课题菊花的组织培养学案人教版选修

课题1 菊花的组织培养

目标导航 1.了解植物组织培养技术在生产中的应用和MS固体培养基的配方。2.熟悉植物组织培养的基本过程和影响植物组织培养的因素。3.理解细胞分化的概念及离体植物细胞的脱分化和再分化。

一、基础知识

1．植物组织培养的基本过程

(1)细胞全能性的表达：________的植物组织或细胞，在一定的____________、________和________________的作用下，发育成完整植株的过程。

(2)细胞分化：在植物的________过程中，细胞在________、________和____________上都会出现________的差异，形成这些差异的过程叫做细胞分化。 (3)植物组织培养的基本过程

离体的植物器官、组织或细胞(又叫________)――→愈伤组织――→胚状体、丛芽等 生长

――→新个体

①愈伤组织的特点：细胞________________，是一群________________的呈________________的薄壁细胞。

②脱分化(去分化)：由____________的植物组织或细胞产生____________的过程。 ③再分化：由________________________重新分化成根或芽等器官的过程。

(4)条件：________的植物组织或细胞，在一定的________、________和其他外界条件的作用下就可能表现出全能性，发育成完整植株。离体的植物组织或细胞叫做________。 2．影响植物组织培养的因素

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(1)培养材料的影响：不同的植物组织，培养的难易程度____________。对于同一种植物材料，材料的________、________________等也会影响实验结果。因此菊花的组织培养，一般选择________________的茎________部________的侧枝。

(2)营养物质的影响：常用的________培养基，主要成分包括____________、____________、________以及蔗糖等。其中____________和____________提供植物细胞所必需的无机盐；________提供碳源，维持细胞渗透压。

(3)植物激素的影响：MS培养基常需添加植物激素。其中________和____________是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，这两种激素的________、________________以及____________等，都会影响实验结果。

下表是关于两种植物激素在组织培养过程中的作用。 使用顺序或用量比 先使用生长素，后使用细胞分裂素 先使用细胞分裂素，后使用生长素 同时使用 生长素用量/细胞分裂素用量，比值高 生长素用量/细胞分裂素用量，比值低 生长素用量/细胞分裂素用量，比值适中 实验结果 有利于__________，但细胞________ 细胞____________ 分化频率____ 有利于____的分化、抑制____的形成 有利于____的分化、抑制____的形成 促进________的形成 (4)环境因素的影响：________、________、________等条件也能影响植物组织培养。 二、植物组织培养的操作流程

1．制备MS固体培养基：将各种营养成分按比例配制成________________。利用母液配制菊花组织培养所需要的培养基，菊花的组织培养比较容易，因此可以不加激素，而如果是其他植物的组织培养，则要配制成三种培养基，即____________、________________和________________。配制菊花的组织培养的培养基时先将称好的琼脂加入800 mL 蒸馏水

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中，加热使________熔化；然后加入______________30 g，加入一定量的________，充分混匀后加蒸馏水定容至1 000 mL，调节________；最后分装到锥形瓶中，每瓶分装50 mL或100 mL。用包在纱布中的棉塞封严瓶口，外面包一层牛皮纸。将配制好的培养基放入________________锅，在121℃下灭菌15 min。

2．外植物体消毒：选取生长旺盛的菊花的嫩枝，先用清水洗净，再用体积分数为________________浸泡6～7 s后，立即取出并用无菌水清洗，取出后吸干水分再放入质量分数为________________中浸泡 1～2 min。取出后，在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液。

3．接种：在超净工作台上铺上无菌滤纸，将已消毒的菊花茎段切成小段(长0.5～1.0 cm)，迅速接种到培养基上。插入时应注意方向，使嫩茎的形态学下端接触培养基，不要________。每瓶接种6～8块嫩茎。接种后，将锥形瓶的瓶口在酒精灯火焰上转动灼烧一遍，将封口膜重新扎好，贴上标签，做好记录。

4．培养：接种后的锥形瓶放在__________中培养。培养温度应控制在18～22℃，并且每日用日光灯光照12 h，并定期进行________，保持适宜的________和________。

