糖原染色法
更新时间:2024-03-17 08:31:01 阅读量: 综合文库 文档下载
糖原染色
高碘酸-Schiff(Periodic acid Schiff, PAS)染色法 【试剂配制】
(1)高碘酸氧化液:
高碘酸 1g 蒸馏水 100ml。 (2)Schiff液:
碱性品红 1g 1N盐酸 20ml 亚硫酸氢钠 2g 活性炭 2g 蒸馏水 200ml
将1g碱性品红热溶于200ml煮沸水中,搅拌5分钟,冷至50℃时过滤,在滤液中加20ml 1当量盐酸,冷至25℃时加1g亚硫酸氢钠(sodiumbisulfite)。将该液存放在冷暗处14~24小时,然后加入2g活性炭,摇动1分钟过滤,滤后保存在0~4℃冷暗处,在室温下使用。
注意:如碱性品红为结晶,可预先研成粉末,使易溶解。亚硫酸氢钠须有浓厚的气味,否则效果不佳。玻璃器皿须全干燥而清洁,可预先在暖箱内烘干或用蒸馏水多次洗涤,因无色盐基性品红液遇到自来水则变红色。在染色过程中,所用玻璃器皿亦须用蒸馏水多次洗涤或烘干。 【染色方法】
(1)切片脱蜡至蒸馏水。
(2)浸入高碘酸氧化液中10~20分钟。 (3)蒸馏水洗2次。 (4)Schiff液染色10~30分钟 (5)流水冲洗5分钟。
(6)用苏木素染细胞核3~5分钟
(7)在盐酸酒精中分化,自来水洗至细胞核变蓝为止。 (8)脱水、透明和封固。
【结果】糖原和粘蛋白呈紫红色,细胞核染蓝色,霉菌也呈紫红色等。
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