实验室生物安全水平标准

实验室生物安全水平标准

本章总结了传染性微生物和实验动物操作生物安全水平的基本要素。此分 级系统根据对实验人员、环境和社区所提供的保护程度按升序的方式划分。 BSL-1级适用于特性比较清楚、通常对健康成人不致病并且对实验室人员及环境潜

在危害性小的病原体。实验室并不一定要与大楼里的公共通道分开，操作通常在开放的

台面上进行，并遵循标准微生物学操作规程。特殊的防扩散装备或实验设施设计既非必

要，也非常规应用。实验室人员应参加过实验室操作培训，并且由在微生物学或相关学

科方面训练有素的科研管理人员对实验室工作进行监督。

以下标准和特殊操作规程、安全设备和设施适用于BSL-l级病原体。 第一节 生物安全1级(BSL-1) 二、标准微生物学操作规程

1．正在处理培养物或标本时，由实验室主管限制或控制外来人员进入实验室。 2．实验人员在处理完生物活性物质、脱下手套、离开实验室之前必须洗手。 3．工作区内不得进食、喝水、抽烟、处理隐形眼镜、使用化妆品以及贮存供人食用的

食物。带隐形眼镜的实验人员仍需配戴护目镜或面罩。食物应贮存于工作区外的专

用橱柜或冰箱内。

4，禁止使用口吸移液技术，应使用机械移液装置。

5．制定使用锐利器具如注射器针头、手术刀片等的安全保护方案。 6．仔细进行每一步操作，以减少飞溅物或气溶胶的产生。

7．工作台面应至少每天消毒一次，发生生物活性物质泼撒时应及时消毒。 8．所有培养物、贮存物及其他废物在排放前应先经过可靠的消毒，如高压灭菌处理。

需在实验室外邻近处进行消毒处理的物品，必须存放于结实耐用、防扩散的容器中，

从实验室运出时应密闭，并依据当地政府的相关规定进行安全包装后，才能从实验

室移出。

9．有传染性病原体时，应在实验室入口贴上生物危害的标志。标志上要包括所使用的

病原体名称以及研究者的姓名和联系电话。 10．昆虫和啮齿类动物管理方案参考其他规定。 三、特殊操作规程 无。

四、安全设备(初级屏障)

1，特殊的防扩散装置或设备，如生物安全橱，通常不需用于BSL-1级病原体的操作 中。

2．建议穿长实验服、外套或其他工作服以防止污染或开脏便服。

3．假如皮肤有伤口或有皮疹必须带手套。要备有替换的带滑石粉的乳胶手套。 4．在进行可能产生微生物或其他有害飞溅物的操作时，必须戴护目镜。 五、实验设施(二级屏障) 1．必须控制进入实验室的人员。 2．每个实验室必须有洗手池。

