SSR分子标记分析彩色马铃薯品种间的遗传关系

第4卷第7 3期21年7 0 2月

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4 f)61 6 37: - 9 J l 01 uy2 2

J una f rh a t nc lua v riy o r l te s o No Ag ut rl Uniest

S R分子标记分析彩色马铃薯品种遗传关系 S间的李先平一，王冬冬，陈秀华，朱延明，陈勤 L(. 1东北农业大学生命科学学院，哈尔滨 10 3;2加拿大农业及农业食品部莱斯布里奇研究中心，莱斯布里奇，艾伯塔省，加拿大 T14 3 5 00 . JB3云南省农业科学院经济作物研究所，昆明 6 0 0 . 5 2 5)

摘

要：利用 S R分子标记对来源不同的 3份彩色马铃薯种质材料进行遗传多样性研究。结果表明，4个 S 0 1

S R引物扩增 3个供试品种得到 12带，其中1 8 S 0 5条 2个为多态性带，平均每个引物扩增 31多态性条带，其中 . 2个 包括一些品种特异性的 SR位点。U G S P MA法进行聚类分析，在简单遗传相似系数 S 06处可将供试材料分成两 M= . 5大类群：类群 I为来自北美和欧洲的彩色马铃薯品种，在 S 0 2可分为紫色马铃薯亚群，红色马铃薯亚群和 M= .处 7白色马铃薯亚群；类群Ⅱ主要是不同来源的彩色马铃薯种质资源，包括二倍体原始栽培种，二倍体野生种和四倍

体栽培种安弟斯亚种资源。聚类遗传关系表明类群 I和类群Ⅱ遗传关系较远，性状差异较大，可以作为极好的遗传资源进行杂交育种，扩展和丰富彩色马铃薯种质遗传背景。 关键词：S R S;彩色马铃薯；遗传多样性中图分类号：￥ 3 52文献标志码：A 文章编号： 10— 3 9 2 1 )7 0 6— 9 0 5 9 6 (0 2 0— 0 1 0

引

Ge e i ie st e e r h o oo o a o c l a s b n t dv r i r s a c f c lr p t t ut r y SSR mo e u a c y i v lc l r ma k r/ i p g, A G D ndn H NX ha Z UY n i’ H NQn (. co lf re suXa i。 N o gog C E i u, H a mn, E i 1Sho o nn W, u gC Lf ce c s o h a t r ut r l ie s y Ha bn 1 0 3

, ia 2 L￣b d e Re e rh C ne, i S in e,N￣ e s i l a Unv r i, r i 0 0 Ch n; . e d g s a c e t r e Ag c u t 5 A d ut r n g i o d Ca a a L t b d e Ale t, n d 4; .Id s r l o s Re e rh g c l e a d A r F o n d, eh n g, b r Ca a a T1 B3 3 n u ta u— a J i Cr p s a c

Isi t, u n nA a e f giutr l ce c s K n n 5 2 5 Chn ) n tue Y n a c d myo A r l a in, u mig6 0 0, ia t c u S e收稿日期：2 1- 8 0 0 10— 9

基金项目：国家自然科学基金项目(0 6 13;国家留学基金项目( 3 805 )留金法[0 95 0 2 0]0 4号);云南省马铃薯工程技术研究中心项目(0 1 2 1DH0 8 1)

作者简介：李先平(9 3 ) 17一，男，副研究员，博士研究生，研究方向为马铃薯资源创新与新品种选育。E m i 1 a p g h t a _ r— a:i i@ o io lxn n m I n c通讯作者：陈勤，东北农业大学外聘教授，博士生导师，加拿大农业及农业食品部莱斯布里奇研究中心研究员，研究方向为植物分子生物学。E m ieeq@ar c a— al hn i g. . : gc

科学版，0 6 3 ()6— 4 2 0,21: 0 6 . 王月福，姜东，于振文，高低土壤肥力下小麦基施和追施氮等.肥的利用效率和增产效应[1 J_作物学报， 0 3 2 ()4 1 45 2 0, 94:9— 9 .