5．移栽：当小苗长到5～6 cm，基部形成根原基的时候，即可进行移栽。试管苗是在无菌、充分营养供给、适宜的光照和温度以及100%相对湿度环境中生长的。刚出瓶的试管苗对外界环境不太适应。将试管苗培养瓶的瓶口敞开一半，放置在20～25℃的遮阴环境中，适应7～14 d。若试管苗不萎蔫、有新生长的趋势，便可将试管苗取出，小心洗净粘在根上的培养基，植入盛有________________________等材料的花盆中，浇足水分，罩上带孔的塑料薄膜，将花盆放置在20～25℃的阴凉处3～5 d。待幼苗长出新叶时，揭去塑料薄膜，再过7～10 d，幼苗即可移栽到土壤里。

6．栽培：将幼苗移载后，每天观察并记录幼菌生长情况，适时浇水、施肥，直至开花。

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提醒 (1)植物组织培养一定要采用无菌技术。 (2)实验选材是实验成功的关键。

知识点一 植物组织培养的基本过程及影响因素 1．请回答下列有关植物组织培养的几个问题。

(1)离体植物组织和细胞培养常用的一种培养基是____________，其主要成分中的大量元素有______________，培养基中常用的两种植物激素是________和____________，两者使用时的__________、__________、____________等，都会影响实验的结果。 (2)下图表示植物组织培养的部分过程： 离体的器官、①②

――→A――→植物体

组织或细胞

①过程是________，②过程是________，A是________。

(3)组织培养过程中还需要维持一定的外界条件，一是要有适宜的________，二是________。

2．下列关于影响植物组织培养因素的说法，正确的是( )

A．不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料培养的难易程度相同 B．在植物组织培养中，培养基中必须添加植物激素 C．植物激素中，生长素和细胞分裂素的作用是相互独立的 D．pH、温度、光照条件等对植物组织培养也特别重要 知识点二 植物组织培养操作过程

3．下列哪组符合菊花组织培养的基本步骤( )

A．制备MS培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培 B．制备MS培养基→外植体消毒→接种→培养→栽培→移栽

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C．制备MS培养基→外植体消毒→接种→栽培→培养→移栽 D．制备MS培养基→外植体消毒→接种→移栽→培养→栽培 4．关于植物组织培养的内容，以下说法错误的是( ) A．一般来说容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养 B．对菊花茎段进行组织培养，不加植物激素也能成功 C．接种后的锥形瓶放入无菌箱中，给予适宜的温度和光照即可 D．移栽生根的试管苗之前，先打开瓶口，让试管苗在培养间生长几日 参考答案

一、1.(1)离体 营养物质 激素 其他外界条件 (2)个体发育 形态 结构 生理功能 稳定性 (3)外植体 脱分化 再分化 ①排列疏松而无规则 高度液泡化 无定形状态 ②高度分化 愈伤组织 ③脱分化产生的愈伤组织 (4)离体 营养物质 激素 外植体 2．(1)差别很大 年龄 保存时间的长短 未开花植株 上 新萌生 (2)MS 大量元素 微量元素 有机物 大量元素 微量元素 蔗糖 (3)生长素 细胞分裂素 浓度 使用的先后顺序 用量的比例 细胞分裂 不分化 既分裂又分化 提高 根 芽 芽 根 愈伤组织 (4)pH 温度 光照

二、1.MS培养基母液 脱分化培养基 生芽培养基 生根培养基 琼脂 蔗糖 各种母液 pH 高压蒸汽灭菌

2．70%的酒精 0.1%的氯化汞溶液 3.倒插 4.无菌锅 消毒 温度 光照 5.消过毒的蛭石或珍珠岩 对点训练

1．(1)MS培养基 N、P、K、Ca、Mg、S 生长素(类) 细胞分裂素(类) 浓度 使用的先后顺序 用量的比例 (2)脱分化 再分化 愈伤组织 (3)温度 无菌(环境)

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