综合性实验一 可见分光光度计的性能检查

综合性实验

第一部分 可见分光光度计的性能检查

一、实验目的

1．熟悉分光光度计的性能检验方法。 2．掌握可见分光光度计的使用。 二、实验原理

1．分光光度计的性能好坏，直接影响到测定结果的准确性，因此新购仪器及使用一定时间后，均需进行检验调整；

2．利用镨钕滤光片在529nm波长处的吸收峰来检验波长的准确度； 3．同种厚度的比色皿，由于材料及工艺等原因，往往造成透光率的不一致，从而影响测定结果，故在使用时需加以选择配对。

三、仪器与试剂

仪器：722型可见分光光度计，镨钕玻璃滤光片 试剂： 0.02mol/L K2Cr2O7溶液 ，蒸馏水 四、实验内容 1. 稳定度

(1) 零点稳定度: 仪器在光电检测器不受光（暗盒盖被打开）的条件下，用零点调节器调至透射率零点，观察3 min，读取透射率示值的最大漂移量ΔT。规定ΔT≤±0.2%。

（2）光电流稳定度：仪器波长分别置于仪器光谱范围（400-800nm）两端往中间靠10 nm（410nm与790nm）处，调整零点后，关闭暗盒盖（即打开光门），使光电检测器受光，先照射5 nim。后用“100%”调节器将仪器透射率调至95％ (数显仪器调至100％ )处，再观察5min，读取透射率示值的最大漂移量ΔT。规定ΔT≤±0.8 %。

数据记录表 光电流稳定度 零点稳定度 410nm 790nm T%=0.0,观察3min ΔT= T%=100.0,观察5min T%=100.0,观察5min ΔT= ΔT= 结论（示例）：经检验零点稳定度符合规定（规定ΔT≤±0.2%），光电流稳定度符合规定（规定ΔT≤±0.8 %）。

2 波长准确度与波长重复性

以镨钕玻璃滤光片的最大吸收波长529nm作为标准波长，从524nm起至534nm止，每一纳米测一透射率，按上述过程连续测量3次，记录波长测量值λi。

注意点：本实验以空气为空白，每改变一个波长必须重新校准空气的100%。 波长准确度按下式计算：

13??????i??s?

31式中 λi—各次最大吸收波长测量值(nm)； λs—相应波长标准值(nm)。

数据记录表 测定波长 第1次 T% 第2次 T% 第3次 T% 524 525 526 527 528 529 530 531 532 533 534 计算：Δλ=？ 结论（示例）：经检验Δλ=+1nm,符合规定（规定Δλ≤±2nm）

波长重复性按下式计算：

13???max?i???i

3i?1计算：δλ=？ 结论（示例）：经检验δ

λ

=1nm,符合规定（规定δλ≤1nm）

3 吸收池的配套性

将波长置于440 nm处，在4个同一光径厚度的吸收池中，分别注入重铬酸钾稀溶液(含铬量约30 mg?L-1)；或在仪器波长700 nm处，分别注入蒸馏水。将其中一池的透射率调至95％(数显仪器100％)，测量其它各池的透射率，记录测定数据。规定各池百分透光率之差≤0.5%。

数据记录表(测定波长：770nm,溶剂：蒸馏水) 池号 1 2 3 4 T% 结论（示例）：1号与3号池透光率之差符合规定，2与4号池透光率之差不符合规定（规定各池百分透光率之差≤0.5%）。

最后选用透射率之差不大于0.5％T的吸收池，配成一套使用。 五、注意事项

1.使用前应进行预热30min，以使仪器达到良好的工作状态。 2.非测试时，应打开暗盒盖（关闭光门），以免检测器长时间受光照射，造成疲劳或损坏。

3.比色皿应手持粗糙面；擦拭透光面的液滴时，用擦镜纸顺一个方向轻轻擦拭，以免磨损透光面。

4.每台仪器所配套的吸收池不能与其它仪器上的吸收池单个调换。 5.实验完毕，洗净比色皿，并倒置沥干后置比色皿盒中保存。 六、提问

1．同种比色皿透光度的差异对测定有何影响？

2．检查分光光度计光电流稳定度及波长准确度对测定有什么实际意义？

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