硫酸链霉素的水解
更新时间:2023-11-26 12:42:01 阅读量: 教育文库 文档下载
硫酸链霉素的水解实验
一、原理
硫酸链霉素的水解由温度和ph影响。
碱性水解:硫酸链霉素+H2O????
OH?+其它降解物。
反应速度服从一级反应动力学方程式ln?C0?x??lnC0?kt,式中
由始末浓,反应时间的可测量,可以得到反应速度常数k,但此反应的缺点是末浓度不好测。由于吸光度A=ELC(A是吸光度, e是吸光系数, L是单位厚度,C是浓度),上式可变成ln?E??Et??lnE??kt。是斜率为-k的二元一次方程,就容易的k的值。
生成的麦芽酚在酸性溶液下与铁离子反应生成紫红色络合物,用络合物比色法进行测定。
3
3
+Fe3+ →
在两个温度下分别测得两个常数k。由ln应的活化能E。
kT2kT1?E11从而得到反(?),
RT1T2二、实验用品
722型分光光计1个, 恒温度槽2个, 碘量瓶(150ml)2个 碘量瓶(250ml)一个, 秒表一个, 移液管(20ml)一支, 移液管(5ml)一支, 烧杯(500ml)1个, 量筒(100ml)一个, 广泛ph试纸, 一定量 0.4%硫酸链霉素水解溶液, 2N氢氧化钠溶液, 0.5%的铁试剂。
四、具体实验
㈠ Et的测量:100ml量筒量取100ml 0.4%硫酸链霉素水溶液放入
150ml碘量瓶中(防止挥发),室温下用2mol/L氢氧化钠溶液调制ph=12为止(调节至12易于麦芽酚的生成,广泛的ph试纸范
围大所以选择广泛ph试纸),调好后等分为两份各50ml于150ml
碘量瓶中(先调节ph再分开,可减小ph的调节误差,即两
份式样的ph差值),立即放入40度和50°恒温水浴中,,开始计
时。40℃的每隔15min取样一次,50℃的每隔5min取样一次(这由
硫酸链霉素的半衰期决定),分别取六次的样,取样时用移液管
准确吸取5.00ml反应液,移到干燥的50ml碘量瓶中,用移液管准确加入20.00ml0.5%铁试剂,至紫红色(此处两步应该快速操作),用722型分光光度计在520nm测吸光度,记录每次的取样时间和吸光度。
㈡
E的测定:取样完毕后,将剩余溶液置于沸水浴中加热10min
(此处可以适当延时,但是还是同样要求不能挥发),冷却
至室温后吸取5.00ml溶液与干燥50ml碘量瓶中,加入20.00ml
铁试剂,摇匀,测吸光度,即为全部水解的吸光度。
㈢ 由所得数据可计算的不同温度下的k值,即可求得活化能E。
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