49 -4 6 0 9 .

霍中洋，葛鑫，张洪程，施氮方式对不同专用小麦氮素吸收等.及氮肥利用率的影响[J J.作物学报， 04 3()4 9 4 4 20,O5:4— 5 .

李雪娟，汤剑平，庄静.近年水稻生产上的技术问题和节肥增效技术[.海农业科技， 0 44:6 2 . J上 1 2 0 ()2— 7 朱兆良农田中氮肥的损失与对策 l1壤与环境， 0 0 91: . J土 2 0, ()1 6— .

丁艳锋，刘胜环，王绍华，氮素基、蘖肥用量对水稻氮素吸等.收与利用的影响 .物学报， 0 4 3 ()7 2 7 7作 2 0, O8: 6— 6 .

宋桂云，徐正进，贺梅，氮肥对水稻氮素吸收及利用效率的

等.影响[1中国土壤与肥料，0 74:4 4 . J. 2 0 ()— 8 4 曾建敏，崔克辉，黄见良，水稻生理生化特性对氮肥的反应等.及与氮利用效率的关系f1 J.作物学报，0 7 3 ()16— 7 . 2 0,37: 8 1 6 1 1 张洪程，秀芹，王戴其根，施氮量对杂交稻两优培九产量、等.品质及吸氮特 的影响[.国农业科学， 0 3 3 ()8 0 8 6 J中 1 2 0, 67: 0— 0 .

董桂春，王余龙，张岳芳，不同氮素籽粒生产效率类型籼稻等.品种产量及其构成的基本特点 l1作物学报， 0 6 3 (0: . J 2 0, 21)1 1—l 1 . 5 l 5 8

P n C s ma G. p rt e h l so i o e pa e r t sa d e g SB, a s n K Up e s od f t g n u t k ae n hr nr

asca d ioe frl e e ii ce i r gtd ie] soit nt g n e izr fce is n r ae r[ . e r ti n ii c JA rn my o r a, 9 8 9 () 1 8 1 5 go o u l 1 9, O 2: 7— 8 . J n

李广宇，彭显龙，刘元英，前氮后移对寒地水稻产量和稻米等.品质的影响『. J东北农业大学学报， 0 94 ()7 1.] 2 0, O3:— 1张慧，彭显龙，刘元英，前氮后移对寒地水稻群体质量的影等.响 .土壤通报， 0 4 ()4 2 4 6 2 1, 22:0— 0 . 1

江立庚，曹卫星，甘秀芹，不同施氮水平对南方早稻氮素吸等.收利用及其产量和品质的影响l1中国农业科学， 0 4 3 () J . 2 0, 74:

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Ab ta t T eg n t i ri m n 0p m n dp tte eei e t ae yS R(i l s rc: h e ei d esya o g3 i e t oao s r n si tdb S s e c v t g e w v g mps q e c e e t1 moe u a r e s Th e ut h we h t 1 2 b n s we e a l e n 8 e u n e r p a s l c lrma k r . e r s l s o d t a a d r mp i d a d 1 s 5 i f 2wer h we olmor hi sn SSR r e ai .Th

v ag um b fal ls p rSSR oc s es o dp y p c u ig 41 p i rp r m s e a er e n ero l e e e l u was 3 1 Se er l c s in d gr u p cf l l e e de e t d. e UPG MA un . 2. v a ac e so s an o p s e ic al esw r t ce Th i e f weih e ar g td p i

