土壤农化分析实验指导

万钟公司香蕉枯萎病防控研究所常规分析指导手册

土壤农化分析常用指标测定方法

土壤有机质测定

一、原理

170-180℃条件下，用一定浓度的K2Cr2O7- H2SO4溶液（过量）氧化土壤有机质，剩余的K2Cr2O7用FeSO4滴定，由消耗的K2Cr2O7量计算出有机碳量，再乘以常数1.724，即为土壤有机质含量。 二、试剂

1、0.4mol/L（1/6 K2Cr2O7-浓H2SO4）标准溶液：称取经130℃烘干的

K2Cr2O7(AR)39.2245g溶于水中，加热溶解后加入1000ml浓H2SO4定容至2000ml。 2、0.2mol/L FeSO4溶液：称取FeSO4（AR）56g溶于水中，加浓硫酸5ml，稀释至1L。

标定：吸取10.00mL重铬酸钾标准溶液置于250mL锥形瓶中，加入40mL水和3mL浓硫酸，再加3滴邻菲啰啉指示剂，用FeSO4标准溶液滴定至溶液由橙黄色经蓝绿色至棕红色为终点。

3、邻菲啰啉指示剂：称取1.485g邻菲啰啉（C12H8N2·H2O）和0.695g硫酸亚铁（FeSO4·7H2O），溶于100mL水中，形成的红棕色络合物贮于棕色瓶中。 4、石英砂：粉末状 三、实验步骤

称取∠0.25mm风干土0.5xxx-1.0xxxg于干燥试管中，加入少量水润湿样品，准确沿壁缓慢加入10.0ml K2Cr2O7- H2SO4溶液，摇分散土样，盖上小漏斗，放入铁丝笼中。将铁丝笼放入已开启185-190℃油浴锅中（使温度在170-180℃）沸腾准确5分钟，取出稍冷，擦净试管外壁油污（同时做空白实验）；冷却后把溶液全部转移到200-250ml三角瓶中（最后体积控制在60-70ml），加入指示剂3滴，用已知浓度的FeSO4溶液滴定。

四、结果计算

（V0-V）×C×3.0×1000×1.1×1.724

有机质%= ×100 W 式中：

V0：滴定空白所用的FeSO4溶液体积（ml） V ：滴定样品所用的FeSO4溶液体积（ml）

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C ：0.2mol/L FeSO4溶液准确浓度 3.0：1/4碳原子的摩尔质量（g/mol） 1000：将ml换算为L 1.1：氧化校正系数

1.724：土壤有机碳换算成土壤有机质的平均换算系数。 W：烘干土质量（g）

注1：土样称取量视有机质含量而定：含有机质5%左右的土壤称取0.5g；含有机质3%~4%的土壤称取

0.5g~1g；含有机质1%~3%的土壤称取1g~2.5g；含有机质1%以下的称取2.5g以上。如土样滴定数小于空白试验滴定数的1/3时，须减少称样量重做。有机质含量过低的土样，称样量最多不要超过10g。

土壤全氮测定

一、原理

样品在加速剂的参与下，用浓硫酸消煮时，各种含氮有机化合物，经过复杂的

高温分解，转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。碱性条件下蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以标准酸溶液滴定，求出全氮的含量。 二、试剂 1、浓硫酸（CP）

2、10mol/LNaOH:称取400gNaOH（AR）溶于水中定容至1L

3、2% H3BO3指示剂溶液：20gH3BO3溶于1L水中，每升H3BO3溶液中加入甲基红-溴甲酚绿混合指示剂5ml，并用稀酸或稀碱调节至微紫红色，宜现配，不宜久置。

4、混合加速剂：K2SO4：CuSO4：Se=100：10：1即100g K2SO4（CP）、10g CuSO4（cp） 和1g Se粉混合研磨，通过80目筛充分混匀（注意戴口罩），消煮时每毫升硫酸加0.37g混合加速剂。

5、0.02mol/L（1/2H2SO4）标准溶液：吸取浓H2SO42.83ml，加水稀释至5000ml，然后用0.0100mol/L硼砂标定。

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标定：称取1.9068g硼砂（Na2B4O7·10H2O），精确至0.0001g，加水溶解后稀释至500mL，得0.0200mol/L硼砂标准溶液。吸取20.00mL 0.0200mol/L硼砂标准溶液置于100mL锥形瓶中，加1滴甲基红-溴甲酚绿混合指示剂，用盐酸标准溶液滴定至溶液由蓝色变为紫红色为终点。同时做空白试验。

