甲壳素和壳聚糖作为天然生物高分子材料的研究进展

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甲壳素和壳聚糖作为天然生物高分子材料的研究进展车小琼，申， 凯孙庆赵(黑龙江大学生命科学学院微生物黑龙江省高校重点实验室，黑龙江大学，尔滨 10 8 )哈 50 0摘要：甲壳素是自然界中含量仅次于纤维素的天然高分子，聚糖是甲壳素脱乙酰化后带有阳离子的多壳糖。壳聚糖中的自由氨基以及它的高结晶性，得它能溶于酸，不溶于碱和绝大数的有机溶剂。同时壳聚糖使而具有无毒性、刺激性、无良好的生物相容性、物可溶解性，及高的电荷密度，而被作为一种新型的天然生生以因物材料得到广泛应用。文章介绍了甲壳素和壳聚糖的结构和性质，述分析了甲壳素和壳聚糖在制备微球和综作为支架材料中的应用，总结了甲壳素和壳聚糖在这两个方面存在的问题和发展前景。并 关键词：甲壳素；聚糖；球；织工程；架壳微组支

甲壳素 (ht ) cin又名甲壳质、 i几丁质，一种广泛存在于昆虫、洋无脊椎动物的外壳以及真菌细胞中是海的天然高分子化合物¨。壳聚糖 (ht a )是甲壳素脱乙酰基后的产物， ci sn o具有良好的生物相容性和生物可降解性，因此可用作生物材料，甲壳素和壳聚糖具有来源广泛、材方便等优点。取

1甲壳素、 壳聚糖的理化性质甲壳素是一种天然高分子化合物，学名是 g ( - 4 2乙酰胺基 2脱 D葡萄糖，由 N乙酰其 - 1" ).。一 -是 -胺基葡萄糖以及 g l4糖苷键缩合而成。如果把此结构中糖基上的 A乙酰基大部分去掉的话，成为 -, L就

甲壳素最为重要的脱乙酰化衍生物壳聚糖。壳聚糖是由 D氨基葡萄糖和适量的 A乙酰-一 - L D氨基葡萄糖以一(, )苷键连接而组成的。其化学名是(, )2氨基 2脱氧一 _萄糖，构类似于纤维素’ l 14糖 9 14一一一 pD葡结。11甲壳素、 . 壳聚糖的物理性质

甲壳素呈灰白色或白色片状、半透明、略有珍珠光泽的无定性固体，相对分

子量因原料和制备方法的差异而从数十万到数百万不等。不溶于水、稀碱、酸及一般的有机溶剂，溶于浓的盐酸、酸 .酸等稀可硫硝无机酸和大量的有机酸…。 壳聚糖是葡糖胺和Ⅳ一乙酰葡萄糖胺的复合物，由于聚合程度的不同其分子量在 5 0~10 k a之间。 00 D

壳聚糖的外观呈半晶体状态，晶体化程度与去乙酰化相关。5%去乙酰化时，晶体化程度最低。 0其 甲壳素和壳聚糖均具有非常复杂的螺旋结构，甲壳素和壳聚糖的结构单元不是单胺 (乙酰胺基且Ⅳ一葡萄糖或者氨基葡萄糖 )而是二胺。, 1 2甲壳素、聚糖的化学性质 .壳

甲壳素和壳聚糖分子中含有一 O H基、 N,、一 H基吡喃环、 -氧桥等功能基，因此在一定的条件可以发生

生物降解、水解、基化、烷酰基化、合等化学反应。作为氨基多糖，聚糖 (K=6 5溶解性与 p缩壳 p a .) H值

基金项目：研究由黑龙江省青年科学技术专项资金项目 ( C 6 07,龙江省教育厅项目 (1102,龙江：青年本 Q 0 C4 )黑 1537 )黑赶学科学基金 ( L0 63,医生物技术国家重点实验室开放课题基金项目( K V一05 1 N L B200 )助； Q 204 )兽 N L B200, K V . 6 1资 0 作者简介：小琼，18一),车 (9 3女四川绵 t,读硕士， E人在主要进行天然高分子材料的研究。

