蛋白质习题

一、 是非题

1. 两条单独肽链经链间二硫键交联组成蛋白质分子，这两条肽链是该蛋白质的两个亚基。

2. 蛋白质是两性电解质。当溶剂pH在其等电点以上时，蛋白质带负电，而pH在其等电点以下时则带正电。

3. 所有α-氨基酸的α碳原子都是一个不对称碳原子。

4. 构成蛋白质的氨基酸只有个别氨基酸为D型，其他均为L型氨基酸。 5. 凝胶过滤法可用于测定蛋白质的分子量，分子量小的蛋白质先从柱上流出，分子量大的后流出。

6. 蛋白质中α-螺旋结构的最大破坏者是Pro。

7. 在水溶液中，蛋白质溶解度最小时的pH值通常就是它的等电点。 8. 蛋白质的亚基（或称亚单位）和肽链是同义词。

9. 蛋白质中一个氨基酸残基的改变，必定引起蛋白质结构的显著变化。 氨基酸为氨基取代的羧酸，可直接用碱酸滴定法进行定量测定。 10.肽平面内与α碳原子形成的键能以任一角度自由旋转，形成稳定的蛋白 质构象。

11. 在溶液的 pH 为 7 时，赖氨酸在电场中向正极方向移动。

12. 蛋白质由于带有电荷和水膜，因此在水溶液中形成稳定的胶体。蛋白质变性后沉淀都是因为中和电荷和去水膜所引起的。

13. 氨基酸在水溶液中或晶态时主要以两性离子形式存在。

14.蛋白质肽链的折叠完全由它的氨基酸序列决定的，与外界环境无关。 二、填空题

1.维持蛋白质二级结构的主要作用力是________。

2.蛋白质具有胶体溶液的性质，其稳定因素是分子表面具有________和________。

3. 亲和层析是利用生物大分子与其________间的________而设计的_______________技术。

4. 用分光光度计测定蛋白质在280nm有吸收，主要是由于________,________和________残基侧链基团起作用。

5.烃基化试剂FDNB和PITC都能与氨基酸的氨基反应，因此可以用来测定蛋白质的 ，但 还能用于测定蛋白质的氨基酸序列。 6.构成蛋白质的20种氨基酸分子结构中含有羟基的是 、 和 。

7. 蛋白质元素组成的特点是平均含_________量为_____%. 8. 聚丙烯酰胺凝胶电泳的分辨力之所以很高,是因为它具有_______,________,_________三种效应.

9.蛋白质二级结构包括______,_______和________等结构单元.

10正常生理条件下,蛋白质肽链上的_________和___________的侧链几乎完全带正电荷,而_______的侧链则部分带正电荷.

11.除去蛋白样品中盐分的方法一般为____________和__________.

12.肽链中的甲硫氨酸残基被溴化氰作用后肽链就在_____________被切断,甲硫氨酸残基变成__________________

13. .亚基是具______级结构蛋白质分子的独立结构单位，但不是独立的____ ______单位。亚基之间通过______相互作用组成蛋 白质分子。

14. 强离子型阳离子交换树脂对混合氨基酸进行分离时，首先是将氨基酸交换到 树脂上，同时样品缓冲液的pH约为2－3，然后逐步提高缓冲液的pH值进行洗 脱，从总体上来看最先洗脱下来的是 ，中间洗脱下来的是 ，最后洗脱下来的是 。

15.构成蛋白质的２０种氨基酸中 不具有旋光性， 为亚氨基酸， 的侧链为酚基。

16．分离纯化蛋白质的方法很多，如超速离心法是根据不同蛋白质 的不同，而电泳是则是根据它们 的不同设计的分离纯化 方法。

17.分离纯化生物高分子的主要理论依据是__________和_____________. 18.两条相当伸展的肽链或同一条肽链的两个伸展的片断之间形成氢键的二级结构称为_______.