3. 实验室应易于清洗，不宜应用地毯和垫子。

4．工作台面应防水、耐热，且能耐受有机溶剂、酸、碱以及消毒工作台面和设备的化 学物质的腐蚀。

5．实验室家具应能盛放所需的器材和用物。凳子、柜子及设备间应留足空间以便于清 洁，

6．假如实验室有面向外部的窗户，应安装防蚊纱窗 第二节 生物安全2级(BSL-2) 一、概 述

BSL-2级与BSL-1级水平相似，适用于对实验人员和环境具有中等潜在危险的病

原体进行操作。它与BSL-1的不同点在于：

(1)实验人员受过处理病原体的特定训练．并且有经验丰富的专家指导； (2)正在进行实验时应限制人员进入；

(3)某些可能产生传染性气溶胶或飞溅物的操作，必须在牛物安伞橱或其他物理

防

扩散设备中进行。

以下的标准和特殊操作规程、安全设备和设施适用于BSI-2级病原体。 二、标准微生物操作规程

1．正在进行实验时，由实验室主管限制人员进入。

2．实验人员处理完牛物活性物质、脱下手套、离开实验室之前要洗手。 3．不得在工作区内进食、喝水、抽烟、处理隐形眼镜、使用化妆品。食物应贮存于上

作区外的专用橱柜或冰箱内。

4．禁止使用口吸移液技术，应使用机械移液装置。

5．制定安全使用和处理锐利器具如注射器针头，手术刀片等的方案。 6. 仔细进行每一步操作，以减少飞溅物或气溶胶的产牛。

7．工作台面在每天工作结束前至少应消毒一次，发生生物活性物质泼撒时应及时消毒。

8. 所有培养物、贮存物及其他废物在排放前，应先经过可行的消毒方法如高压灭菌法。

处理。要在实验室外邻近处进行消毒处理的物品，必须存放在耐用、防扩散的密闭

容器中，且必须依据当地及国家的相关规定进行包装后才能从实验室中移出。 9．昆虫和啮齿类动物管理方案参见其他规范。 二. 特殊操作规程

1．正在进行传染病原体操作时，实验室主管应跟制其他人员进入。通常，易感染或感

染后会产生严重后果的人员(如免疫缺陷或免疫抑制人员)，不得进入实验室或动物

室。实验室主管应评估各种条件，并具有谁可以进入实验室或动物室并在其中工作

的最终决定权。

2．实验室主管应制定规章和程序，只有那些明确病原体潜在危险性并符合特定人室要

求(如经过免疫接种)的人员才能进入实验室。

3．如果使用了某些病原体，应在实验室入口处贴上生物危害的标志。包括的项目有：

所应用的病原体、生物安全级别、所需的免疫接种、研究者姓名及联系电话、实验

室内必须佩戴的所有个人防护设备以及离开实验室前的注意事项。

4．实验室人员须针对本室所应用的病原体或潜在的病原体，接受适当的免疫接种或检

测(如乙肝病毒疫苗或TB皮试)。

5．在适当的时候，根据所处理的病原体，对实验室或其他高危人员进行基准血清样本

收集并保存，然后依据所处理病原体的种类或实验室的职能，进行血清样本的阶段 性收集。

6．由实验室主管将生物安全程序与标准操作规程结合，或将其加入所采用的或为本实

验室特别制定的生物安全手册中。实验人员应了解特殊危险，并熟读与遵守操作规 程。

7．实验室主管应确保实验人员及辅助人员接受适当的培训，使其厂解工作中所涉及的

潜在危险、必要的预防措施以及暴露评估程序。实验人员应接受继续培训，以更新

知识和技能，从而适应于程序或规定的改变。

8．在使用锐利器具时，应特别谨慎。这些器具包括针头和注射器、玻片、移液器、毛 细管和刀片等。

(1)应限制使用针头、注射器或其他尖锐仪器，只在没有其他选择时应用，如胃肠

外注射、取血、从实验动物或带隔膜的瓶子中吸取液体。尽量用塑料制品代替 玻璃制品。

(2)只有带锁定针头的注射器(即针头与注射器连在一起，不准将针头从注射器上 移除)或一次性注射器能用于传染物质的注射抽吸。用过的一次性针头不能被 折弯、剪断、摔破、翻新使用，也不能从一次性注射器中移除，或在丢弃前用 手接触，应将它们小心地弃于一个方便放置、且防刺破的专用容器中等候处 理。非一次性锐器也必须放于有结实外壳的容器中，以便运输到消毒场所进行

处理，常采用的方式是高压蒸汽灭菌。

(3)可重新接入针头的注射器、无针系统及其他安全装置在适当的时候可应用。 (4)破碎的玻璃器皿不要马上用手处理，而应当使用适当的器具，如刷子、畚箕、 钳子和镊子等。装有污染针头、锐器或玻璃碎片的容器在丢弃前应先根据当地 及国家的环保规定进行消毒处理。

9．培养物、组织、体液标本或具潜在传染性的废物必须放于带盖的容器内，防止在收

集、处理、操作、贮存、转移或运输中发生扩散。

10．实验室设备和工作台面必须用有效的消毒剂，在进行完传染性物质的操作后进行常

规消毒，尤其在出现传染性物质意外喷撒或发生其他污染时，更应小心处理。污染

的设备在送去维修前或经过包装从实验室移出前，必须根据相应规定进行消毒。 11. 发生溢出事故造成传染性物质扩散时，应立即报告实验室主管。对这种情况要做医

疗评估、监测以及妥善处理，并记录存档。 12．与研究无关的动物不允许存放于实验室。 四、安全设备(初级屏障)

1． 以下情况需应用维护良好的生物安全橱(最好为二级)、其他适当的个人防护设备或 物理容器装置。

(1)操作中可能产生传染性气溶胶或飞沫。包括离心、研磨、混合、剧烈混合振 摇、超声粉碎、开启装有传染性物质的容器(其内压可能与外周压力不同)、 经鼻饲药以及从动物或鸡胚中收集传染性组织等。

(2)操作中涉及高浓度或大量传染性病原体。必须使用封口的转头或离心安全杯才

能在开放实验室离心，如果转头或安全杯是敞口的，则只能在生物安全橱内进 行操作。

2．必须在生物安全橱外进行微生物学操作时，需进行面部防护(护目镜、面罩、脸部

挡板或其他喷溅物挡板)，以防传染性物质或其他危险物质喷到面部。 3．在实验室内应穿防护性专用工作服。离开实验区域进入非实验区域(如咖啡厅、图

书馆、办公室)前应脱下工作服。所有的丁作服应在实验室中处理或送至专门地方

清洗；绝对不要把工作服带回家。

4．当手有可能接触到传染性物质、污染的台面或设备时应戴于套，最好带双层手套。

当手会被污染时要将其处理，并在完成操作后或手套发生破损时将其脱掉。 —次性

手套不得冲洗、重新利用或触碰清洁台面(如键盘、电话等)。在实验室外不要戴

手套。应备有带滑石粉的乳胶手套作为替换手套。脱掉手套后应洗手。 五、实验设施(二级屏障)

