钼锑抗比色法测定可溶性磷含量
更新时间:2023-09-03 04:55:01 阅读量: 教育文库 文档下载
解磷细菌解磷量测定,土壤,水体可溶性磷测定
钼锑抗比色法测定可溶性磷含量
试剂准备:
钼锑贮存溶液:量取153ml浓硫酸(分析纯,密度1.84g/ml),缓缓加入到400ml蒸馏水中,不断搅拌,冷却。另称取经磨细的钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·H2O,分析纯]10g溶于温度约60℃300ml水中,冷却。然后将硫酸溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中。再加入0.5%酒石酸锑钾[KSbOC4H4O6·1/2H2O,分析纯]溶液100ml,冷却后,加水稀释至1000ml,摇匀,贮于棕色试剂瓶中,此贮备液含钼酸铵1%,硫酸2.75mol/L。
钼锑抗显色剂:称取1.50g抗坏血酸溶于100ml钼锑贮存溶液中,此溶液有效期不长,宜随配随用。
5mg/L磷标准溶液:0.4394g在50℃烘干的磷酸二氢钾(KH2PO4。分析纯),100ml水,加5ml浓硫酸(防腐),用水定容到1L,浓度为100mg/L磷(P),此溶液可以长期保存。吸取上述溶液10ml于200ml容量瓶中,加水至标度,浓度为5mg/L磷(P)标准溶液,此溶液不宜久存。
标准曲线的绘制:
分别准确吸取5mg/L磷(K2HPO4)标准溶液(也可用摩尔浓度)0、2、4、6、8、10ml于50ml容量瓶中,同时加入与显色测定所用的样品溶液等体积的空白溶液,加入二硝基酚指示剂2~3滴,并用100g/L碳酸钠溶液或50ml/L硫酸溶液调节至溶液刚呈微黄色,准确加入5ml钼锑抗显色剂,摇匀,加水定容,即得含磷(P)量分别为0.0、0.2、0.4、0.8、1.0mg/L的标准溶液系列。摇匀,于室温15℃以上,放置30min。在波长700nm处,测定其吸光度,以吸光度为纵坐标,磷浓度(mg/L)为横坐标,绘制标准曲线。
可溶性磷测定(显色与比色):
将待测液体(细菌真菌培养液离心后取上清)适量(第一次做需摸索加入量)移至50ml容量瓶中,用水稀释至总体积约3/5处,加入二硝基酚指示剂1~2滴,并用100g/L碳酸钠(或氢氧化钠)溶液或50ml/L硫酸(或盐酸)溶液调节至溶液刚呈微黄色,准确加入5ml钼锑抗显色剂,摇匀,加水定容,室温15℃以上,
解磷细菌解磷量测定,土壤,水体可溶性磷测定
放置30min(8h内)。显色的样品溶液在722分光光度计上,以空白 (溶剂,细菌真菌实验为不接菌体的空白培养基)为参比液调节仪器零点,进行比色测定,读取吸光度OD700nm,再从标准曲线上查得相应的含磷量[14]。
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