6、甲基红-溴甲酚绿混合指示剂：称取0.099g溴甲酚绿和0.066g甲基红，溶于100mL乙醇中，变色范围pH 4.4(红)―5.4（蓝），贮存期不超过2个月。 三、步骤 1、消煮

称取＜0.15mm风干土样1.×××× g送入干燥的消煮管底部，加入加速剂2g和浓硫酸5ml，摇匀。将消煮管放置电炉上用低温加热10-15分钟，管内反应缓和时可加强火力使消煮管的土液保持微沸，加热的部位不超过瓶中的液面，以防瓶壁温度过高使铵盐受热分解。消煮的温度以硫酸蒸汽在瓶颈上部1/3处冷凝回流为宜。待消煮液和土粒全部变为白色稍带绿色后，再继续消煮1h。消煮完毕，待消煮液稍冷，加水至约消煮管2/3处，冷却后定容。 2、蒸馏

检查装置是否漏气，并通过水的馏出液将管道洗干净。吸取10ml消煮液加入蒸馏器中，于出口处放置一装有5ml 2%H3BO3-指示剂溶液的三角瓶，从蒸馏器的另一入口加入20ml 10mol/L的NaOH，开始蒸馏，至馏出液为60-70ml时可停止蒸馏。

3、用0.02mol/L（1/2H2SO4）标准溶液滴定馏出液由蓝绿色至刚变为紫红色，记录所用的酸标准液体积（ml） 四、结果计算

（V-V0）×C（1/2H2SO4）×14.0×10-3

土壤全氮N（g/kg）= ×1000 m 式中：

V—滴定样品时所用的酸标准液体积（ml）； V0—滴定空白时所用的酸标准液的体积（ml）； C—0.02mol/L（1/2H2SO4）酸标准液的浓度；

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14.0—氮原子的摩尔质量（g/mol）； 10-3—将ml换算成L； m—烘干土的质量（g）

土壤铵态氮、硝态氮测定

一、原理

土壤用氯化钾溶液浸提，浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，借以光度法测定。含氮量在0.05mg/L～0.5mg/L范围内，吸光度与铵态氮含量成正比。

二、试剂

1、氯化钾溶液：2mol/L，称取149.1g氯化钾，溶于水中，再稀释至1000mL。

2、Buffer（R1）:称取酒石酸钾钠（KNaC4H4O6. 4H2O）25g，磷酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O）17.9g ,氢氧化钠（NaOH）27g用超纯水定容至500ml，加brij-35 6-8滴；数周内稳定 3、Salycilate B（R2）：称取水杨酸钠（NaC7H5O3）150g，硝普钠（Na2Fe(CN)5NO, 5H2O）0.3g，用超纯水溶解定容至1000ml；3周内稳定

4、Dichloroisocyanuric acid Na salt C（R3）：吸取次氯酸钠（NaClO）6ml，用超纯水定容至100ml，1周内稳定

5、100ppm NH4-N标液：称取经60℃烘干8h的NH4Cl 0.3822g溶于800ml超纯水，定容至1000ml 三、实验步骤

称取＜1mm风干土样5.00g于50ml塑料瓶，加入25ml 2mol/LKCl提取液，盖紧瓶盖，摇匀，在振荡机上于20-25℃振荡30min（振荡频率：180±20r/min），干过滤于50ml三角瓶中，同时做空白实验。上连续流动分析仪测试 标准曲线：

铵态氮标曲：吸取20ml 100PPM氨氮标液于100ml容量瓶，用2mol/LKCl浸提液定容，即20ppm氨氮标液，分别吸取20ppm氨氮标液0，1.00，2.00，4.00，6.00，8.00，10.00ml于50ml容量瓶，用2mol/LKCl浸提液定容，即：0，0.4，0.8，1.2，2.4，3.2，4.0ppm 硝态氮标曲：吸取20ml 100PPM硝氮标液于100ml容量瓶，用2mol/LKCl浸提液定容，即20ppm硝氮标液，分别吸取20ppm硝氮标液0，1.00，2.00，4.00，6.00，8.00，10.00ml于50ml容量瓶，用2mol/LKCl浸提液定容，即：0，0.4，0.8，1.2，2.4，3.2，4.0ppm

