欧盟和美国食品中致病菌检测的标准和技术的新进展

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成。得到时间 .波长 .信号的三维信息，适于进行原子

c o n t r A A连续光源火焰原子吸收光谱仪在市场的

吸收干扰和机理方面的进一步研究；4 )采用 N e线作动态波长校正，达到波长稳定、精确，省却了以往严格恒温单色器的问题；

面世，必将对现有的传统原子吸收光谱仪及等离子体光谱仪器市场产生重要的影响，为快速多元素石墨炉原子吸收奠定了基础，多元素同时测定原子吸收光谱分析仪器走向实际应用的时代已经到来了！

5 )分析时同时记录所有背景信息，可以同时将各种

背景都扣除干净。传统原子吸收仪器上的氘灯、 Z e e m a n、S . H法等背景校正装置都不需要了； 6 )分析结果准确、测量精度高、检出限优于普通锐线光源原子吸收； 7 )快速多元素顺序分析，分析速度达到或超过普

参考文献【 1】Wa l s h, A. S i mu l t a n e o u s mu l t i— e l e me n t na a l y s i s b y a t o mi c a b s o r p t i o ns p e c t r o s c o p y . XI I I Co l l o q mu m Sp e c r t o s c o p i c u m I me ma t i o n le a, Ot t a wa,

1 9 6 7, 2 5 7

通I C P。而分析成本比普通原子吸收还要低得多； 8 )线性范围和动态范围宽，并可采用线光源原子吸收无法使用的谱线进行定量测定；

【 2】 Ha ml y, J . M.; O‘ Ha v e r, T . C.; Go l d e n, B .; Wo l f, W. R.: An a 1 . Ch e m. 5 1 ( 1 9 7 9 ), 2 0 0 7

【 3】 O‘ Ha v e r, T . C.; Me s s ma n n, J . D.: P r o g . An l a￣. S p e c t r o s c . 9( 1 9 8 6 ), 4 8 3【 4】 He i t ma n n, U.; S c h"‘ t z, M.; Be c k e r - R o s s, H.; F l o r e k, S .: S p e c t r o c h i m. Ac t aB 5 1 ( 1 9 9 6 ), 1 0 9 5 【 5】 He i U n a n n, U.; B e c k e r - R o s s, H.: At o ma b s o pf r i o n s— S p e k t r o me t r i e mi t e i n e m

K o n t i n u u ms t r bl a e r ( CS— A AS ), GI T 7 1 2 0 0 1, 7 2 8— 7 3 1 【 6】 L" v o v, B . V .: R e c e n t a d v nc a e s i n a b s o l u t e a n a l y s i s b y g r a p h i t e f u r n a c e a t o mi c a b s o pt r i o n s p e c t r o me t r y, S p e c t r o c im. h Ac t a P a r t B 4 5 H ( 1 9 9 0 ),6 3 3 . 6 5 5

9 )方法简单，原子吸收的原理，谱线干扰等比发射光谱少得多；

l 0 )仪器无需预热，开机立即测定。 另外， c o n t r A A还拥有原子化器与普通原子吸收相同的优点，所有测量方法和附件均适用；仪器维护和消耗成本低于普通火焰原子吸收光谱仪；可配自动进样器，可

配氢化物发生器；可配分段流动注射微量进样器等。

【 7】H a ml y, J . M…J An 1. a At . S ec p t r o m., 1 9 9 9, 1 4( 2 ), 3 7— 1 4 6

欧盟和美国食品中致病菌检测的标准和技术的新进展缪若礼郭剑(生物梅里埃中国有限公司 北京 1 0 0 0 0 4 )E— ma i l; j i a n . g u o@a s . b i o me d e u x . c o n r

摘要食品安全的问题不仅对消费者个体而且对社会产生巨大的政治和经济影响，也是引起公众高度关注的问题。本文主要介绍了欧盟和美国食品中致病茵检测的标准和技术的新进展，分以下四个部分：1 )食品微生物品质控制；2 )食品微生物检测方法；3 )最新认可方法示例；4 )生物梅里埃 AOAC国际认可情况. 关键词食品安全及标准；食品微生物品质控制；微生物检测方法；经典方法；参考方法

中图分类号 X . 6 5 2 EU a n d US Ne w P r o g r e s s o n Cr i t e r i a a n d T e c h n o l o g i e s o fDe t e c t i o n o f Pa t ho g e n s i n Fo o dMi a o Ru o l i,Gu o J i a n