19.蛋白质二级结构和三级结构之间还存在_______和_________两种组合体

20.氨基酸在等电点(PI)时，以______离子形式存在，在PH>PI时以______离子存在，在PH

21.胰蛋白酶可以专一性地水解 (19) 和 (20) 的羧基参与形成的肽键，它是丝氨酸蛋白酶家族的一个成员，催化机制包括酸碱催化和共价催化。 三、选择题

1.维持蛋白质空间结构的主要作用力是 ① 盐键 ②二硫键 ③配位键 ④范德华力

2. 测定肽链N-末端氨基酸和氨基酸序列都有用的试剂是 ①2，4-二硝基苯 ②苯异硫氰酸酯 ③丹酰氯 ④无机肼

3. 研究蛋白质结构常用氧化法打开二硫键，所用的化学试剂是 ①亚硝酸 ②过氯酸 ③硫酸 ④过甲酸

4. 下列氨基酸哪个含有吲哚环? A．Met B．Phe C．Trp 5.下列哪一种说法对蛋白质结构的描述是错误的 A．都有一级结构 B．都有二级结构 C．都有三级结构 D．都有四级结构 6. 下列哪条对蛋白质变性的描述是正确的?

A. 蛋白质变性后溶解度增加B. 蛋白质变性后不易被蛋白酶水解 C. 蛋白质变性后理化性质不变D．蛋白质变性后丧失原有的生物活性 7. 氨基酸与蛋白质共有的性质是

A．胶体性质 B．沉淀反应 C．变性性质 D．两性性质 8.氨基酸在等电点时，应具有的特点是 A．不具正电荷 B．不具负电荷C．A+B D.在电场中不泳动 9.在一个肽平面中，能自由旋转的价键有几个?

A．2 B．3 C．4 D．5 10.下面哪种方法可以测定蛋白质的相对分子质量？

a. 凯氏定氮 b. 质谱 c. 离子交换层析 d. 茚三酮反应 11. 在正丁醇－醋酸展层系统中，下面哪种氨基酸的Rf值最大？ a. Ser b. Ala c. Val d. Phe

12. 双缩脲反应是现面哪种物质特有的反应？

D．Val a. DNA b. RNA c. 磷酸二酯键 d. 肽和蛋白质 13. 测定蛋白质浓度用到的试剂是：

a．二苯胺 b．地衣酚 c．Folin-酚 d．2，6－二氯酚靛酚 14. 分离和纯化三个存在于组织提取液中的蛋白质,它们的性质如下 Pro MW PI A 20000 8.5 B 21000 5.9 C 75000 6.0

为保留它们的活性,又使其彼此分离开,最好的办法是_________ a. 凝胶过滤然后经超速离心b. 凝胶过滤然后在Ph7时经离子交换层析 c. 凝胶过滤经肽谱d. 丙酮沉淀然后经凝胶过滤e. 透析后在Ph8.5时经等电沉淀 15. 蛋白质变性过程中,伴随着结构上的变化,其原因是__________ a. 肽键的断裂b. 氨基酸残基的化学修饰头物 c. 维系空间结构的氢键断裂d. 二硫键的打开 16. 蛋白质一级结构的主要化学键是

A、氢键 B、疏水键C、盐键 D、二硫键 E、肽键 17.蛋白质变性后可出现下列哪种变化

A、一级结构发生改变B、构型发生改变C、分子量变小D、构象发生改变 18.肌红蛋白的正确说法是

a．别构蛋白 b．单体蛋白 c．运氧蛋白 d．S曲线 19.为获得不变性的蛋白质，常用的方法有

a．三氯乙酸沉淀 b．苦味酸沉淀 c．常温乙醇沉淀 d．低温中性盐沉淀 20.谷氨酸的PK值为2.19,4.25,9.76;赖氨酸的PK值为2.18,8.95,10.53;则它们的PI值分别为______

a.4.25和8.95 b.3.22和9.74 c.6.96和5.56 d.5.93和6.36 e.2.19和10.53 21.双缩脲反应是_________的特有反应

a. DNA b. RNA c. 磷酸二酯键 d. 肽和蛋白质 22. 可用于测定蛋白质分子量的方法是：

A．SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 B．离子交换层析 C．凯氏定氮法 D．亲和层析 23.球状蛋白质中，下面哪种氨基酸经常位于分子内部？ a.Lys b.Glu c.Tyr d.Ile

