激光共聚焦扫描显微镜操作规程

更新时间：2023-11-27 19:06:01 阅读量：教育文库文档下载

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激光共聚焦扫描显微镜操作规程

一．

开机程序

1．开启总电源，确认所有仪器电源状态正常工作

2．开启电脑，双击桌面上的LSM510图标，开启显微镜。 3．在初始平面上点击Start Expert Mode 键开启专家拍摄模式。 4．在主菜单中点击File New键，建立新的数据库。二．

软件拍摄

1．在主菜单上点击Acquire Laser键，开启需要使用的激光 2．在主菜单上点击VIS键，开启显微镜观察模式 3．把需要观察的玻片放到载物台上选择需要观察的平面 4．在主菜单上点击LSM键，开启进入显微镜激光扫描模式 5．在主菜单上点击Config键，选择所需要扫描的模式及参数 6．在主菜单上点击Scan Find键，进行图像参数自动校正 7．在Scan子菜单下点击Fast X键，进行层面选择

8．在连续扫描中调节放大器增益、补偿；激光强度等图像参数来优化图像 9．点击图像子菜单上的Save键存储优化好的图像三．

关机程序

1．完成所有操作后，关掉激光开关，冷却5分钟后，点击主菜单上Exit键，退出所有程序 2．关闭电脑 3．关闭电源

ZEISS 510 META二维扫描程序

1. 在Acquire → config → 确定扫描所需的波长，（如果已作过相同方法的扫描，可直接调出一张相同条件的图像，用图像窗中的Reuse确定有关的扫描条件）

2. 在Acquire → micro → 在低倍镜(透射光或荧光)下找到要观察的图像

3. 在Scan control → mode → find →在显示器上找到图像，选定扫描需用的分辨率 4. 调节物镜到适当的放大倍数

5. Scan control → mode →New，打开一新图像窗 6. 在Scan control → mode → cont →用zoom将图像大小调至最佳，用Pinhole（一般选1）、Detector Gain（650左右，不宜时间超过800，也不宜低于500）、Amplifier offset（不宜过低），以及选择作算术平均值次数、调节激光强度（488nm不超过25%）等调节图像质量至最佳。 7. 按Single扫描图像 8. 画标尺

9. save as：图像存至目标文件夹（数据库）。

ZEISS 510 META三维扫描程序

10. 在Acquire → config → 确定扫描所需的波长，（如果已作过相同方法的扫描，可直接调出一张相同条件的图像，用图像窗中的Reuse确定有关的扫描条件）

11. 在Acquire → micro → 在低倍镜(透射光或荧光)下找到要观察的图像 12. 在Scan control → mode → find →在显示器上找到图像，选定扫描需用的分辨率

13. 调节物镜到适当的放大倍数

14. 在Scan control → mode → cont →用zoom将图像大小调至最佳 15. Z settings → Z Slice → optimal interval自动确定三维重组时相邻两张片的重合厚度

16. Scan control → Z settings → XY cont (keep inteval), 用调焦旋钮找到三维扫描的第一张图像，按mark first；再找到最后一张图像，按mark last；用Pinhole（一般选1）、Detector Gain（650左右，不宜时间超过800，也不宜低于500）、Amplifier offset（不宜过低），以及选择作算术平均值次数、调节激光强度（488nm不超过25%）等调节图像图像质量至最佳。 17. 按start开始进行三维扫描，（用图像窗中的gallery可看到扫描的过程） 18. 画标尺

19. save as：图像存至目标文件夹

ZEISS 510 META图像输出操作

输出图像：File→Export 目的：使图像在其它软件内可打开 1. 打开一个原始文件File → open 2. 选择图像类型:Image type

1) :Raw data → Sangle plane原始数据，一般不用

2) Contents of image window → singe plane实时显示窗口内容（单一图像）

3) Contents of image window → series实时显示窗口内容（三维扫描或重组后的图像）

4) Full resolution image windows → single plane显示全分辨率图像窗口（单一图像）

5) Full resolution image windows → series显示全分辨率图像窗口（三维重组后的图像的图像） 3. 选择图像格式

1）

一般单桢的图像选 *.tif 格式

2） 3D重组后的图像选 Viedeo fo windows(*.avi ) 格式 4. 若是三维重组图像，还要选择打开后的放映速度：Frames/sec 5. 确定存储文件路径及文件名 6. Save

本文来源：https://www.bwwdw.com/article/3aet.html