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原液上机，若有超标则吸取5ml待测液于25ml容量瓶，用2mol/LKCl浸提液定容。 四、结果计算

ρ.V .D

铵态氮或硝态氮（N mg/kg）= ×1000 m×1000

ρ—查标准曲线所得待测液中铵态氮或硝态氮的浓度，μg/ml V—显示液体积，ml D—分取倍数

1000—分别将μg换算成mg和将g换算成kg m—土壤样品质量，g

土壤碱解氮的测定

一、原理

碱解扩散法，使碱解、还原和扩散吸收各反应同时进行，操作简便，测定结果再现性好，

与作物需氮情况有一定相关性。用氢氧化钠溶液处理土壤，硝态氮含量较高的土壤，须加还原剂还原；在扩散皿中，土壤于碱性条件下进行水解，使易水解态氮经碱解转化为氨态氮，扩散后由硼酸溶液吸收，再用盐酸标准溶液滴定而计算水解性氮量。潜育土壤由于硝态氮含量较少，不须加还原剂还原，可降低氢氧化钠溶液浓度。 二、试剂

1、1.07mol/L NaOH溶液：称取42.8gNaOH溶于水中，定容至1L 2、0.02mol/L（1/2 H2SO4）酸标准溶液

标定：称取0.9534g硼砂（Na2B4O7·10H2O），精确至0.0001g，加水溶解后稀释至500mL，

得0.0100mol/L硼砂标准溶液。吸取20.00mL 0.0100mol/L硼砂标准溶液置于100mL锥形瓶中，加1滴甲基红-溴甲酚绿混合指示剂，用酸标准溶液滴定至溶液由蓝色变为紫红色为终点。同时做空白试验。

3、2%H3BO3：20g H3BO3溶于1L水中，每100ml H3BO3溶液中加入甲基红-溴甲酚绿混合指示剂2ml并用稀酸或稀碱调节至微紫红色（PH=4.5）, 硼酸指示剂溶液如混合过久，将有终点不灵敏的现象发生。

4、甲基红-溴甲酚绿混合指示剂：称取0.099g溴甲酚绿和0.066g甲基红，溶于100mL乙醇中，变色范围pH 4.4(红)―5.4(蓝)，贮存期不超过2个月。

5、碱性胶：取阿拉伯胶40.0g和水50ml在烧杯中热温至70-80℃搅拌促溶，约1h

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后放冷。加入甘油20ml和饱和K2CO3水溶液20ml，搅拌，放冷。离心除去泡沫和不溶物，清液贮于具塞玻璃瓶中备用。

6、FeSO4·7H2O粉末：将FeSO4·7H2O（CP）磨细，装入密封瓶，存于阴凉处 7、AgSO4饱和溶液

三、步骤

称取＜1mm风干土样2.00g及FeSO4·7H2O粉末0.20g，置于洁净的扩散皿外室，轻轻转扩散皿，使土样与FeSO4·7H2O粉末均匀地铺平。在扩散皿外室加入0.1ml饱和AgSO4溶液。

在扩散皿内室加入2%H3BO3 2ml，然后在扩散皿外室边缘涂抹碱性胶，盖上毛玻璃，旋转数次，使皿边缘与毛玻璃完全粘合。在渐渐转开毛玻璃一边，使扩散皿外室露出一条狭缝，迅速加入1.07mol/L NaOH溶液10ml，立即盖严，轻轻旋转扩散皿，让碱液盖住左右土壤。再用橡皮筋固定，随后小心平放在40±1℃恒温箱中，碱解扩散24±0.5h后取出。内室吸收液中的NH3用酸标准溶液滴定。

注1：由于碱性胶液的碱性很强，在涂胶液和洗涤扩散皿时，必须细心，慎防污染内室，致使造成误差。也可采用碱性甘油（甘油中溶解数十粒固体氢氧化钠），易清洗碱性污染。

注2：滴定时要用细玻棒小心搅动吸收液，切不可摇动扩散皿。接近终点时，可用细玻棒少沾滴定管尖端的盐酸标准溶液，以防滴过终点。

四、结果计算

C×（V-V0）×14.0

碱解氮N（mg/kg）= ×1000 m

式中：C—0.02mol/L（1/2H2SO4）酸标准溶液的浓度，mol/L V—样品滴定时用去酸标准溶液的体积，ml V0—空白实验滴定时用去酸标准溶液的体积，ml 14.0—氮原子的摩尔质量，g/mol 1000—将L换算成ml