go pmeh dai m t v rg s a a s a e nS R d t s o e a l h ce s n o l ru to r ei a ea e ) n l i b s do S aa h w dt t l ea cs i sc u t h c ys h a t o db l s e t ru sw e i l ma hn o f in S e u lo 0 5 G o pIn l e ec s i di ot go p h ns e a f n wo i mp t i c e c t(M) q a t . . ru ic d d c g i e 6 um o to h olrp t t ulv r仃O s ft e c o o a o c t a s i m Nor t Am e ia an h r d Eur p c o e.whc o d b vi d t u pe ih c ul e di de o p r l p t t ub r p,r d p t t u gr u n i o ao u gr up o a o s g ou e o a o s b o p a d wht p t t s b o e .Th r e e m a y kn oo ee w r n ids o c lr f p t t g m pa m s n o a o er ls i Gr up whc icu e dili p i o I I, ih n ld d pod rmar c lv, d poi w i s e i s n y ut ar i l d i l p cal a d d t ta l d c o es r e . e cu t rr ul h we h tt e e r poi olrr ou c s Th ls e es t s o d t a h r wer arg n t elt s i d man s e ef e ei r ai c on hp an y dfe en e e e ou d G r u I Usn h o g o st a e c o sea h o h rc ul r t i r c s b t en Gr p I w an o p I . ig t e t

r up o m k r s c t e o d c eae w n w gm e t d r s r e o olrp t t r e n e pi n e e ou c sf rc o o a o b e dig.

Ke or:S re; oo oao g n t iest yw ds SR mak rc lr tt; e ei dv ri p c y

马铃薯是世界上种植最广泛的粮食作物之一

克隆和分子标记辅助育种等诸多领域。其中S R简 S(单重复序列),又称微卫星 ( i o t l ) M c s ei,由 16 r a lt e -个核苷酸为单位多次串联的 D A序列组成，其序 N

,

也是人类饮食中重要的抗氧化活性食物的来

源。马铃薯中含有多酚、类胡罗卜、类黄酮和素

维生素 c等多种抗氧化活性物质。近年开发的彩色马铃薯除含有以上各种抗氧化活性物质外，还含有多种花青素色素，使其抗氧化活性比常见的白肉和黄肉马铃薯增加 2 3 n—倍 ,食用彩色马铃薯更

列侧翼具有高度保守的 D A序列，重复次数差异 N较大，是检测多态性的有效方法。SR S具有试验操作简便、重复性好、多态性高、数量和信息量丰富、共显性遗传等特点，被广泛用于动植物遗传研究中。 19年 V iex首次利用 SR分子标记 95 elu等 l S

有益于人体健康，这使得育种学家把目标集中到高色素含量的彩色马铃薯新品种选育上。R ys ee等研究发现彩色马铃薯块茎薯皮含有较多的花青素

研究马铃薯嘲，其后 SR分子标记被广泛应用于马 S铃薯的遗传关系分类、品种鉴定1 9]、核心种质资源收集评价 u等领域。 q 目前已开发 20多个马铃薯 SR分子标记引 0 S

色素口 ,其含量比薯肉高出0~ .,但薯皮对花 . 1倍 9 6青素的贡献只有整个块茎的 2%左右，马铃薯花青 0

素主要还是来自于薯肉，因而培育高色素含量彩色马铃薯新品种关键在于薯肉色素含量高低。随着彩色马铃薯抗氧化、抗癌、抑制肿瘤活性等诸多保健功能的发现利用，彩色马铃薯成为当前

物，Ml un等公布了遍布马铃薯 1条染色体的 iore b 2 l2 S R l个 S分子标记引物“;A h eai” sknz等开发出3 0对 SR引物用于研究马铃薯野生种与普通栽培种的 S

多态性”;F igl等通过 E T数据库的 D A序列 2 enod 1 S N信息设计开发了6 4个 SR引物用于马铃薯遗传图 S谱构建。G ian于 2 0年通过对近 1 0个马 hs i等 l 04 0 0

马铃薯育种研究热点。目前彩色马铃薯的研究主要集中于色素含量、色素稳定性及保健功能等方面， 研究使用的彩色品种为国际上现有品种如“ us n R si a Bu” P rl euin和“u l Ma s”紫肉 le,“ upePrva” P r e j t等 p ey品种和“ u tnR s”“ e adnl等红肉品 Mona oe、 R dC ria” i

