血浆中游离脂肪酸的测定及其临床意义

血浆中游离脂肪酸的测定及其临床意义

氨基酸和生物资源

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AminoAcids&BioticResources1998,20(2):24～26

血浆中游离脂肪酸的测定及其临床意义

刘惠敏　姜秋芬　戴尚飞　李兴发

(河北医科大学基础所　石家庄　050017)

Ξ

摘　要　建立了用毛细管气相色谱法分析血浆中游离脂肪酸(FFA)的方法。测定了20例正常人和16例糖尿病人血浆中游离脂肪酸的含量。测定结果表明,糖尿病人的C16∶1等三种脂肪酸与正常人相比有明显差异。就脂肪酸类与疾病的关系作了讨论。

关键词　血浆　游离脂肪酸　气相色谱法

脂类物质是细胞膜的主要组成,具有多

种重要的生物学功能。通过检测血浆中脂肪酸水平,肪酸的关系。,,的浓度,。所以我们建立了用毛细管气相色谱法测定血浆中游离脂肪酸的方法,并就其在临床上的意义加以讨论。

1　材料和方法1.1　测试对象

正常人组:20名(男10,女10),年龄18～43岁,平均年龄28.96岁。系本校1995级体检正常的学生,部分来自血站体检合格的献血者。

病人组:16名(男8,女8),年龄44岁～70岁,平均年龄60.7岁。均系 型糖尿病人,病史5～15年。1.2　主要仪器和试剂

日立663-50气相色谱仪,装有氢焰离子化检测器(FID)有毛细管装置。

C16∶0等十种脂肪酸标品为Alltech公司

Ξ收稿日期:1997-08-15;

、、甲醇均。.:OV-101玻璃毛细管柱,0.25mm×18m,液膜厚度为0.25Λm(日立公司产品)。检测器:FID。柱温起始温度170℃,保持3min,以3℃ min速率升温至220℃,保持5min。检测器温度250℃,进样器温度230℃。载气为氢气,70ml min。分流式进样,分流比为100∶1。1.4　提取与酯化

提取:取2ml空腹血浆,加6ml甲醇,12ml氯仿,充分振摇,2500r

min离心10min,吸去上层水相,滤去蛋白,用0.5ml氯仿洗滤纸一次,滤液在60℃下N2吹赶至0.5ml。

酯化:提取液中加入2ml无水甲醇和1ml三氟化硼一乙醚液,加入内标C17∶0,缓缓加温至沸,煮沸30min。放置室温,加入2ml二次蒸馏水,用二氯甲烷萃取3次,在40℃下N2吹赶至100Λl,进样1Λl。2　结果

2.1　20例正常人和16例糖尿病(DM)患

者,血浆中FFA的测定结果见表1,经统计t

血浆中游离脂肪酸的测定及其临床意义

刘惠敏等　血浆中游离脂肪酸的测定及其临床意义

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检验,显著差异的有C16∶1、C18∶1、C18∶0。各种脂肪酸的重复性测定变异系数在9%以内,见表2。不饱和脂肪酸以C18∶2为代表,饱和脂肪酸以C20∶0为代表,回收率分别为82.75%和96.70%。

2.2　糖尿病患者情况比较复杂,病人往往有

各种各样的合并症,血浆中游离脂肪酸的浓度也就不同。不饱和脂肪酸C16∶1和C18∶1均低于正常人(P<0.05),而饱和脂肪酸C18∶0高于正常人(P<0.01)。3　临床意义3.1　关于必需脂肪酸

人体内脂肪和类脂所含有的脂肪酸,都是具有偶数碳原子的脂肪酸,都在12子以上。(C16∶1)、油酸(C18∶1)(C18∶2)、亚麻油酸(C18∶3)和花生四烯酸(C20∶4),其中含量最多的是油酸。在多不饱和脂肪酸中有几种是体内不能自行合成的,称为必需脂肪酸(EFA)。它包括亚油酸、亚麻油酸和花生四烯酸(AA)。既然人体不能合成,就必需从食物中供给。富含必需脂肪酸的食物主要是植物性食物,如:玉米油、豆油、棉籽油、葵花子油等含有多量亚油酸。如果EFA供应不足或过多地被氧化时,会导致EFA缺乏症,比如可出现皮炎,脂肪肝及有关脂类代谢障碍。一般认为脂肪肝的病因之一是:必须脂肪酸缺乏而使磷脂合成减少所致。EFA缺乏症,只能靠补充必须脂肪酸来治疗。