1．贮存限制性病原体的实验室门窗必须加锁。

2．建立新实验室时应尽量远离公共区域并进行有效的隔离。 3．每一个实验室都应设置洗手池。

4．实验室设计应便于清洁。不宜在实验室内使用地毯和垫子。

5．工作台面应防水、耐热，且能耐受有机溶剂、酸、碱以及消毒丁作台面和设备的化 学物质的腐蚀。

6．实验室家具应能装载所需的器材和用品。凳子、柜子及设备间应留足空间以便于清

洁。椅子及其他装备应使用非布质材料覆盖以便于消毒。

7．安装生物安全橱的实验室内，其供气和排气引起的波动不应超出生物安全橱的容许

范围。生物安全橱的放置应远离以下场所，如门、开放的窗口、常有人通行的实验

室区域以及可能破坏设备的地方，从而维持其容许气流参数。 8，应有一个方便的眼部冲洗台。

9．照明应充足以便于所有操作，但要避免因光的反射而妨碍视线。

10．对通风无特殊要求。但在设计新实验室时，应考虑安装能提供内向气流而不会把循

环气流排放至室外的机械通风系统。实验室中有朝向外部的窗户必须安装防蚊纱 窗。

第三节 生物安全3级(BSL-3) 一、概 述

BSL-3级适用于临床、诊断、教学、科研或生产设施，其工作中涉及内源或外源性

病原体，吸入感染后可产生严重的或致死性的疾病。实验人员应受过特殊训练，掌握处

理致病性或致死性病原体的措施，并且在有经验的专家指导下进行操作。 所有传染物质的操作均应在生物安全橱或其他物理防扩散装置中进行，或由穿戴了

适当的个人防护服和防护设备的人员操作。实验室的设计和工程应符合特定要求。

然而，现有的一些实验室可能不具备BSL-3级所规定的所有实验室条件(如双门 进入区以及室内孔洞密封系统)。在此情况下，常规操作(如诊断程序，包括增殖病原

体以进行鉴定、分型以及易感性测定等)要求安全水平可通过在BSL-2级水平的基础

上实现，前提条件是：①实验室的废气须排至室外；②实验室的通风必须平衡以提供进

入室内的定向气流；③操作进行时限制无关人员的进入；④严格遵守为BSL-3级标准

所推荐的标准微生物学技术、特殊措施以及安全设备方面的规定。最后要说明的是，应

由实验室主管决定是否采用这种经修改的、非严格意义上的BSL-3级标准。 以下标准和特殊安全技术、设备和设施适应于BSL-3级相关的病原体。 二、标准微生物学操作规程