( B i o Me r i e u x C h i n a L t d, B e i j i n g 1 0 0 0 0 4, C h i n a ) Ab s t r

a c t T h e i s s u e o f f od s a f e t y h a s g r e a t p o i f i f c l f a n d e c o n o mi c i mp a c t s o n b o t h i n d i v i d u a l c o n s u me r nd a s o c i e y Th t i s.

a r t i c l ei n t r o d u c e sE Ua n dUS An e wp r o g r e s so n c imf f i aa n dt e . c h n o l o g i so fd e t e c t i o no fp a t ho g e n s i nf o o df r o mt h ef o l l o wi ng

f o u r a s p e c t s: 1 ) q u a l i y t c o n t r o l o f f od m i c r o o r g a n i s m; 2 ) d e t e c i t o n W . c h n i q u e s o f oo f d ic m r or g a n i s m; 3 1 d e mo n s t r a t i o n o fn e w l y r e c o g n i z e d d e W . c t i o n W . c h n i q u e s; 4 ) p r o i f l e o f b i o Me r i e u x A OA C nt i e na r t i o n a l r e c o g n i z a t i o n.

Ke y w o r d s F o o d s fe a t y nd a c i r t e i r a; q u a l i y t c o n t r o l o f oo f d ic m r o o r g a n i s m; m i c ob r i o l o g i c d e t e c i t o n me t h ds o; o f i f c a lme t h o d s;r e f e r e n c e me t h ds o

收稿日期： 2 0 0 4— 1 2 作者简介：缪若礼，高级工程师，研究领域：食品微生物。

现代科学仪器 2 0 0 5 1

3 9

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1 引言

法律接轨，提供仲裁依据，用於国际贸易；对质量的认可；

提供有关方法的特点(敏感度、特异性等)。

. 2 A O A C认可方法的种类食品安全的问题不仅对消费者个体而且对社会产 3 A O A C O f i f c i a l Me h t o d s ( O MA )即官方认可的A O A C 生巨大的政治和经济影响，也是引起公众高度关注的问

题。因此，制定严格的食品品质控制体系，从原材料、生产过程、制成品、储运、销售各个环节减少食品污染引起的疾病，特别是食品中微生物的检测与控制，对于oN【 A.

P r e . c o l l a b o r a t i v e S t u d y(初期试验) C o l l a b o r a i t v e S t u d y(协作试验 )

.

产品质量及食品安全的保证有着极为重要的作用。

A oA C T e s t K i t P e r f o r ma n c e T e s t e d C e r t i i f c a t i o n即

A O A C研究所认可的

2食品微生物品质控制和微生物检验方法概况食品微生物检验是保证食品安全性的重要手段。食品的微生物检验，一般分为卫生学检验：菌落

AoACR J.

P r e . c o l l a b o r a i t v e S t u d y(初期试验) I n d e p e n d e n t S t u d y(独立试验)

.

3 . 3 A O A C O M A认可的申请程序P r o p o s e" - - 4初期试验- - 4协作试验—◆协作试验

总数、大肠菌群等。 致病菌检测：沙门菌、单增李斯特菌、大肠杆菌 O 1 5 7等。

(申请) (厂商内部试验)申请及批准( 8 - 1 5家实验室进行)A O A C大会I _◆ F i r s t A c i t o n A p p r o v a l I _◆ F i n l a A c i t o n

通过( 1季一次) I _◆ (第一次认可) - - 4(最终认可)

微生物检测方法目前分为经典方法 (传统方法 ) ( O f i f c l a Me t h o d s )￣ l参考方法( O f i c i a l Me t h o d s )两大类。

3 . 4 A O A C R I认可的申请程序

P r o p o s e - - 4初期试验. _◆独立试验I _◆ R J认可经典方法大部分由I S O (国际标准委员会)或C E N (欧 (申请) (厂商内部试验) (一年有效) 洲标准协会)或A F N O R (法国标准委员会)制定，提供高重

复性、公认的方法，用于解决纠纷(仲裁及冲突)等方面， 但该方法手续繁琐、需时较长、不能满足广大用户要求，而且大部分没有提及自动化。参考方法目前在美国，

4最新认可方法的例子微生物和药敏的检测分析方法和仪器有不同类型，

F D A认可在临床(医院)范围使用；食

品细菌检验参考方法其中有基于利用生化反应、酶检测、同化试验以及对是B a c t e r i o l o g i c a l A n a l c a 1 Ma r n l a l ( B )制定的，细菌检验抗生素敏感性等微生物的生化及代谢特征进行检测分分析手册由美国公认的分析化学家协会( A O A C )编写，生肉，家禽检验方法由U S D A编写。 析等等，已得到认可的由法国生物梅里埃集团生产的 VI TE K全自动细菌鉴定及药敏分析系统(见图 1 )和 V I DA S全自动快速致病菌筛选仪(见图 2 )。前者约有 5 0 0 0多个系统在世界各地应用，后者约有 1 0 0多个全球