但是,假如含多不饱和脂肪酸的植物油食入量过多,会引起脂质过氧化增高。脂质过氧化是衰老、糖尿病及肝硬化等许多疾病的病理过程。而含饱和脂肪酸及胆固醇较多的动物油可降低脂质过氧化,却又会引起高血脂症,是动脉粥样硬化冠心病的一个危险因

[1]

素[2]。所以人们应保持良好的饮食习惯。3.2　必需脂肪酸与癌

多不饱和脂肪酸中主要是EFA具有抑制肿瘤的作用。如EFA在组织培养中能阻碍三种腹水癌的生长。对6C3HED淋巴肉瘤也有抑制作用,其中以亚油酸和亚麻酸的作用较强。用含有EFA的饲料喂养已接种实验肿瘤的大鼠,能抑制肿瘤的生长和延长大鼠的生存期。因肿瘤死亡的大鼠,组织的提取物中亚麻酸的含量就显著减少或消失。

与多不饱和脂肪酸有关的抗癌新剂型

(139),“油酸多相脂质体”

测定,,其主要,从“139”治疗一个,萎缩、变性或变形,据初步统计临床有效率达66.7%(P<0.05)。对晚期肺腺癌的治疗后,X线透视肿块消失,痰检癌细胞转阴。AA也与癌症有密切关系,大鼠患白血病时,血浆和红细胞中AA的含量也明显地降低。癌症患者血浆中的AA的含量比正常人降低50%以上[3]。

表1　正常人与糖尿病人血浆中的游离脂肪酸含量

±S)(X

.1　ThecontentsofFFAintheplasmaofTabel

healthyhumanandpatientssuffeiingfromdiabetesmelitus　　

脂肪酸

C16∶1C16∶0C18∶3C18∶2C18∶1C18∶0C20∶4C20∶3C20∶0

Λmol L

正常人组(n=20)

76.1±23.81455.1±146.3641.5±162.5389.2±86.770.4±20.3421.8±40.1221.4±44.972.9±33.229.3±7.5

病人组(n=16)

47.5±25.031437.2±232.4764.3±285.8352.7±143.453.7±27.733567.2±92.53240.0±99.9105.6±97.347.0±39.5

33P<0.05　　　　　　3P<0.01

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表2　血浆中游离脂肪酸测定的重复性

Table.2　ReproducibilityofFFAdeterminationinplasma　　　　　　Λmol L

脂肪酸

C16∶1C16∶0C18∶3C18∶2C18∶1C18∶0C20∶4C20∶3C20∶0

A64.151390.83523.60357.5172.01551.27218.1280.8025.25

B66.031349.32518.86342.2864.01552.50201.3099.6425.12

C69.141281.31502.84353.4865.85570.04225.6589.4626.33

D57.981373.19565.26342.8277.50558.06208.8387.3122.53

均数

64.331348.66527.64349.0469.85557.99213.4689.3324.80

%CV 7.313.375.042.198.791.254.988.71.49

脂肪酸是重要的生物资源,不仅在营养卫生方面有重要的作用,关系,的水平,息。

2,,..色谱,1995,(6):415

3　陈建智,顾学裘.多不饱和脂肪酸与癌.肿瘤,1983,(6):

268

4　Eder.K,etal.Gaschromatographicanalysisoffatty

acidmethylesters:avoidingdiscriminationbypro2grammedtemperaturevaporizinginjecionJournalofchromatography.1991,(588):265

参考文献

1　北京医学院主编.生物化学.北京:人民卫生出版社,

DeterminationofFreeFattyacidsinPlasmaand

it’sClinicalSignificance

LiuHuimin　JiangGiufen　DaiShangfei　LiXingfa

(InstituteofBasicMedicine,medicaluniversityHebei,Shijiazhuang050017)Abstract　Capillarygaschromatographywasemployedfordeterminingcontentofvari2ousFFAinplasmafrom20healthyhumanand16patientssufferingfromdiabetesmellitus

(DM).SignificantdifferencesinthecontentofC16:1andothertwoFFAintheplasmafromthepatient

safferingfromDMwereobserved.Thecorrelationbetweenfattyacidsandtheill2nesswasdiscussed.

Keywords　freefattyacidgaschromatography

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