1．正在进行实验时，由实验室主管限制人贝进入。

2．实验人员处理完活性物质、脱下手套、离开实验室之前要洗手。

3．不得在工作区内进食、喝水、抽烟、处理隐形眼镜、使用化妆品。食物应贮存于工

作区外的专用橱柜或冰箱内。

4．禁止使用口吸移液技术，而应使用机械移液装置。 5．制定安全使用锐利器具的方案。

6．仔细进行每一步操作，以减少飞溅物或气溶胶的产生。

7．工作台面在每天千作结束前车少应消毒一次，发生活性物质泼撤时应及时消毒。

8. 所有培养物、贮存物及其他废物在排放前应先经过可行的消毒方法如高压蒸汽灭菌

法处理。要在实验室外面邻近处进行消毒处理的物质必须存放在耐用、防扩散的密

闭容器中，才能运出实验室。从BSL-3实验室排放的废物在移出实验室处理前应先 消毒。

9．昆虫和啮齿类动物管理方案参见其他规范。 三、特殊操作规程

1．进行实验时应关闭实验室的门。

2．实验室主管应限制无关人员进入实验室、接触操作及辅助操作人员。那些易于受感

染或感染后会造成严重后果的人员(如免疫缺陷或免疫抑制的人员)不得进入实验

室或动物室。实验室主管应评估各种环境，并决定谁可以进入实验室或在其中工作。

任何未成年人不得进入实验室。

3．实验室主管应制定规章和程序，只有那些明确病原体潜在危险性、符合特定入室要

求(如经过免疫接种)以及遵守所有入室和出室程序的人员才能进入实验室。 4．如果实验室或防扩散性容器中有传染性材料或受染动物，应在所有实验室和动物室

入口处张贴危险警告标牌及通用生物危害标识。生物安全警告标牌上应标明所使用

的病原体、实验室主管或其他主管的姓名和联系电话，并且标明进入实验室的具体

要求，例如，需免疫接种、带防护面具或其他个人防护措施。

5.实验室人员须针对本室所应用的病原体或潜在的病原体，接受适当的免疫接种或检

测(如乙肝疫苗或TB皮试)，并且应定期进行相应的病原体检查。

6．在适当的时候，根据所处理的病原体，对实验室或其他高危人员进行基准血

清样本

收集并保存，然后依据所处理病原体的种类或实验室的职能，进行血清样本的阶段 性收集。

7．由实验室主管制定或采用适于本实验室的生物安全手册，采取的生物安全预防措施

应与标准技术规程相结合。实验人员应了解特殊危险并熟读与遵守操作规程。 8．实验室主管应确保实验人员及辅助人员接受适当的培训，使其了解工作中的潜在危

险、必要的预防措施以及暴露评估程序。实验人员应接受继续培训，以更新知识和

技能，从而适应于程序的改变。

9．实验室主管负责确保所有实验人员在进行BSL-3级水平相关病原体操作前，熟练掌

握标准微生物学操作和技术以及其他本实验室所需进行的操作，包括以前在处理人

病原体或细胞培养方面的经验、或参加过由实验室主管或其他精通微生物学安全操

作和技术的专家开办的特定培训课程。

lo．在使用锐利器具时应特别谨慎。这些器具包括针头和注射器、玻片、移液器、毛细 管和刀片。

(1)应限制使用针头和注射器或其他锐利器具，只有在没有其他选择时才应用，如

胃肠外注射、取皿、从实验动物或带隔膜的瓶子中吸取液体，尽量用塑料制品 代替玻璃制品。

(2)只有带锁定针头的注射器或一次性注射器能用于传染性物质的注射抽吸。用过

的一次性针头不能被折弯、剪断、摔破、翻新使用，也不能从一次性注射器中 移除、或在丢弃前用手接触，而应将它们小心地放于方便放置、防刺破的专用 容器中以便处理。非一次性锐器也必须放于有结实外壳的容器，以便运输到消 毒场所进行处理，常采用的消毒方式是高压蒸汽灭菌法。

(3)可重新接入针头的注射器、无针系统及其他安全装置在适当的时候可应用。

(4)破碎的玻璃器皿不要用手处理，应当使用适当的器具，如刷子、畚箕、钳子和

镊子等。装有污染针头、锐器或玻璃碎片的容器在丢弃前应根据当地和国家的 有关规定进行消毒处理。

11．所有涉及传染性物质的开放性操作应在生物安全橱或其他防扩散区间内的物理防扩

散装置中进行，不能在开放台面的敞口容器中进行。可应用塑料面防水纸巾擦拭法

清洁生物安全橱内的无孔工作台面。

12．实验室设备和工作台面必须用有效的消毒剂，在进行完传染性物质的操作后进行常

规消毒，在发生传染性物质意外喷撒或其他污染时，更应小心处理。 (1)发生传染性物质扩散事故时，应由专业人员或其他受过专门训练、懂得处 理高浓度传染物质的人员进行消毒、收集和清洁。应制定并张贴扩散后处 理程序。

(2)污染的没备在送去维修前或经包装运输前，必须根据当地和国家的规定进行 消毒。

13．培养物、组织、体液标本或具潜在传染性的废物必须放于带盖的容器内，防止在收

集、处理。操作．贮存、转移或运输巾发生扩散。

14．实验室内所有具潜在传染性的废弃材料(如手套、实验室工作服等)在对其进行处

理或重新利用前应进行消毒。

15．发生溢出事故造成传染性物质扩散时应立即报告实验室主管。对这种情况要做医疗

评估、监测以及妥善处理，并且记录存档。 16．与研究无关的动、植物不允许存放于实验室。

四、安全设备(初级屏障)

1．工作人员进入实验室时应着实验室防护服，如前面不开口的圆领长实驰服、清洁套

服或连裤工作服。在实验室外不得穿防护服。非一次性工作服送去清洗前应先消毒。

工作服明显被污染时应更换。

2．处理传染性物质、受感染动物以及使用污染的设备时应戴手套。 3．要经常更换手套并洗手。—次性手套不应反复使用。

4．在进行如下操作对应在二级或三级生物安全橱内进行：处理传染件材料、 感染动物尸检、收集感染动物或鸡胚中的组织或液体。

5.当某一步骤或程序不能在生物安全橱内进行时，应辅以适当的个人防护设备(如防

毒面具、护脸挡板)和物理防扩散装置(如安全离心杯或密闭转头)。 6．在有感染动物的房间内应戴呼吸道和面部保护装置(如防毒面具)。 五、实验设施(二级屏障)