24. 镰刀状贫血病（HbS） 是最早被认识的一种分子病，它是由于血红蛋白两 条β链中的两个Glu被下列哪种氨基酸所取代

a．Ala b．Val c.Ser d．Thr 25.茚三酮反应是

a. 和a-氨基酸的专一性反应 b. 测定蛋白质中肽键数量的反应 c. 测定甘油三脂的反应 d. 测定多糖中糖苷键数量的反应 26.蛋白质三维结构的构象特征主要取决于 a.氨基酸的组成、顺序和数目

b.氢键、盐键、范德华尔斯力和疏水相互作用等构象维系力 c.温度、pH和离子强度等环境条件 d.肽链间及肽链内的二硫键

四、名词解释

Protein, Simple protein, Conjugated protein, isoelectric point, Disulfide Bonds, Protein primary structure, Protein Secondary structure, Supersecondary structure, domain, Tertiary structure, quaternary structure, partition chromatography, amino acid residue,peptide unit, Biuret reaction, salting out, salting in, denaturation, renaturation, dialysi, affinity chromatography, 五、问答题

1. 简述SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量的基本原理。 2.简述分子筛层析的基本原理

3.什么是蛋白质的四级结构?以血红蛋白为例说明之.

4. 用CNBr处理含等量的Met,Phe,Asp,Ser,Thr的多肽,释放出肽和单一的高丝氨酸.原5肽用胰凝乳蛋白酶处理的两个碎片,一个比另一个酸性强,酸性碎片有甲硫氨酸.原来肽用羧肽酶A处理,迅速放出Ser,随后放出Thr.推断该5肽的氨基酸排列顺序。

5.水解肽A时,发现其含有等量的Arg,Val,Tyr,Glu,Lys,Ala和Gly七种氨基酸。 1).用胰蛋白酶水解肽A时,得到如下物质:Arg,Ala-Lys和含有Glu,Gly,Tyr,Val的肽B;用胰凝乳蛋白酶水解肽B,产生两个二肽:Val-Tyr和Glu-Gly

2)肽A用羧肽酶短时间处理,产生游离的Glu是第一个可鉴定的氨基酸 3)肽A用DNFB法分析N端氨基酸,产生出DNP-Ala 问该肽A的氨基酸排列顺序是怎样的? 6. 简述等电聚焦技术的基本原理。 7.简述蛋白质变性后的性质变化。

8.简述阳离子交换树脂分离氨基酸混合物的基本原理与操作。

9.写出Glu和Arg两种氨基酸的解离式，并计算等电点。各解离基团的pK值见参考书，

10.依据侧链基团的极性，20种组成蛋白质的氨基酸可以分为哪几类？

5.水解肽A时,发现其含有等量的Arg,Val,Tyr,Glu,Lys,Ala和Gly七种氨基酸。 1).用胰蛋白酶水解肽A时,得到如下物质:Arg,Ala-Lys和含有Glu,Gly,Tyr,Val的肽B;用胰凝乳蛋白酶水解肽B,产生两个二肽:Val-Tyr和Glu-Gly

2)肽A用羧肽酶短时间处理,产生游离的Glu是第一个可鉴定的氨基酸 3)肽A用DNFB法分析N端氨基酸,产生出DNP-Ala 问该肽A的氨基酸排列顺序是怎样的? 6. 简述等电聚焦技术的基本原理。 7.简述蛋白质变性后的性质变化。

8.简述阳离子交换树脂分离氨基酸混合物的基本原理与操作。

9.写出Glu和Arg两种氨基酸的解离式，并计算等电点。各解离基团的pK值见参考书，

10.依据侧链基团的极性，20种组成蛋白质的氨基酸可以分为哪几类？

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