铃薯品种和品系的筛选鉴定，从 16 sR 5对 s引物中筛选出 l对表现好的 S R引物用于马铃薯研究，并 8 S于 2 0年通过对 7 2马铃薯品种的筛选鉴定，将 09 4个

种 1。而这些彩色马铃薯品种来源、遗传背景等尚不清楚，因此对彩色马铃薯品种间遗传关系进

多态性好、信息量大、重复性好的S R S引物从原来的 l对 S R引物扩增至 2对。S onr 8 S 4 poe等用 5对 0 SR引物对 7 2 S 4个马铃薯品种 8马铃薯野生种进个行多态性分析，对不同染色体倍性，不同来源的马铃薯进行分类研究 -。 - 相较于其他分子标记技术，SR分子标记多态 S性好，简便易用，重复性好，更适合于植物品种

行研究，利用亲缘关系较远的彩色马铃薯彼此杂交，发挥杂种优势，有利于培育色素含量更高的彩色马铃薯新品种。 分子标记技术广泛用于植物遗传育种、品种鉴定、生物多样性分析、遗传图谱构建、基因定位与

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李先平等：S R分子标记分析彩色马铃薯品种间的遗传关系 S

鉴定和遗传多样性研究。本文旨在利用 S R分子标 S

研究。表 1出了试验材料的品种名称、来源和品列

记研究彩色马铃薯品种间的遗传关系，分析彩色马铃薯的遗传背景及其亲缘关系，以便更好的为彩色马铃薯遗传育种服务。

种的皮色、肉色等主要特征特性。1方法 . 2 1 . D A提取及 S R分析 .1 N 2 S

1材料与方法 1 .材料 1

D A提取使用植物 D A提取试剂盒 ( N ay N N D esPa t n K t i e,May n,U A) l

ii n Mi ,Q a n g rl d a S,用 08 .%

琼脂糖电泳检测 D A质量及浓度。根据文献报 N道 i择多态性好的 S R引物进行彩色马铃薯，选 S

试验采用来自北美、欧洲和国际马铃薯中心不

同颜色马铃薯品种及彩色马铃薯育种中间材料进行

多态性研究，SR引物信息如表 2 S所示。

表 1用于 S R分析的彩色马铃薯品种 STa l Co o o a oc lia sf rS R r e n l ss be1 lr p t t u t r o S ma k ra a y i v

表 2用于彩色马铃薯品种遗传多样性分析的 S R引物信息 STa l S R rm e o e e i i e st n l ss f o o o a o c li a s b e2 S p i rf rg n t d v r i a a y i l rp t t u tv r c y o c

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P R反应使用 P R反应试剂盒 ( gP RMatr C C C s e Mi Kt i e ) x i ,Qa n,反应体系 1 L g 5,反应程序为：9 4℃预变性 3mi;然后进行 3个 F R循环：9 n 5 C 4℃变性 3,退火温度 ( 0S引物退火温度见表 2退火 3, ) 0 S

7二 2I c延伸 5;最后 7 0 S 2℃延伸 7mn i。扩增反应在P R扩增仪 (p edrm s ry e)_ C E pnof at ed r￣:。P R产 e进行 C物用 8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，2 0V电泳 1 0~ 1。电泳后用 1 .h 5%硝酸银进行银染，银染好的凝胶

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李先平等：S R分子标记分析彩色马铃薯品种间的遗传关系 S

O 52 1伽姗咖咖咖咖跏 O 41瑚湖呦咖姗 .