1．实验室应与大楼内未控制通行的区域分开，并且限制外来人员进入实验室。从入室

走廊进入实验室应通过两道自动关闭门(这是基本要求)。门应能上锁。 在通道中应设有更衣室。

2．每一实验室均应有洗手池。洗手池应无须手操作或能自动开启，并且应位于房间的 出口附近。

3．在进行BSL-3级相关性病原体操作的室内，其墙面、地面和天花板都应易于清洁和

消毒。如果有裂缝，应该封好。墙、火花板和地面应该光滑、防水并且耐受在实验

室内通常使用的化学物质和消毒剂的腐蚀，地板应为整块石料而不分块并且防滑。

不宜使用地毯。地面、墙壁及天花板表面的孔洞应封闭。排泄管周围的开口及门窗

之间的空间应能够密封以便于消毒。

4．工作台面应防水、耐热，且能耐受有机溶剂、酸、碱以及用于消毒工作台面和设备

的化学物质的腐蚀。

5．实验室家具应能装载所需的器材和用品。凳子、柜子及设备间应留足空间以便于清

洁。椅子及其他装备应用非布质材料覆盖以便消毒。 6．应关闭并密封所有实验室的窗户。

7。应制定对所有实验废弃物进行消毒的措施。选择合适的消毒设备，并间最好在实验

室内进行消毒(如高压灭菌、化学消毒、焚化或其他有效的消毒方法)。假如废物要

运出实验室，则必须先妥善封装并避免通过公共走廊。

8。必须使用生物安全橱，并且将其安装在远离门、供应窗口以及实验室内交通要道口 的地方。

9。应安装管道式废气排放系统。此系统能产生定向气流．将清洁区的空气吸入实验室

并排入污染区。废气不会循环流人大楼的其他地方。无需对废气进行过滤及其他处

理，但应根据位置要求、特定的病原体处理及使用情况而加以考虑。排出的废气应

能从局部高浓度区和进气口处迅速扩散，或者经必要的空气过滤。实验室人员应确

认(入室)气流方向正确。建议在实验室入口处使用可视性监测系统以指示并证实

定向人室气流。还应安装—个气体压力控制系统以防止实验室内存在持续的正压。

另外还可安装一个响钤报警系统以提示实验室人员加热通风和空调(heating，ventl-

lation and air conditioning，HVAC)系统失灵。

10．假如安全橱每年都经过检定，则从二级生物安全橱排放的废气经过滤后可重新循环

入实验室。当从二级安全橱排放的废气通过大楼内的废气排放系统排出实验室外

时，安全橱在连接时应不干扰橱内和大楼内废气排放系统的气压平衡(如在安全橱

与楼内管道式排放系统间产生空气间隙)。当使用三级生物安全橱时，必须将它们

直接连入楼内排气系统。假如三级安全橱与供气系统相连，则必须防止橱内产生正

压。

11．应将连续流动式离心机或其他可能产生气溶胶的设备置于防扩散装置中，其

产生的废气须经过滤系统处理后再排出实验室。这些系统应至少每年检测— 次。若将这些装置产生的废气从局部高浓度区域及空气入口处疏散后，也可 直接排山室外。

12．使用液体消毒剂对阀门、过滤器或其他替代品进行消毒，以保护真空管道。 过滤器在必要时应更换。另外也可以应用简易真空泵(也需气阀和过滤器保 护)。

13．实验室内应设眼部冲洗台。

14．照明应充足以便于操作，但要避免因光的反射和耀眼而妨碍视线。 15．必须记录BSL-3级实验室的设计和操作规程。实验室必须经过检测并验证其设计

和操作参数达到标准后才能投入使用。每年至少应对实验室进行一次重新验证，以

免这些程序在操作中被修改。

16．如果提示了应采取进一步的环境防护措施(基于危险评估、位置条件或其 他当地和国家所制定的规定)，则应对此加以考虑(如个人淋浴、废气过滤、对其

他管道系统加以限制以及提供流动消毒系统等)。 第四节 生物安全4级(BSL-4) 一、概 述

BSL-4级适用于进行危险的外源性病原体的操作，这些病原体可对个体造成严重的

致死性疾病，并且可通过空气传播。那些与BSL-4级水平病原体具相似或相同抗原性

的病原体也应该在此级水平进行操作。当有足够的资料可供参考时，可仍然在此水平进

行这些病原体的操作，或适当降低安全水平。实验室人员应参加过完整和系统的培训，

能够熟练处理极其危险的传染性病原体，并且熟悉标准和特殊操作规程，防扩散设备以

及实验室的一级和二级防扩散功能。他们可以在专家的指导监督下进行操作。

这些专家

训练有素，且在处理这些病原体方面具丰富经验。实验室主管应严格控制人员进入。实

验室或者与其他建筑物隔开，或者位于大楼的受控区域，并且与大楼内其他所有区域隔

离。另外，应制定或采用具体的实验室操作手册。

实验室的工作区内，所有的操作均限于在三级生物安全橱内进行，或在二级生物安

全橱内，但辅以一套正压供气防护服，此防护服由一生命支持系统提供氧气并与其他通

讯设备连接。BSL-4级实验室具有特殊的工程和设计特色，以防止微生物扩散至环境 中。

以下标准和特殊安全操作规程、设备、设施适应于BSL-4级病原体。 二、标准微生物学操作规程

1．进行实验时，由实验室主管限制人员的进入。 2．制定处理锐利器具如注射器针头、手术刀片等的措施。 3．应仔细操作所有步骤，以减少气溶胶的产生。

4．工作台面至少每天消毒一次，在发生活性材料溅出后应立即消毒。 5．所有废物均应采用适当的方法如高压灭菌进行消毒处理后才能丢弃。 6．昆虫和啮齿类动物管理方案参见其他规范。 三、特殊操作规程

1．只有那些必须在实验室或单个实验室房间进行操作的人员或辅助人员才允许进

入。易受感染或感染后会造成极其严重后果的人员(如免疫缺陷或免疫抑制患 者)，以及儿童、孕妇等均不得进入实验室或动物室。实验室主管应评估各种 环境，并决定谁可以进入实验室或在其中丁作。实验室人口应安装上锁的安全 门。人员的进入由实验室主管、生物危险控制官员或其他负责实验室设备安全 的人员进行管理。有关人员进入实验室前，应明确潜在危险性，并进行适当的 安全防护指导以确保其安全。允许进入的人员应遵守规定以及入、出室的程 序。所有进入实验室的人员都要签名登记，记录出入实验室的日期和时间。此 外，还要制定切实有效的应急措施。