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紧密相关，酸性条件下，在由于氨基质子化而溶于水。在 p H<5时，聚糖完全溶于水形成十分粘稠的液壳

体(其特性黏度受 p H和离子强度的影响 )经碱化处理后，以形凝胶而沉淀。,可 壳聚糖是一种带正电荷的阳离子聚合物，酸性水溶液中可与聚阴离子化合物如：素、藻酸在肝海钠、甲基甲壳素等相互作用，梭形成聚电解质配合物。壳聚糖分子链吡喃糖环 C上有氨基，上有羧基，此能在较温和的条件下发生化学反应，备出 C因制

具有新特性的衍生物。并且可以通过改造修饰其侧链基团而赋予性的化学衍生物以新的生物活性。因为从自然界中获取的甲壳素脱

乙酰化而得到的壳聚糖只溶于酸性环境中，得它在体内的应用受到很大使的限制。现在我们可以通过在其分子上加上水溶性基团而使之溶于生理盐水中，从而减少酸性溶液对人体组织的刺激。

2壳聚糖在微球制备中的应用 壳聚糖 ( s是甲壳素的部分脱乙酰基产物，自然界中唯一的碱性多糖。作为甲壳素的脱乙酰化衍 c)是生物，s有良好的生物相容性、物可降解性、合性和无毒性， c生粘因而被广泛用于医学等领域。 药物微球由于对特定器官和组织具有靶向性及对包敷在微球中的药物具有缓释和控释效应，因此载药微球的制备已经成为目前的研究热点。而 c微球作为一种具有广泛应用前景的新型药物载体，了 s除 具有亲水性能可以延长药物微球在体内循环的时间和减少巨噬细胞捕获，而提高药物生物利用度以从 外；还可以提高药物的包封率和载药量。根据 c它 s微球应用目的的不同，以用 c可 s制成不同大小的微球。现在，利用 c s制备化疗药物、消炎药、岛素、生素等药物的缓释制剂已取得了良好的效果，胰抗并已用于临床。

壳聚糖微球的制备方法有乳化交联法、蒸发溶剂、雾干燥、中干燥、淀/聚以及复凝聚法等。喷液沉凝 复凝聚法是指利用两种聚合物在不同的 p H值下电荷的变化，即一种带负电荷的胶体溶液与一种带正电

荷的胶体溶液相混，由于异种电荷之间的相互作用形成聚电解质复合物而发生分离，积在囊芯周围而沉得到微胶囊。海藻酸钠、聚丙基酸钠等高分子材料均能分别与壳聚糖起复凝聚作用。目前，聚糖微球壳已经用于包封多种药物n、白质 (肽)、素类物质氨基酸¨等。慕容等 用反相 蛋多¨激。、等。采悬浮交联法合成了直径为 10 m, 0 n粒度分布均匀，响应强，吸附能力的，有核壳结构的磁性壳聚糖磁有具纳米微球 ( ant ht a a oa ie, N )考察了 MC P的吸附和释放药物的性能。 m gecc isnnnprc sMC P, i o tl N

虽然壳聚糖具有一些良好的特性可用于载药微球的制备，是在制备微球过程中，聚糖一般需要但壳两次脱乙酰化反应。由于制

备条件的不同和原料来源的差异，分子量、乙酰化的程度波动较大。此外，脱

在制备微球时，聚糖须用酸溶液溶解，壳因此，备水溶性的壳聚糖衍生物的技术有待进一步完： 制善。

3壳聚糖在组织工程中的应用 ,

甲壳素具有广泛的抗菌和止血、止痛的作用，同时具有选择性促进表皮细胞生长的独特的生物活性。 壳聚糖是甲壳素的脱乙酰化产物，与细胞能够发生非特异性吸附，从而有利于细胞在其表面黏附。因此， 可以将壳聚糖作为良好的支架材料广泛的应用在组织工程学中。曾春的研究证实，聚糖支架具有 。壳较高的孑隙率， L并且孔隙相互连通，L较均匀，于细胞的物质交换、孑径适生长代谢。黄志海等用冷冻诱导相分离的方法制备了壳聚糖一胶原多孑复合支架。实验证明该支架具有很高的孑隙率和吸水率，水 L L在中基本不溶胀，够保持细胞支架的形态，足作为组织工程支架的要求。能满3 1在皮肤组织工程中的应用 .