5 6

用数码相机在胶片观察灯下进行拍照。凝胶电泳和卯胛

多卯性信息量值 PC(oy op i ne态 I Plm rhs idx m cnet)用 N i多样性指数公式获得： c一 ot s采 n e’ S 1

银染方法参照国际马铃薯中心的实验程序。1 .数据分析 .2 2

∑( 其中 ),是带有 等位在J点上第个基因 j}位的群体比例，计算每个微卫星位点的PC I值。

根据 SR位点上银染带型的有无，转换为二进 S制数

据，有条带的赋值为“” 1,无条带的赋值为“” 0。二进制数据组成矩阵，利用简单匹配系数 (ipem thn ofcet S计算相似性系 Sm l acigce in, M) i数，然后进行 U G P MA聚类分析，自动生成树状 图。N S S P .软件用于计算遗传相似性和聚 T Y— C21类分析。

2结果与分析研究使用 Q ae公司的 D A提取试剂盒提取 i n g N

D A。结果表明试剂盒提取的 D A质量好，无降 N N解，品种问 D A提取量均匀 (图 1,经稀释后可 N见 )用于 S R分析。 S

注：图中编号与表 1相同。N t: h ait u b rsdni loT be1 oe T e r yn m e e ta a l v e ii c t

图 l马铃薯 DN A琼脂糖凝胶电泳Fi .1 Agr s l t opho e i fp a o A g o eeec r r sso ot t DN

21 S R引物多态性分析 . S

物扩增出的 3条带能把参试 3个品种全部区分开 5 0来，说明多态性好的 SR引物适用于大部分马铃薯 S品种的多态性研究。用 PC达到 08 1对引物 I值 .的 9对参试品种进行聚类分析，不仅能把所有 3个品 0种全部区别开，并且 l对引物的聚类结果和所有 9

表 3示了 SR引物对彩色马铃薯进行分析的显 S多态性信息。4对 SR引物在试验中共获得 12 1 S 5个

S R扩增条带，其中有 2条带为所有品种共有， S 4 在品种间不具有多态性；另外 1 8 2条带在品种间存在差异，显示多态性。 S R引物在各品种问显示 S

4对 S R引物进行聚类分析的结果高度相似，说 l S明筛选多态性好的S R S引物能更高效地对马铃薯品种进行遗传多态性研究。22 S . S R引物检测的特异性位点分析

l 1个多态性条带，PC值变幅为 03~ .4~1 I .2 09,平

均值 0 6 .。其中PC 7 I值达到和高于 0的有4:引 . 9个物 S G 06 P R扩增中获得 1个条带，其中 1 T 0 1在 C 1 0个显示为多态性条带，PC为 09;引物 S 10 I值 . 4 T0 3的 9位点均为多态性条带，PC值为 09;引物个 I . 3S 12 T

0 4的 9位点中 8显示为多态性条带，PC个个 I

在 SR扩增结果中，我们检测到一些品种和组 S合特异性的条带 (表 4。3见 )个特异性条带 S 16— T0 010 T 0 1— 9 7、S G 0 0 10和 S M0 2— 5能单一识别品 T 0 5 10

值为 09;引物 S M10 6均为多态性条带， .3 T 14的个

种 G 6 3— 0 0— 3 1;条带 S 11— 7能检测品种 Aln T07 10 t— a t;S 12— 2能识别品种 S eoy个特异性 i T03 10 c hpd;2条带 S M0 2— 5 T 0 8 1 0和 S M 0 1 1 0检测来源于 T 03—8能

PC I值为 0。以上 4 . 9对引物在品种间显示了良好的多态性，适合用于马铃薯品种问的多态性分析； P C在 08~ .之间的有 1对引物，亦表现出较 I .0 08 9 5好的多态性；PC值在 0 0 0 9 I .~ .的有 1对引物； 7 7 2 PC值在 0 0 0 9间的有 4引物；PC在 I .~.之 6 6对 I值05~ . . 05间的有 5引物；PC值低于 05的有 0 9之对 I . l引物。图 2为引物 S 12对 T04扩增 P R产物的聚丙 C烯酰胺凝胶电泳结果。 通过聚类分析发现， PC值达到 09 4引 I .的对