2．如果在实验室或动物室中有传染性物质或受染动物存在时，应在所有进门处

张贴危

险警告标志以及通用生物危险标识。标明所使用的病原体、实验室主管或其他主管

的姓名和联系电话，并且标明进入实验室的具体要求(如需免疫接种或带防护面具 等)。

3．实验室主管负责确保所有实验室人员在进行BSL-4级水平病原体操作前，熟练掌握

标准和特殊微生物学操作规程，以及其他本实验室所需进行的特定操作。包括以前

在处理人病原体或细胞培养方面的经验，或参加过由实验室主管或其他精通微生物

安全操作和技术的专家开办的特定培训课程。 4．对实验室人虽进行有针对性的免疫接种。

5．对实验室或其他高危人员进行基准血清样本收集并保存，并依据所处理病原体的种

类或实验室的职能，定期进行血清样本的阶段性收集。在制定血清监测计划时，应

考虑评估特定抗体检测方法的可行性。此计划负责检测各阶段所收集的血清样本，

并将结果告之参与者。

6．制定或采用适当的生物安全手册。有关人员应了解特定危害性，熟读并遵守操作规 程。

7．实验人员及辅助人员应受过适当的培训，了解工作中所涉及的潜在危险、必要的预

防措施以及暴露评估程序。此外，实验人员还应接受继续培训，以更新知识和技能，

从而适应于程序的改变。

8．实验人员只能经琳浴间和更衣室出入实验室，每次离开实验室前都应进行消毒性淋

浴。只有在紧急情况下，才能通过气压过渡间(风淋室)出入实验室。

9．便服应脱在外更衣室。完整的实验室服装包括内衣、短裤、衬衣或套头衫、

鞋、手

套等，都应提供给所有进入实验室的人员。当准备离开实验室进入冲洗间前，要在

内更衣室脱去实验室服装。脏衣服在送洗衣房前应高压灭菌。

10．室内所需材料和用品应通过双层门的高压灭菌仓、熏蒸消毒仓或气压过渡间送人。

这些双门设备在每次使用前后均应适当消毒。关好外门后，室内的工作人员再打开

内门取出所送人的物品。取完物品后再将内门关好。

11. 使用锐利器具应特别谨慎。这些器具包括针头和注射器、玻片、移液器、毛细管和 刀片等。

(1)应限制使用针头、注射器或其他锐利器具，只有在没有其他选择时才应用，如

胃肠外注射、放血、从实验动物或带隔膜的瓶子中吸取液体。尽量用塑料制品 代替玻璃制品。

(2)只有带锁定针头的注射器或一次性注射器能用于传染性物质的注射抽吸。用过

的一次性针头不能被折弯、剪断、掉破、翻新使用，也不允许从一次性注射器 中移除或丢弃前用手接触，而应将它们小心地放于方便放置防刺破的专用容器 中以便处理。非一次性锐器也必须放于有结实外壳的容器中，以便于运输到消 毒场所进行处理，常采用的方式是高压灭菌法。

(3)可重新接入针头的注射器、无针系统及其他安全装置在适当的时候可应用。 (4)破碎的玻璃器皿不要用手处理，应当使用适当的器具，如刷子、畚箕、钳子和

镊子等。装有污染针头、锐器或玻璃碎片的容器在丢弃前应根据当地和国家的 规定进行消毒处理。

12．需从三级安全橱或BSL-4级实验室移出的具活性或保持完整状态的生物材料，

必须转移到防碎封口的初级容器中，然后再将其装入防碎封口的二级容器中。 并且通过专门为此而设计的消毒浸泡罐、熏蒸消毒室或密封过渡间再移出室 外。

13. 除了必须保持生物学活性或完整状态的生物材料，任何材料在移出BSL-4

级实验

室前必须经过高压灭菌或消毒。可能被高温或蒸汽损害的设备和器材，必须在密闭

室或专为此而设计的小室中用气体熏蒸法进行消毒。

14．实验室设备和工作台面在进行完传染性物质的操作后，必须用有效的消毒剂进行常

规消毒，尤其在发生传染性物质意外喷撒或其他污染时，更应小心处理。设备在送

去维修前应进行消毒。

15．发生传染性物质扩散事故时，应由专业人员或其他受过专门训练、懂得处理

高浓度传染性物质的人员进行消毒、收集和清洁。应制定并张贴扩散后处理 程序。

16．制定一套实验室报告系统，报告内容为实验室事故、病原体暴露和人员缺席、对潜

在实验室相关性疾病的监测等情况。将这些情况记录后存档。另外，此报告监测系

统的一个基本辅助措施是，建立对实验人员进行潜在或已知实验室相关疾病的检

疫、隔离和医疗设施。

17．与实验无关的材料(如植物、动物和衣服等)不允许存放于实验室。 四、安全设备(初级屏障)

实验室的工作区内，所有的操作均限于在三级生物安全橱内进行，或在二级生物安全

橱内，并辅以一套正压供气防护服，此防护服由一生命支持系统提供氧气井与其他通讯设

备连接。BSL-4级实验室具有特殊的工程和设计特色，以防止微生物扩散至环境中。

五、实验设施(二级屏障) BSL-4级实验室有两种模式；

①安全橱实验室，即所有病原体处理均在三级生物安全橱内进行；

②防护服实验室，即实验人员着防护服。BSL-4级实验室可以采取任一种模式或将

两者联合应用。假如联合应用，应遵守各自的所有规定。 (一)安全橱实验室

1．安全橱实验室为BSL-4级实验室。它或者与其他建筑物隔开，或位于大楼内明

确划分的隔离区域。在设计实验室的房间时，应确保在进入装有三级生物安全 橱的房间(即安全橱室)前先通过至少两道门。内、外更衣室由一淋浴间分 隔，以供人员进出安全橱室。防扩散屏障包括双门高压灭菌仓、浸泡池、熏蒸 仓或气压过渡问等消毒设备，以供传送那些不能通过更衣室带入的材料、用品 或设备。