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m—烘干土质量，g

两次平行测定允许误差为5mg/kg

土壤有效硫测定

一、原理

酸性土壤用磷酸盐（石灰性土壤用氯化钙）浸提，浸出液中少量有机质用过氧化氢去除，硫酸根用硫酸钡比浊法测定。 二、试剂

1，磷酸盐浸提剂：称取Ca（H2PO4）2.H2O(CP) 2.04g溶于水中，稀释至1L

2，30%H2O2 3，HCl 1：4溶液 4，氯化钡晶粒，≤0.25mm

5，100μg/L S标液：称取K2SO4（AR）0.5436g溶于水，定容至1L 三、步骤 1、 浸提

称取风干土10.00g于100ml三角瓶中，加浸提剂50ml，振荡1h，干过滤 2、比浊

吸取滤液25ml于100ml三角瓶中，在电热板或沙浴上加热，用过氧化氢3-5滴氧化有机物。待有机物分解完全后继续煮沸，除尽过氧化氢。加入1：4盐酸1ml，用水洗入25ml容量瓶中，加入阿拉伯胶溶液2ml，用水定容。倒入100ml烧杯中，加氯化钡晶粒1g，用电磁搅拌器搅拌1min。5-30min内用3cm比色槽440nm比浊，同时做空白实验。 3工作曲线

将硫标准溶液稀释至ρ（s）=10μg/ml。吸取0.00，1.00，3.00，5.00，8.00，10.00，12.00ml分别放入25ml容量瓶中，加入1ml盐酸和2ml阿拉伯胶溶液，用水定容。得到0.00，0.40，1.20，2.00，3.20，4.00，4.80μg/ml S标准系列溶液。转入100ml烧杯，加入1g氯化钡晶粒，电磁搅拌器搅拌1min后在5-30min内440nm比浊。

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四、结果计算

ρ×V×ts 土壤有效硫 S（mg/kg）= m 式中：

ρ—测定液中硫的质量浓度，μg/ml V—测定时定容体积，ml ts—分取倍数0--- m—烘干土质量，g 允许相对偏差≤10%

土壤全磷的测定

一、原理

用高氯酸分解样品,因为它是一种强酸,又是一种强氧化剂,能氧化有机质,分解矿物质,而且高氯酸的脱水作用很强,有助于胶状硅的脱水,并能与Fe3+ 络合,在磷的比色测定中抑制了硅和铁的干扰。硫酸的存在提高消化液的温度，同时防止消化过程中溶液蒸干，以利于消化作用的顺利进行。本法用于一般土壤样品分解率达97%~98%，但对红壤性土壤样品分解率只有95%左右。溶液中的磷测定采用钼锑抗比色法。 二、试剂

1、

NaOH

2、无水乙醇

3、100g/L碳酸钠溶液：10g无水碳酸钠溶于水后，定容至100mL。 4、50mL/L硫酸溶液:吸取5mL浓硫酸稀释定容至100 mL。 5、3moL/L硫酸溶液:量取160mL浓硫酸稀释定容至1000 mL。

6、硫酸钼锑贮备液：量取153mL浓硫酸，缓缓加入400mL水中，不断搅拌，

冷却。加入10g钼酸铵搅拌，溶解完全。然后加入0.5g酒石酸锑钾搅拌溶解。定容至1000mL,贮存于棕色瓶中。

7、钼锑抗显色剂：称取1.5g抗坏血酸溶于100mL钼锑贮备液中，现配现用。

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8、磷标准贮备液：准确称取经105℃烘干2h的磷酸二氢钾（GR）0.4390g，

用水溶解后，加入5mL浓硫酸，然后加水定容至1000mL，该溶液含磷100mg/L。

三、步骤 1、待测液的制备

准确称取<0.15mm土样0.5000~1.0000g,置于50mL消煮管中,以少量水湿润后,加浓硫酸8mL,摇匀后,再加70%~72%HClO4 10滴,摇匀,管口加一小漏斗,置于电炉上消煮(至溶液开始转白后继续消煮)20min。全部消煮时间为40~60min，同时做空白。将冷却的消煮液加30~40mL水转移至100mL容量瓶中，冷却后定容。 2、测定