CP的二倍体彩色马铃薯资源 G 6 2— I 0—4 4和 G 6 0— 3— 0 3 1;特异性条带 S M10—4能专一检测来源 T 6 15 1于 CP的四倍体彩色马铃薯资源 G 63—3 G 6 I 0—62和 o- 3—;2特异性条带 SM12 2和 SM2"-3 82个 T 0￣20 T 2 20 04能从参试品种中检测出品种 12—0 5和 10— 04 16 0339个特异性条带 S 14— 7和 S M12— 4能 2;2 T0 8 2 0 T 0 9 1 0

检测品种 20—23和 Prl Ma s;条带 S M 04 13 up j t e ey T一

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l 1— 8 0 7 1 0能检测品种 P rl V l y和 12— 0 7 upe a e l 02 8 1;

G 6 3—0 T 05 10测的 4马铃薯品种 0— 3 1;S M15—9检个N r n、R se B rak S eo y D r t y c ol d a ust ub n、 h p d和 em

o L n h

S M 0 8 10 T 0 2—6能专一检测来源于 CP的 4彩色马 I个铃薯种质 G 6 3— 3 G 6 3—、 G 6 2— 0— 6 2、 0— 8 2 0—4 4和

均为白肉品种，该条带可能与马铃薯白色薯肉相关。

表 3 S R引物分析 3个彩色马铃薯品种的多态性信息 S 0Ta l Po y r h s e e l d b S p i e 0c l rp t t u tv r b e3 l mo p imsr v a e y S R rm ri 3 o o o a o c l a s n i

M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 1 2 3 1 1 1 1 1 1 0 21 2 3 2 2 62 8 2 0 1 1 1 1 4 5 6 7 8 9 2 2 2 4 5 2 7 2 9 330b 0 p— 2 0b 0 p—

1 0b - 0 p- W

注：图中编号与表 1相同。N t T e a e m e ii n cl b . o: h r t n brsd ta t T l 1 e v iy u e i a e o

图2引物 S 12对 3个彩色马铃薯品种 P T 04 O CR扩增的电泳结果F g 2 Re u t f lc r p o e i f i. s l o e t o h r sso e PCR r d c u i g S 0 4 f r3 o o o t a fe p o u￣ sn T1 2 o 0c l rp t o v￣e s a i

第7期

李先平等：S R S分子标记分析彩色马铃薯品种间的遗传关系

表 4 S R分子标记检测到的彩色马铃薯品种特异性位点 ST b e4 Ac e so n r u p cfcS R l lsd t c e n c l rp t t u tv r a l c s i n a d g o p s e i S al e e e t d i o o o a o c i a s i e i

23彩色马铃薯品种聚类分析 -表 3示 S R引物对 3个彩色马铃薯品种进行显 S 0

Al e为红色马铃薯外， lRd 其他均为紫皮紫肉马铃薯品种，可视为紫色马铃薯品种亚群。亚群 I2 I3 .和 .

分析的结果，在各个品种中检测到 6~0个等位位 6 16点，平均每个品种检测到 9个等位位点。根据检测 2的多态性位点，使用 U G P MA方法进行聚类分析，分析结果见图 3。 3个品种在 S - .处分为两个 0 M 05 6主要聚类

群，类群 I共有 2个品种，包括各种颜色 3马铃薯品种，所有品种均为马铃薯普通栽培种 (.ue sm) 5tbr u,品种间遗传相似度较高。类群 I o在S - .处又可以分为 5 M 02 7个亚群：亚群 I 1 .中除品种

主要为红色马铃薯品种，个品种中只有 Al t和 9 tnc aiSeoy白皮白肉，其他均为红皮红肉，可视为红 hpd是

色马铃薯亚群；亚群 I4 I5 7品种，其中 .和 .共个N rn o ad为红皮白肉， N r s r ust ubn l ot t、R se B rak和 ha

Srn均为白皮白肉，而另外 3彩色马铃薯则均为 tl g ii个白皮白肉品种杂交后代，其中 10—2为 N r s r 03 39 ot t后 ha代，11-0和 10— 3亲本之一为 Sfn,因此 0438 06 68 t ig i l类群 I4 I5 .和 .可归为白色马铃薯亚群。B r l y o aVa l e