3食品微生物检测方法食品检验对微生物实验室检测的要求：操作简单、减少前期操作、实验流程简易、样本量适应性强、 低成本高效益、快速出报告结果、国际认可/标准化/ 可追踪、满足以下标准： I S o标准{ A o A c( B A M), U S D A; C E N, E MMA S,DANVAL, DI N, A F NOR。

参考实验室( U S D A、F D A )和1 0 0 0多个食品实验室广泛应用。本文将着重介绍 V I D A S仪器和相关的检测方法。

3 . 1国际认可情况 ( V a l i d a t i o n )在美国检测方法必须经过 A O A C认可才能成为官

方承认并证明其检测方法，结果与经典方法等同。在欧洲应得到包括 A F N O R￣法国), E MMA S (英国)等认可。图 I

诊断公司的检测试剂必须与经典方法比较，可靠地

进行定性，定量试验，通过认证并具备：准确性、重复性； 4 .1 M i n i V I D A S致病菌检测分析仪单一实验室，不同实验室结果差异的可比性、吻合性。食品实验室需要认可方法提供可靠数据用于：与4 0

Mo d e mS c i e n t i icI f n s t r u me n t s 2 I D 0 5 _

1

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4 . 3 V I D A S L S X (L i s t e r i a S p e c i e s X p r e s s )

用于所有食品的李斯特菌菌属的检测 A O A C认可(进行中)试条：一次性即可用试剂图 2

所有食品

灭活

-

L s x

1 5分钟2 5 g样本+ 2 2 5 mL L X肉汤 3 ml肉汤+ 6 m L L X肉汤

7 0分钟

原理： m

i n i V I D A S采用具有优异敏感性和特异性

的酶联荧光分析技术( E L F A ),使标本与包被在固相包被针内的相应抗原或抗体进行反应，通过测得的荧光底物

明天

的荧光值来确认标本中有无待检物或其含量。使用成品的封闭的试条，试条可直接使用，内设自检系统，仪器内无管道，无须清洗，排除了交叉污染。每个试条均有条形码，仪器自动识别试条批号和有效期。每种试验也可由特殊的字母和色码识别。

劬PM

1

j '+ 6 b I s l2 2 2 2舶 I s

Il

2 2+ 6 h I s l

I

L S X带来的好处一明天的事今天做！今天中午前

进行增菌的样品，明天下午看结果。

4 . 4 V I D A S 2 4小时方案运用 V I D A S快速全自动筛选方法，2 4小时内均可完美地完成以下监测任务。 1。沙门菌防止交叉污染

V I D A S I C S+ V I D A S S UⅥ

连续反应每步反应，试剂都被吸出吸入数次。这样增加了反应动力学，减少了孵育时间

2 .李斯特菌菌属4 .大肠杆￣O 1 5 7 5 .葡萄球菌肠毒素

V I D A S L S XV I D A S E C O V I D A S S E T 2

次使用的固相管( S P R)取代了加样针，杜绝了污染一

3 .生奶中的单增李斯特菌 V I D A S L S X

荧光读数最后反应的荧光度用试条中的光学杯检测

5生物梅里埃产品 A O A C国际认可情况AP I

O MA .: 9 7 8 . 2 4 A P I 2 0 E对沙门菌鉴定VⅡEK

4 . 2 V I D A S I C S- I -S L M(免疫浓缩+免疫检测)2 4小时沙门菌监测流程(如下图)。

O MA: 9 7 8。 2 4 G N I+对沙门菌鉴定O MA: 9 9 1 . 1 3 G N I+对肠道杆菌鉴定

所有食品样本

O MA .: 9 9 2 . 1 9 G P I&G N I+对李斯特菌鉴定VⅡ) AS OM A: . 9 9 6 . 0 8 VⅡ) A L s S UM OM A: . 9 9 9 . 0 6 VⅡ) AS U【 s RI:9 8 1 2 0 2 VI】= L s U【 s

O MA: . 2 0 0 1 . 0 7 V I D AS I C S - I - P l a t e ( S MI D ) O MA .: 2 0

0 1。 0 8 V I D AS I C S - I - P l a e( t X L D )OM A:2 0 0 1 . 0 9 VⅡ) AS I C S+S UM 5 - 6 h . a t 3 5— 3 7 0 c 0: 2 ( ) o 4 . 0 2 VⅡ) AS I l￣ 1 02

4 5 mi n s

现代科学仪器 2 0 0 5 1

4 1

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