吸取澄清液或滤液5mL至50mL容量瓶中，加水稀释至30mL,加2，4-二硝基苯酚指示剂2滴，滴加4mol/LNaOH溶液直至溶液变成黄色，再加1N H2SO41滴，使溶液黄色刚好褪去。然后加钼锑抗显色剂5mL,加水定容至50mL,摇匀。30min后700nm波长进行比色。 3、标准曲线

准确吸取5μg/mL,P标准溶液0、1、2、4、6、8、10mL,分别放入50mL容量瓶中，加水至约30mL,再加空白试验定容后的消煮液5mL，加入2，4-二硝基苯酚指示剂2滴调节酸度，然后加入钼锑抗显色剂5mL，最后用水定容至50mL。30min后700nm比色。各瓶比色液磷的浓度分别为0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0μg/mLP。 四、结果计算

ρ×V×V2

土壤全磷P(g/Kg)= ×10-3 m×V1 式中：

ρ---待测液中磷的质量浓度，μg/ mL V ---样品制备液的体积，mL m ---烘干土质量，g V1---吸取滤液体积，mL

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V2---待测液体积，mL

10-3 –将μg换算成每千克土壤中含磷的克数的乘数。

酸性土壤有效磷的测定

一、原理

酸性土壤中磷的形态主要为各种磷酸铁铝化合物，用酸性氟化铵浸提，则形成氟铝化铵和氟铁化铵的络合物，磷酸根离子被释放提取到溶液中来，翻译如下：

3NH4F+3HF+AlPO4→H3PO4+（NH4）3AlF6 3NH4F+3HF+FePO4→H3PO4+（NH4）3FeF6

同时，浸提液自身所带的酸性也能溶解土壤中一部分比较活泼的磷酸钙类化合物，并防止在浸提过程中的磷酸钙的次生沉淀反应。

被浸提出来的磷酸，在一定酸度下与钼酸铵作用生成磷钼杂多酸，当用抗坏血酸还原时，可生成蓝色的磷钼蓝，溶液蓝色深浅与磷的含量成正比关系。 二、试剂

1、0.5mol/L盐酸溶液：20.2 mL浓盐酸用蒸馏水稀释至500 mL。

2、1mol/L氟化铵溶液：溶解NH4F 37g于水中，稀释至1L，贮存于塑料瓶中。 3、浸提剂：分别吸取1.0mol/LNH4F溶液15 mL和0.5mol/LHCl溶液25 mL，定容至500mL。 4、钼锑抗显色剂。 三、步骤

称<1mm风干土2.00g于干燥塑料瓶中→加入20.0mL0.03mol/LNH4F-0.025mol/L HCl→加塞，振荡30min→立即干过滤→吸取滤液5.0 mL至50 mL容量瓶中→加入10.0mL0.8mol/LH3BO3→加纯水20ml左右→加3滴2，6-二硝基酚→用4mol/LNaOH调至刚显黄色→加入1~2滴稀HCl至黄色刚好褪去→加入5.0 mL钼锑抗→定容→30min后在722分光光度计上以700nm波长比色；同时做空白试验。

标准曲线的配置：分别吸取标准液0.0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0(mL)

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ρ0—标准曲线查得空白液中Cu或Zn的质量浓度（μg/ml） V—加入浸提剂的体积，ml m—烘干土的质量，g

土壤交换性钙、镁测定

一、原理

用1mol/L中性NH4Ac溶液反复处理土壤，使土壤成为饱和土。浸出液包含全部交换性盐基，它们都以醋酸盐状态存在。浸出液中的钙、镁用中性乙酸铵定容后，加入释放剂Sr消除铝、硅、磷干扰后，可用原子吸收分光光度法测定。 二、试剂

1、1mol/L中性NH4OAc（PH=7）溶液：称取化学纯CH3COONH4 77.09g加水溶解，定容至1L，用HOAc或NH4OH调节至PH=7.0

2、3%氯化锶溶液，上机时使配制的溶液中含锶1000mg/L

3、1000mg/L Ca标准溶液：称取CaCO3（AR，110℃烘4h）2.4972g溶于1mol/L HCl中，煮沸赶去CO2，用水洗入1L容量瓶中定容。

4、1000mg/L Mg标准溶液：称取金属镁（光谱纯）1.0000g溶于少量6mol/L HCl中，用水洗入1L容量瓶定容。 三、步骤 1、制备待测液

称取过1mm筛的风干土样1.00g，放入10ml离心管中，沿离心管壁加入少量1mol/L中性乙酸铵溶液，用橡皮头玻璃棒搅拌土样，使其成为泥浆状态，然后用乙酸铵溶液洗涤橡皮头玻璃棒，洗液收入离心管内。