一一一一一~一

A E yly pre ae u l l 1 .lRe d

La O乙 a Jn y ne

u叫 a s jt ey

G0 4_ 6 4 G0 3—1 6— 3 0 G0 3— 3 6— 6 2 G0 3 - 6- 8 2

07 .0

08 .0

09 .0

1o .o

图 3 3个彩色马铃薯品种的 S R谱带聚类分析结果 0 SFi . De d o r m fcu t ra a y e f 0 c l rp t t u tv r y S R c e n g3 n r g a o l s e n l s so o o o a o c l a sb S s r e 3 i

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类群Ⅱ共有 7品种，包括参试品种中其他马个铃薯种质材料，在 S 06处分为 2亚群，亚群 M= .6个Ⅱ 1 20— 23为二倍体野生种 Spn aic m .中 04 13 . intet s u

品种大致归类，说明马铃薯颜色为多基因控制，色素相关基因位于多条染色体上。同时由于参试彩色

马铃薯品种多来自于北美，遗传背景相似，亲缘关系较近，因此品种间色素上的差异能被 S R聚类区 S分开。

和普通栽培种体细胞杂种，G 6 2—和 G 6 3一 0—44 0— 3 l是来自国际马铃薯中心的二倍体原始栽培种 0 S snt u . eo m m的杂交后代。该亚群包

括参试品种中 t o 所有已知二倍体血缘的试验材料。亚群 1 2来自 1是 . 国际马铃薯中心的 ad e亚种和普通栽培种的 ni肥 g杂交后代。

类群Ⅱ除了 2北美现有的彩色马铃薯品种个

外，包括了参试品种中其他种质来源的马铃薯材料，其中 3个来自二倍体种：1个有野生种 Spna .in— tetm血缘，2个是原始栽培种 S sntm m后 ic s u .t oo u e代。类群Ⅱ的另外 2品种为普通栽培种安第斯栽个培亚种 (.n i n ) S adg a后代，马铃薯四倍体种的彩色 e马铃薯性状主要来种于该亚种，但经多年的农艺

3讨论 各种不同的分子标记应用于马铃薯遗传多样性、系统分类以及指纹图谱建等研究。G r等用 o g R L分子标记鉴定德国马铃薯品种；G ia等 FP h ln si用 R P分子标记分析马铃薯原始栽培种Sp u j AD .h ra e的种间变异情况；Km等使用 A L分子标记对 q i FP马铃薯品种进行识￣[;B re等用 IS分子标记 J” ont l SR比较来源于欧洲和阿根廷马铃薯品种的异同n。相。 1较于上述各种分子标记，由于 SR分子标记具有多 S态性好、重复性好和方便利用的优点。本研究使

性状改良和定向选择，使得现代栽培的彩色马铃薯品种与安第斯栽培亚种之间的遗传关系较远 (见

图3。类群Ⅱ )包括二倍体和四倍体的彩色马铃薯种质，这些种质代表马铃薯品种中颜色性状的原始来源，在色素表现上和北美彩色马铃薯品种相似，但在其他性状如植株、叶片形状、块茎薯形、芽眼深浅等植物学特征上与其他彩色马铃薯品种间差异很大。S R聚类从进化关系上把彩色马 S铃薯种质划分成两类，一类为现代的彩色马铃薯 栽培品种，在农艺性状，适应性和产量等方面经

用 SR S分子标记对彩色马铃薯进行遗传多样性研究 Mlore i u等用 3 b n种基于 P R技术的分子标记评价 C 1个马铃薯栽培品种多样性，发现 S R 6 9 1 S分子标记在分析马铃薯品种间遗传距离时效率更高，并在此基础上开发了 12 S R引物用于马铃薯研究。 1对 S王绍鹏等对 SR分子标记扩增条件进行优化，并把 S S R多重 P R反应

