 创造良好的培养条件；

p228

3. 利用不易衰退的细胞传代

4. 采用有效的菌种保藏方法；

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(二)菌种的复壮(rejuvenation)1. 从衰退的菌种群体中把少数个体再找出来，重新获得具有 原有典型性状的菌种(狭义复壮，消极措施)。 a)纯种分离;

b)通过寄主体进行复壮； 2. 有意识地利用微生物会发生自发突变的特性，在日常的菌种 维护工作中不断筛选“正变”个体(广义复壮，积极措施) 。

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纯种的分离方法平板划线分离法 平板涂布分离法 平板倾注分离法 用“分离小室”进行单细胞分离 显微操纵器进行单细胞分离 菌丝尖端切割法进行单细胞分离

菌落纯

细胞纯

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三、菌种保藏

基本要求：在一定时间内使菌种不死、不变、不乱培养基传代培养 生活态 寄主传代培养 冷冻液氮、低温冰箱 斜面、平板

基本方法：休眠态

干燥

沙土管、冷冻真空干燥

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1. 原理人为地创造有利于微生物长期休眠的条件，主要是 低温、干燥、缺氧。

2. 保藏方法7种常用方法 (p244表7-13) (1)斜面冰箱保藏法 (2)半固体冰箱保藏法 (3)石蜡油封藏法 (4)甘油悬液保藏法 (5)沙土管保藏法 (6)冷冻干燥保藏法 (7)液氮保藏法

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ATCC采用的菌种保藏法：( American Type Culture Collection ,美国典型菌种保藏中 心)

冷冻干燥保藏法 液氮保藏法 CCCCM采用的菌种保藏法：( China Committee for Culture Collections of Microorganism,中国微生物菌种保藏委员会)

斜面传代法 冷冻干燥保藏法 液氮保藏法

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由于微生物的多样性，不同的微生物往往对不同的保藏方法有不同的适应性，迄今为止尚没有一种

方法能被证明对所有的微生物均适宜。因此，在具体选择保藏方法时必须对被保藏菌株的特性、保藏

物的使用特点及现有条件等进行综合考虑。对于一些比较重要的微生物菌株，则要尽可能多的采用各

种不同的手段进行保藏，以免因某

种方法的失败而导致菌种的丧失。

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本章重点一、了解证明核酸是遗传变异物质基础的3个经典实验 比较：基因型与表型，变异与饰变 质粒的概念，特点及主要类型。

二、基因突变和诱变育种 1. 基因突变的类型 2. 基因突变的规律 3. 了解常用诱变剂及其诱变机制 4. 艾姆氏法检测致癌剂的理论依据、方法和优点

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5. 了解诱变育种的主要环节及常用的初筛方法； 掌握UV诱变育种的操作程序及注意事项。 6. 筛选营养缺陷型突变株的主要步骤和方法， 淘汰野生型的方法 7. 抗生素高产突变株及抗性突变株的筛选方法。8. 名词：

营养缺陷型，野生型，原养型，基本培养基， 完全培养基，补充培养基，点突变，转换， 颠换，移码突变，染色体畸变，光复活作用

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三、基因重组与杂交育种 1. 了解原核生物和真核微生物基因重组的方式。 名词概念： 转化，转染，转导，普遍转导，局限转导， 低频转导，高频转导，双重溶源菌，接合，性导， Hfr菌株， 溶源转变。 比较： 转化与转染，转导与性导，转导与溶源转变， 普遍转导与局限转导，LFT与HFT 有性生殖与准性生殖， 转化、转导、接合和原生质体融合

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2. E. coli F+、F-、Hfr和F’菌株的异同及相互间关系。 3. 原生质体融合的基本操作及优点。 4. 酿酒酵母有性杂交的育种程序。四、基因工程 名词，基本操作 五、菌种的衰退、复壮与保藏 1. 菌种衰退的表现、原因与防止措施。 2. 菌种保藏的原理与常用的保藏方法。ATCC 和 CCCCM采用的菌种保藏法。

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第九章 微生物的生态

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生态学：研究生物及其环境条件间相互作用规律的科学 。 根据生态学的研究对象和采用的研究方法不同, 生态学的 分类不同。

微生物生态学：在一定意义上也可以称为环境微生物学，是研究微生物 群体与其环境系统之间相互作用及其功能表达规律的科学 。

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微生物生态学研究的主要三个目的： ①阐明自然界中微生物的生物多样性和微生物群落中不 同群体之间相互作用的关系； ②测定自然界中微生物的活动并监测它们对生态系统的 影响； ③充分挖掘特殊生态环境中有益微生物，使其更好地为 人类服务。

微生物生态系统： 微生物与其周围的环境(包括动植物)组成的具有一定 结构和功能的开放系统。在自然界的任何生境中，微生物之 间、微生物与其它生物之间、微生物与环境之间彼此影响、 相互依存构成一个稳定的系统关系 。

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本章内容第一节 第二节 第三节 第四节 第五节 第六节 第七节 第八节 自然界中的微生物 微生物生态学的研究方法 微生物活性的测定方法 微生物在自然界物质循环中的作用 微生物之间的关系

微生物与环境治理 瘤胃微生物生态系统 产甲烷作用和互养共栖

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第一节

自然界中的微生物

一、 土壤中的微生物土壤是微生物生长繁殖的天然培养基 ，是人类最丰富的

“菌种资源库”。不同类型的土壤、同一类型土壤的不同深度或不同水平 位置，微生物种类和数量变化很大。

由于表土层土壤比较干燥，且接受大量紫外线照射，所 以微生物主要分布在营养条件良好、氧气含量比较丰富的浅 土层

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每克耕作层土壤含菌量十倍递减

细菌(~108)>放线菌(~107,孢子) >霉菌(~106,孢子) >酵母菌(~105) >藻类(~104)

>原生动物(~103)

本文来源：https://www.bwwdw.com/article/75tj.html