将离心管成对放在已调平的粗天平两端，用乙酸铵溶液使之质量平衡，平衡好的离心管对称放入离心机中，以3000~400r/min的速度离心3~5min，将清液过滤到100ml容量瓶备用。如此用1mo/L的乙酸铵溶液反复处理3~5次，直到最后浸出液中无钙离子反应后，用1mol/L乙酸铵定容。 2、样品测定

吸取1mol/L乙酸铵处理土壤的浸出液20.00ml于25ml容量瓶中，加入3%氯化锶溶液2.5ml，用1mol/L乙酸铵溶液定容。定容后的溶液直接在原子吸收分光光度计上测定。 3、标准曲线配制

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分别吸取50μg/ml的Ca标准溶液：0、1、2、4、8、12ml和50μg/ml的Mg标准溶液：0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.2ml于50ml容量瓶中，加入3%氯化锶溶液5ml，用1mol/L乙酸铵溶液定容，即为含Ca：0、1.0、2.0、4.0、8.0、12.0ppm，含Mg：0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.2ppm标准系列溶液，直接在原子吸收分光光度计上测定。 四、结果计算

ρ×V×ts

土壤交换性钙（1/2Ca 2+ ，cmol/kg）= ×100 m×20.04×1000

ρ×V×ts 土壤交换性镁（1/2Mg 2+ ，cmol/kg）= ×100 m×12.153×1000

式中：

ρ—从工作曲线上查得待测液的钙、镁质量浓度，μg/ml V—上机检测时的体积，ml ts—分取倍数 m—烘干土质量，g

20.4—1/2 Ca 2+的摩尔质量，g/mol

12.153—1/2 Mg 2+的摩尔质量，g/mol 1000—将微克换算成毫克。

植物全氮、全磷含量测定

一、原理

植物样品在浓硫酸溶液中，历经脱水碳化、氧化等一系列作用，而氧化剂过氧化氢在热浓硫酸溶液中分解出的活性氧原子具有强烈的氧化作用，分解浓硫酸没有破坏的有机物和碳。使有机氮、磷等转化为无机铵盐和磷酸盐等。生成的铵盐可用纳氏比色法测定，磷酸盐可用钼锑抗比色法测定。 二、试剂 1、浓硫酸 2、30%H2O2

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3、纳氏试剂：称取HgI 9.0g溶于1000ml 1.2%KI溶液中

4、螯合剂：称取500g酒石酸钾钠和10gNaOH置于1000ml烧杯，加蒸馏水500ml，沸水浴中加热3~4h，冷却定容至1L

5、保护胶：称取阿拉伯胶2.0g置于1000ml烧杯，加水500ml溶解，再加1.6mol/L NaOH 10ml和纳氏试剂2ml，定容至1L

6、1.6mol/L NaOH：称取64.0gNaOH，溶解定容至1000ml

7、100mg/L N（NH4-N）标准溶液：称取烘干NH4Cl（AR，烘干2h）0.3817g溶于水中，定容至1000ml 8、钼锑抗显色剂

9、4mol/L NaOH溶液，1mol/L H2SO4溶液，2，4-二硝基酚指示剂。

10、50mg/L P标准溶液：准确称取经105℃烘干的KH2PO4 0.2195g，溶解，移入1000ml容量瓶，加水至约400ml，加浓硫酸5ml，用水定容。装入塑料瓶中低温保存备用。 三、步骤 1、样品的消煮

称取样品0.06**~0.08**g于干燥的100ml消煮管中，加水润湿，沿壁缓缓加入浓硫酸3ml，边加边转动消煮管，盖上弯颈小漏斗，低温消煮，冒白烟时逐渐升高温度（保证微沸状态）。当溶液呈棕色时加入5滴H2O2，再煮……至完全清亮后再煮5~10min，取出，冷却，定容。 2、样品测定 ○1，氮的测定

法一、 用移液管准确移取待测液1.0ml置于50ml容量瓶中，加蒸馏水25ml，加混合试剂16.5ml，定容，摇匀，半小时后，在722型分光光度计上用490nm波长进行比色。以空白实验液为参比调零。