2．每天在实验前应检查所有的防扩散参数(如定向气流)和生命支持系统，以确保实

验是在规定的操作参数下进行。

3．安全橱室及内更衣室的墙、地板和天花板均应形成封闭性内壳，以便于熏蒸，并且

防止动物和昆虫的进出。地板应为一整体并呈内凹状。此房间的内表面应防潮且抗

化学物质脯蚀，并且利于清洁和消毒。这些结构表面的所有孔洞都应封闭。进入安

全橱室和内更衣室的门应尽量小，并且能密闭以便于消毒。房间的所有排水道均直

接连入废液消毒系统。下水管道孔和其他服务管道均应安装过滤器并防虫。 4. 工作台表面无缝或被封合，能防水、耐热，且能耐受有机溶剂、酸、碱和用于工作

台面及设备消毒的化学物质的腐蚀。

5．实验室家具应易于开合，且能装载和放置所需的器材和用物。凳子、柜子及设备间

应留足空间以便于清洁。椅子及其他装备应使用非布质材料覆盖以便于消毒。 6. 洗手池应是无需手操作或自动开启型，并且应位于安全橱室和内、外更衣室的近门 处。

7．如有中央真空系统，应专为安全橱室内的区域服务。根据情况，将过滤器尽可能安

装在接近每一个水龙头或旋塞处。过滤器要便于即时消毒和更换。通往安全橱

室的

其他液体和气体的输送管道卜应装备特殊装置，以防止液体和气体倒流。 8．假如安装水龙头，应为自动开启的或是用脚操作的，并且应位于实验室外的走廊中。

水龙头的供水应与实验区的供水系统分开，并且应装有防反流装置。 9．实验室的门应为可锁的自动闭合门。 10．所有窃户均应防碎且密封。

11．双门高压灭菌仓负责消毒三级生物安全橱和安全橱室送出的材料。并口朝向防扩散

屏障外部的高压灭菌仓，应被固封于防扩散屏障的墙壁内。高压灭菌仓是自动控制

的，以确保只有在消毒循环完成后，外侧门才能打开。

12．浸泡池、熏蒸室或其他消毒装置，可对那些不能用高压灭菌法消毒的材料和设备进

行消毒，从而将三级生物安全橱和安全橱室内的物品安全移出。

13．内更衣室(包括洗手间)和安全橱室的洗手池、地面排水道、高压灭菌仓及其他安

全橱室内来源的污染废液，在排入清洁下水道前应采用适当的方法进行消毒，最好

是加热处理。淋浴间和于净区的洗手间等处的液体无需处理，可直接排人清洁下水

道。用于废液消毒的程序必须经过物理学和生物学验证。

14．建立专用非循环通风系统。此系统的供气和废气部分需经平衡，以确保从相对安全

区向高危险区的定向气流。对相邻区域的差异气压／定向气流进行监控，及时发现

系统故障。位于洁净更衣室人口的可视性气压监控装置，可指示并确证为安全橱室

提供了差异气压，监测供气和排气部分中的气流，并且设计压力自动控制系统，以

防止实验室内正压的持续存在。如果三级安全橱直接连入排气系统，则应防止安全

橱内正压的产生。

[5．进入和排出安全橱室、内更衣室和缓冲间的气体须流经过滤器。根据实际情况，将

过滤器安装在尽可能接近产气口的地方，以减少被污染管道的长度。所有过滤器均

需经过检测并应每年验收。过滤护套应便于在移除过滤器前将其原地消毒，或将其

放入密闭的一级容器中，以便进一步消毒或焚化。过滤器护套的设计必须便于安

装。可通过用供气系统的洁净空气对处理废气的过滤器进行充分的预过滤，从而延

长其有效使用期。

16．制定BSL-4级实验室的设计和操作规程。此实验室必须在投入使用前经过通风检

测，以确保其设计和技术参数符合要求。并且还需每年重新验收一次，以防止这些

程序在操作中被修改。

17．实验室应设置适当的通讯系统(如语音装置、传真和计算机等)，以方便与外界联系。 (二)防护服实验室

1．防护服实验室为BSL-4级实验室，它或者与其他建筑物隔开，或位于大楼内明确划

分的隔离区域。实验室的房间在设计时，应确保在进入BSL-4级病原体操作的实验

室(即防护服实验室)前，先通过更衣室和消毒区。内、外更衣室由一淋浴间分隔，

以供人员进出防护服室。经特殊设计的防护服实验室，可为工作人员提供相当于三

级生物安全橱的保护。进入此区域的人员应着正压防护服，由生命支持系统提供氧

气，后者由过滤器保护。生命支持系统包括备用的吸入空气压缩装置、报警器和紧

急备份吸气箱。进入此区域需经过装有气体密闭门的气体密闭室。工作人员离开此

区域前，应经化学淋浴器消毒防护服表面。有一自动开启的紧急电源用以支持排气

系统、生命支持系统、报警器、灯光、出人控制以及生物安全橱等。防护服内的气

压比周围实验室内的气压高。整个防护服实验室区域的气压比周围邻近区域低。室