壳聚糖的纤维刚性结构可以增强真皮基质的机械耐受力，长创面细胞胶原酶对真皮基质的降解。延 石研超等以胶原和壳聚糖为原料制备了具有三维多孑结构的胶原一壳聚糖， L硅橡胶双层皮肤支架。动物实验表明，支架在原位诱导了真皮的再生，该并有高达 9%的移植成功率。鲁元刚等将具： 4有真皮和表皮的复合壳聚糖人工皮肤移植到家兔的全层皮肤缺损处，面愈合良好，明显免疫排斥反应，创无 2个月 后表皮结构清楚，质层较厚，角真皮血管较多，明显的炎性细胞，无新生纤维明显增多。结果表明，合的复

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人工皮肤动物体内修复实验的效果良好，以考虑作为下一步临床实验的材料。杨军等利用自体表可皮细胞和壳聚搪/明胶膜能够构建出人表皮细胞膜片，用于临床增殖性疤痕治疗 6例，过 3月随访，应经 创面愈合时间(6 2±1 )天，植膜片存活良好，构较完整，0天随访无明显疤痕增生，效肯定。他 1. 5移结 9疗们认为，聚糖/壳明胶膜片对增殖性疤痕具有良好治疗效果，组织工程皮肤进人临床具有现实的可行性及广

阔的应用前景。 32在骨组织工程中的应用 .

甲壳素作为骨组织工程支架材料的研究也有报道。杨操等取 2周龄幼兔的长骨采集骨髓，养骨培髓问充质细胞，体外扩增 l后，别种植于壳聚糖和壳聚糖/胶共混材料的表面。在倒置光学显微周分明镜、描电镜下观察细胞的粘附和生长情况，植 7天后用透射电镜观察细胞功能状况， MT扫种用 T方法检测种植后 2天、 4天、 6天和 8天细胞的增殖情况。结果表明：聚糖/壳明胶共混材料和壳聚糖单独使用都

能促进骨髓问充质细胞在材料表面粘附并保持其在机体内的形态。壳聚糖/明胶共混材料表面的骨髓间充质细胞功能活跃。在材料表面和培养板表面培养的骨髓间充质细胞均能持续增殖，壳聚糖/明胶共混材料能显著促进骨髓问充质细胞的增殖 (<0 ( )他们认为壳聚糖/ .1。 )明胶共混材料保持了壳聚糖的某些生物活性，时由于加入明胶，同能促进骨髓间充质细胞的增殖，作为骨髓间充质细胞的载体应用于组可

织工程。韩旭彤等利用有机官能团对无机物矿化的调控作用 .壳聚糖多孔支架表而原位沉析轻基在磷灰石 ( A ) H p。研究结果表明壳聚糖分子结构中的氨基作为成核位点，碱性条件下首先吸附 C 2再在 a,

通过静电作用力吸附仿生溶液中的 P 、 H一其它离子促使 H p晶体在壳聚糖支架材料表面的成核、 O O等 A长大。此类材料有望成为一种生物活性的。肾组织工程材料。J n i g等制备了新的三维壳聚糖/P A A a LG