标准曲线：准确吸取10ppm标准液0、1、2、3、4、5、6、7ml分别注入7个50ml容量瓶，各加空白液1ml，蒸馏水25ml，上述混合试剂16.5ml，定容，摇匀，半小时后在722型分光光度计上用490nm波长比色

法二、用移液管准确移取待测液5.0ml于25ml容量瓶，用去离子水稀释定容至刻度，上连续流动分析仪比色。

标准曲线：准确吸取20ppm标准液0、0.5、1、2、4、6、8、10ml于50ml容量瓶，用去离子水定容至刻度，即为：0、0.2、0.4、0.8、1.6、2.4、3.2、4.0ppm，上连续流动分析仪

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比色。

○2，磷的测定

用移液管准确吸取2.0ml待测液于50ml容量瓶，用水稀释至30ml，加2，4-二硝基酚2滴，用稀NaOH溶液和稀H2SO4溶液调节PH至溶液刚呈微黄色。然后加入钼锑抗显示剂5.0ml，摇匀，用水定容，放置30min，在分光光度计上用700nm比色。

标准曲线：分别吸取5ppm标准P溶液：1、1、2、3、4、5、6ml于50ml容量瓶中，加水稀释至约30ml，加空白液2ml，加指示剂，调酸度，加显色剂，定容，摇匀，30min后比色。

四、结果计算

C×V×ts

植物全氮、磷%= ×100 m×106 式中：

C—从标准曲线查得的显色液N、P的质量浓度，μg/ml V—显色液体积，ml ts—分取倍数 m—干样品质量，g 106—克换算成微克

植物样品中K、Ca、Mg、Fe、Mn、Cu、Zn的测定

一、原理

植物样品经过低温加热碳化和高温灰化以后，以稀盐酸煮沸，溶解灰分中的K、Ca、Mg、Fe、Mn、Cu、Zn等阳离子，可用原子吸收分光光度计测定。 二、试剂 1、10%盐酸 2、2%盐酸 3、5%氯化锶溶液

4、K、Ca、Mg、Fe、Mn、Cu、Zn标准溶液 三、步骤 1、样品的制备

准确称取1.****g样品于瓷坩埚中，加盖，留一小缝，放置电炉上先以低温（电炉丝暗红）

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加热至不再冒烟。逐渐升高温度至最大，灰化至样品呈灰白色即为灰化完全。然后转移至马弗炉中以500±20℃加热2h。冷却后先用少量水润湿样品，加入10ml 10%盐酸，放置低温电炉上煮至微沸，用玻璃棒搅拌并迅速转移过滤至100ml容量瓶中，剩下的样品再加入10ml 10%盐酸转移一次。用去离子水反复洗涤坩埚至转移完全，并洗涤滤纸，定容备用。 2、样品的测定 a．K的测定

吸取母液1ml至50ml容量瓶中，用水稀释定容，可用火焰光度计测定。 b．Ca、Mg的测定

吸取母液1ml至50ml容量瓶中，加入5%氯化锶溶液2ml，用去离子水定容，可用原子吸收分光光度计测定

C．Fe、Mn、Cu、Zn测定

Fe、Cu、Zn可原液上机，用原子吸收分光光度计测定，Mn需稀释5倍上机 3、标准曲线 a．钾标准曲线

分别吸取100mg/L K标准溶液0、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml于50ml容量瓶中，分别加入1ml或2ml 10%盐酸，用水定容，即为：0、1.0、2.0、4.0、8.0、12.0、16.0、20.0ppm，火焰光度计测定。 b．Ca、Mg标准曲线

分别吸取50mg/L Ca标液，5mg/L Mg标液：0、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0至50ml容量瓶，加入2%盐酸1ml，5%氯化锶溶液2ml，定容 c．Fe、Mn、Cu、Zn标准曲线

Fe标线：分别吸取50mg/L Fe标液：0、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0ml至50ml容量瓶中，加入10%盐酸10ml，定容，即为：0、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0ppm标准系列溶液

Mn标线：分别吸取50mg/L Mn标液：0、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0ml至50ml容量瓶，加入10%盐酸10ml（若样品稀释5倍，则至需要加盐酸2ml），定容