内备有紧急照明和通讯系统。所有通往防护服室、化学淋浴间和气体密闭室的人口

均需设有自动门锁，进行实验时应全部锁闭。

2．每天实验前应检查所有的防扩散参数(如定向气流、化学淋浴设备)和生命支持系

统，以确保实验是根据其操作参数进行的。

3．在防扩散屏障中设有双门高压灭菌仓，负责消毒从防护服实验室送出的材料。高压

灭菌仓门开口朝向防护服实验室外部，且被固封于此实验室墙壁内。高压灭菌仓是

自动控制的，以确保只有在其消毒循环完成后，外侧门才能被打开。设有用于传递

物品的浸泡池、熏蒸室或气体密封过渡舱等消毒装置，可传入那些不能经更衣室带

入的材料、用品和设备。这些装置也能用于将那些不能用高压蒸汽灭菌法消毒的材

料，用品和设备安全送出实验室。

4．室内的墙、地板和天花板均应形成封闭性内壳，以便于熏蒸，并且防止动物和昆虫

的进出。房间的内表面应防潮且抗化学物质腐蚀，以利于清洁和消毒，这 些结构表面的所有孔洞都应封闭。室内地面的所有排水道均含一分水阀，其中装有

可有效抗目标病原体的化学消毒剂，并且均直接连人废液消毒系统。下水管道孔和

其他服务管道均含有过滤器。

5. 室内的附属设施如灯座、通气管道以及公共管道均应尽可能减少水平表面积。 6．工作台表面应无缝、防水、耐热，且能耐受有机溶剂、酸、碱和用于工作台

面及设

备消毒的化学物质的腐蚀。

7．实验室家具应易于开合，且能装载或放置所需的器材和用品，最好为无孔材料所制

备。凳子、柜子及设备间应留足空间以便于清洁。椅子及其他装备应采用非布质材

料覆盖从而便于消毒。

8. 应在室内安装无需手操作、自动开启型的洗手池。根据危险评估情况，在内、外更

衣室均应安装洗手池。

g，如有中央真空系统，则应设有为防护服实验室内区域服务的专用设备。根据情况将

空气过滤器尽可能安装在接近每一个水龙头或旋塞处。过滤器应便于现场消毒和更

换，通往室内的其他液体和气体输送管道上应装备特殊装置，以防止液体或气体倒 流。

lo．通入实验室的门应为可锁的自动闭合门。化学淋浴间和气压过渡仓的出、入门是交

替闭锁的，从而防止两侧门同时被打开。 11．所有窗户均防碎且密封。

12，从洗手池、地面排水道、高压灭菌仓及其他肪扩散屏障内来源的污染废液，在排入

清洁下水道前应用可靠的方法消毒，最好足加热处理。淋浴间和干净区的洗手间等

处的液体无需处理，可直接排人清洁下水道。用于废液消毒的程序必须经过物理学

和生物学验证。

13. 设置专用非循环通风系统。此系统的供气和废气部分需经平衡，以确保从相对安全

区向高危险区的定向气流。必须安装排气扇，供气扇可酌情安装。对相邻区域的差

异气压／定向气流进行监控，以及时发现系统故障。有—可视性气压监控装置，

可

指示并确证为防护服实验室提供了差异气压，并且位于洁净更衣室的人口。供气和

排气部分中的气流被监测，并且设计了HVAC控制系统，用以防止实验室内正压

的持续存在。

14．防护服实验室、消毒淋浴间和气压过渡消毒舱的供气流经空气过滤器而得到保护。

而从上述地方产生的所有废气需连续经过两次空气过滤器处理后再排入外部。根据

实际情况，应将串气过滤器尽可能安装在接近产气口的地方，以减少被污染管道的

长度。所有空气过滤器均需经过检测并应每年验收。空气过滤扩套应便于在移除过

滤器前在原地消毒，或可将其放入封闭的一级容器中，以便进一步消毒或焚化。空

气过滤器护套的设计必须便于安装。最好是应用经检验合格的空气过滤器。可用供

气系统的洁净空气对处理废气的过滤器进行充分的预过滤，从而延长其有效使用 期。

15. 应将供气和排气系统安装于合适的位置，以尽量减少室内的死气空间。 16．从防护服实验室中的二级生物安全橱产生的废气经处理后，可排放入室内或通过设

施中的排气系统排出室外。假如处理后的废气是经实验室中的排气系统排放出去的

话，在将其与排气系统相连时，应避免对安全橱和排气系统内的气压平衡产生干 扰。

17．应制定BSL-4级实验室规划和操作程序。实验室必须在投入使用前经过通风检测，

以确保设计和技术参数符合要求。并且还需每年重新验收一次，以防止这些程序因

操作实践被修改。

18. 实验室应设置适当的通讯系统(如语音装置、传真和计算机等)．以方便与外界联 系。

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