多孔复合支架。支架的压缩系数和压力强度都在骨小梁的范围之内，使得该多孔复合支架很适合应用于骨组织工程。赵营刚等利用冷冻干燥法制备出用于骨和软骨组织工程的壳聚糖一明胶/胶凝胶溶生物玻璃 ( SG l G G仿生型复合多孔支架，进行了孔隙率的测定和显微形貌的观察，讨了各组分 C—e S B )/并探不同用量对 ( SG l G G复合支架显微结构的影响以及复合支架在模拟生理体液中的仿生矿化性能。 C—e/ B ) S研究表明，过调节各组分的不同用量，以制备出三维连通的复合多孔支架，孔隙率达到 9%以上

;通可且 0 在模拟生理体液中浸泡后发现 ( SG l G G) C— e S B支架表面有大量结晶态类骨碳酸羟基磷灰石生成，明复/表

合支架有良好的生物矿化性能。3 3在软骨组织工程中的应用 .

有研究表明，化生长因子一 t nf m g whf t— )聚糖缓释微球具有良好的载药、药性能，转 ( as r r t a o p壳 r o o cr释 微球支架可以较好的维持软骨细胞的表型，促进其粘附、殖，为软骨细胞的载体在组织工程软骨的构增作

建及软骨损伤的修复中有良好的应用前景。史德海等利用壳聚糖和Ⅱ型胶原成功的研制了三维多孔复合支架。实验表明，聚糖可以作为支架载体应用于组织工程软骨的构建高海玲等探讨了利壳用软骨细胞和新型生物材料壳聚糖动物体内构建软骨组织的可行性。她们在体外分离培养猪耳软骨细胞，扩增后以 50×1 . 0/ mL的终浓度接种于壳聚糖支架并植入猪皮下。标本于 8周后取材进行组织学及

免疫组织化学等相关检测。结果表明细胞 . .生物材料复合物在植入猪皮下 8周后形成了单一成熟的软骨组织，并保持了支架材料的大小和形状；免疫组织化学染色结果表明其大量表达软骨特异性细胞外基质

I型胶原。所以她们认为壳聚糖是一种良好的生物材料，够提供软骨细胞生长的三维环境并用于体内 I能构建软骨组织。 3 4在神经组织工程中的应用 .

在构建人工神经时，不仅要求支架材料不影响周围正常神经的功能，也要求材料能促进神经再生，为雪旺氏细胞的附着、迁移、增殖发挥正常功能提供条件。甲壳素及其衍生物凭借其良好的生物相容性和生物可降解性，已在人工神经的研究中得到了广泛的应用。 于炎冰等应用壳聚糖神经导管作为神经再生室桥接大鼠坐骨神经缺损，术后 l再生轴突已长 2周

人长达 1 m的神经缺损间隙，4周后再生完全，管大部分被降解吸收， 2m 2导再生神经功能良好。丁文龙等探讨了壳聚糖纤维与体外培养 Sh a n细胞的相容性和亲和力。他们把新生 s cw n D鼠的臂丛和坐骨

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神经组

织块种植于壳聚糖纤维支架上培养 Sh a n胞。结果发现壳聚糖纤维支架上的 Sh an细胞为 cw n细 cw n橄榄形或椭圆形，细胞在纤维上分裂、移，成链状结构，迁形细胞突起的末端呈扁平状膨大，出爪形伪足伸

贴附于纤维。所以他们认为壳聚糖纤维：与 Sh an细胞的相容性良好，且对在其表面培养的不仅 cw n而 Sh an细胞形成髓鞘可能有诱导作用。张黎等应用壳聚糖材料制备神经导引管作为神经再生室桥 cw n副接大鼠坐肾神经缺损 .观察了对神经再生的作用。她们先手术造成 9并 0只 Wia大鼠右后肢坐骨神经 sr t长约 1m的缺损， 5m A组以含有 N F的壳聚糖神经导引管桥接神经缺损； G B组单纯采用壳聚糖导管； C组则不用导管。以左侧正常坐骨肾神经作为正常对照，别于术后 4 1、分、2 2 4周进行大体及显微解剖观察、 组织学检查、电镜观察和神经电生理测定。结果表明 A、 B组在促进神经再生，快血管化进程，生神加再经纤维排列规律化，高再生神经髓鞘化，提加速再生神经功能重建等方而均优于 C组。所以她们认为壳聚糖是制备神经导引管的理想材料，聚糖神经导引管可以为大鼠坐骨肾神经再生提供良好的再生微环壳境。 3 5在其它组织工程中的应用 .