Cu标线：分别吸取1.0mg/L Cu标液0、1.25、2.5、5、7.5、10.0ml至50ml容量瓶中，加入10%盐酸10ml，定容。

Zn标线：分别吸取5mg/L Zn标液0、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0ml至50ml容量瓶中，加入10%盐酸10ml，定容。Cu、Zn标线可同时配制。

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四、结果计算

C×V×ts

K、Ca、Mg（%）= ×100 m×106 式中：

C—从标准曲线查得的显色液K、Ca、Mg的质量浓度，μg/ml V—显色液体积，ml ts—分取倍数 m—干样品质量，g 106—克换算成微克

C×V×ts

Fe、Mn、Cu、Zn（mg/kg）= m 式中：

C—从标准曲线查得的显色液Fe、Mn、Cu、Zn的质量浓度，μg/ml V—显色液体积，ml ts—分取倍数 m—干样品质量，g

植物硫含量测定

一、原理

植物中的硫经浓硝酸、高氯酸氧化后，以硫酸根的形式存在，与Ba离子反应生成BaSO4白色沉淀，搅拌后以悬浊液存在，通过比浊可以定量。 二、试剂

1、HNO3（二级，比重1.42），HCLO4（二级，70~72%），HCl（二级，比重1.18） 2、缓冲盐溶液：40g MgCl2·6H2O，4.1g NaOAc，0.83g KNO3和28ml 95%酒精，用水溶解后稀释至1L

3、BaCl2·2H2O（二级），筛选0.25~0.5mm之间晶粒 4、50μg/ml S标准溶液：0.2718g K2SO4溶于水中，定容至1L 三、步骤

称取0.5****g样品（0.5mm）于50ml消煮管，加入2颗玻璃珠和3ml浓HNO3，管口加盖小漏斗，放置过夜。电炉加热至150℃，消煮1小时。通过小漏斗加入2ml 60~70%HClO4,

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慢慢加温至235℃消煮2小时，除去漏斗，加1ml HCl，在150℃下加热20min。取下冷却，加35ml水和10ml缓冲盐溶液，定容至50ml。过滤至150ml烧杯中，加0.3g BaCl2·2H2O晶粒，电磁搅拌1min。取下静置1min后在分光光度计上用波长440nm，3cm比色槽比浊。 工作曲线的绘制：分别吸取50μg/ml S标准液0、2、4、6、8、10、12ml于50ml容量瓶，稀释至30ml，加10ml缓冲盐溶液和2ml 20%HCl，定容至50ml。加0.3gBaCl2·2H2O于电磁搅拌器上搅拌1min，同上法比浊后绘制工作曲线。标准曲线S浓度（μg/ml）：0、2、4、6、8、10、12. 四、实验结果

C×V

全S，%= ×100 W×106 式中：

C—从工作曲线上查得S浓度，μg/ml V—比浊液体积，50ml 106—将克换算成微克 W—样品干重，g

两次平行测定允许的误差为0.01%~0.02%

植物样品中硼的测定

一、原理

植物样品用干灰化，稀盐酸溶解灰分，溶液中硼以姜黄素比色法测定。 二、试剂

1、0.1mol/L HCl溶液 2、95%乙醇 3、无水乙醇 4、姜黄素-草酸溶液 5、硼标准溶液 三、步骤

称取0.5***g样品于瓷坩埚中，在电炉上加热碳化，在移入马弗炉中灰化2h，冷却后以10ml 0.1mol/L HCl煮沸溶解，完全转移至50ml塑料容量瓶中定容。

吸取1.00ml滤液于瓷蒸发皿中，加入姜黄素-草酸溶液4ml。略加摇动均匀，在55±3℃

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水浴上蒸干，继续在水浴上蒸干15min以除去残存水分，冷却至室温。在蒸发过程中显出红色。用移液管加入95%乙醇20ml，用塑料棒搅拌使残渣完全溶解，在550nm波长比色，用乙醇调零。

吸取50μg/ml B标准溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml于50ml容量瓶，每瓶中加入10ml 0.1mol/L HCl，用去离子水定容，即为0、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00μg/ml的标准系列溶液。

分别吸取硼浓度分别为0、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00μg/ml的标准系列溶液1ml于瓷蒸发皿中，加姜黄素-草酸溶液4ml，按上述步骤显色和比色，绘制标准曲线。 四、结果计算

C×ts 硼（B，mg/kg）=

m 式中：

C—从标准曲线查得B质量浓度，μg/ml ts—分取倍数 m—干样品质量，g

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