自从组织工程技术出现以来，已经对多种器官进行了研究，如：肤、例皮肌腱、血管、肝脏、腺等等。胰

李结良等的研究结果表明，细胞在多孑壳聚糖支架上生长良好，密度、 L且代谢话性较单层培养条件下有大幅度提高，细胞在 7天后仍能保持较强的分泌白蛋白和合成尿索的功能，肝细胞在壳聚糖复合物上

的代谢话性更高。赵东愕等探讨了应用胶原壳聚糖支架体外构建组织工程心脏瓣膜的可行性。结果叫表明以胶原壳聚糖膜为支架体外构建组织工程心脏瓣叶 .种植细胞不仅能在材料表面生长 .还能合成细胞问质和血管活性物质，初步提示应用该种材料和方法构建组织工程心脏瓣叶是可行的。=迎军等 E实验发现壳聚糖一胶原复合膜具有优异的透光率和适宜的湿态力学强度，胞培养实验中，角膜缘上细人皮

细胞能在支架上较好地粘附和增殖分化，示复合膜支架具有良好的细胞亲和性。张立国等以液显

体石蜡作分散介质，环乳糖作交联剂，相悬浮法制备了性能优良的壳聚糖微载体，开反结果表明开环乳糖交联壳聚糖微载体是一种优良的肝细胞培养支架。

甲壳素及其衍生物作为一种天然的医用生物材料，因其具有的无毒性、良好的生物相容性和生物可降解性，在组织工程研究中有广阔的应用前景。但是随着组织工程的迅猛发展，支架材料提出了更高对的要求和挑战。而甲壳素及其衍生物由于它们自身的一些缺陷则在某种程度上限制 r它们的应用，需这要我们的进一步研究。同时，还应该加强与其它生物材料的复合研究，以组成新的复合材料，而取长补从

短，这也应该是目前组织工程中生物材料的研究重点之一。综上所述，聚糖和甲壳素是一类具有良好生物相容性的生物材料，以在药物载体和组织工程领壳可域中得到多方面的应用。

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曾春，蔡道章，大萍， .全等中华显微外科杂志，05 2( ) 34~37 20,8 4:2 2.黄志海，寅生，超， .工时刊，04 1(0:6~3 .董郭等化 20,8 1)3 9 石研超 .原一壳聚糖/橡胶双层皮肤支架及其原位诱导真皮再生性能，江大学硕士学位论文，0 6胶硅浙 20鲁元刚中华烧伤杂志，0 2 1( ) 1~2 . 20,8 1:9 0 杨军，光辉，伟， .二第二医科大学学报，t4 2 () 26 9 .杨刘等』海 20,4 4:9~27 7杨操，述华，靖远， .国生物医学工程学报，04 2 ( )24 9杨杜等中 20,34:9~2 9韩旭彤，树林，淑萍 .工新型材料，053 ( ) 1~1 .安潘化 20,3 1:0 3Ja gT,Ab e—athW,L ue cn C T.Bo tr l,2 0 in d lF t I arn i a imaei s 0 6,2 ( 8: 84~4 0 a 7 2 )49 9 3. Ab e— athW,Ja gT,E— sy u iGe— d lF t I in a lBaso n l T,e l Aca Bo tr 0 7,3 4) 5 3~51 . t a t imae,2 0 (:0 4

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. 6赵东愕，若冰，立成，武警医学，0,50 )4 4 1.李邱等 20 2 (6:1~46 4王迎军，晓飞，玲， .南理 _大学学报 (自然科学版 ) 20,4 8:~5赵卢等华 T,06 3 () 1 .张国，继伦，结良， .能材料，04 5(5:4 6 5潘李等功 20, 3 )64~ 4 .

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