体系应用到马铃薯分子标记研究 S C中” G ian等总结的“铃薯遗传鉴定试剂。 hs i l马盒” P t og n t e tykt共包括 2对 S R引 ( oa e ei i n t i t cd i ) 4 S

过改良驯化，适宜现代的马铃薯生产加工。另一类则代表了彩色马铃薯种质的来源，是彩色马铃薯未经改良前的种质资源，这些资源具有更丰富的彩色色素基因，是马铃薯品种选育的宝贵种质

资源。从聚类关系图看出，类群 I中的彩色马铃薯品种间亲缘关系近，相似度高，遗传背景相似，彼此问不宜再用作杂交育种的亲本配对。而类群Ⅱ不仅与类群 I的彩色马铃薯关系较远，类群内的种质

物，在马铃薯 l条染色体的每条染色体上分布有 2 2

对 SR引物，其对 72马铃薯品种识别效率达 S 4个9 .% tI 35。

问来源也不相同，彩色马铃薯育种中利用类群 I和类群Ⅱ彼此进行杂交可以拓展彩色马铃薯遗传背景，提高彩色马铃薯新品种选育效率。【参考文献】

为更好研究彩色马铃薯遗传多样性，在以上 2对 S R引物基础上，还收集了文献报道中多态 4 S性、重复性好的 SR引物用于本研究彩色马铃薯多 S

态性分析。从聚类分析结果看，马铃薯品种聚类分成 2个类群，类群 I全部为普通栽培种，包括大多数彩色马铃薯品种和北美栽培面积较大的白色薯肉品种。这些品种根据颜色不同分成 3个亚群：紫色品种亚群、红色品种亚群和白色品种亚群。[】 B o nC Wrla D rt, t 1Bedn u i oaos 1 rw, os dR, us e . reigs de i p tt t R a t sn ecn i n i ocn aos f nhcais]A r a t a f otn ghg cnettn t ynn[. me cnJ[ l ai h ri oa o J i or o e P toR sac, 0 3 O4:4 - 4 . oa eerh 2 0,8 ()2 1 2 9 t

【 2] R ysLF Cse - eal . ga a o ieis n oo r ee , inmsZ vl sL Derdt nkn t dc l o i ca uo n h c a is n q e u xr cs f p rl— a d e— eh f a to y nn i a u o s e ta

t o up e n rd_ s l f

SR引物来自遍布马铃薯 l条染色体的遗传位点， S 2 研究根据遗传相似度聚类，把彩色马铃薯不同颜色

p tos( lnm t e sm L)】 F o hm s y 2 0, 0 o t S a u b o . J odC e i r 0 7 10 ae o u ru【. t,

第7 1 5()8 5 8 4 3: 8— 9 .

李先平等：S R分子标记分析彩色马铃薯品种间的遗传关系 S

9 6

t n ad m p ig o i l sq ec ee tl ii p toJ. i n a pn fs e e un erp a o n oa[ o mp c t] Moeua dG nrl e e c G, 9 82 93: 3 - 4 . lclr n e ea G nt s a i MG 19, 5()2 3 2 5h e a i A,Ch n a i E,L v a i U,e 1 t a .De e o me t o c - v l p n f mi r o[2 As k n z V 1】

【】 R ysL l r Cseo— ealsL nixdn aa i, 3 ee,J Mie, i rs Z vl .A t ia tc pct l n o o y atoy nn ad tt pe ois n p rl- a d rd f se nh ca is n oa hn l i upe n e - eh d l c l

ptt eoye[ . meia ora o oaoRee r, 0 5 oa gn t s] A r nJunl fP t sac 2 0, o p J c t h8 ()2 2 7 24: 7 - 7 . 1l D,T o s n M e 1 An ix d n r p ri s h mp o D, t . to i a t o e t a p e[ Su h o 4】 t s n f C,Ho m

s tlie mak r i p tt n ter u e i p yo e ei a d ael re t s n oao a d h i s n h lg n t c n

i e i i a ss]Geo e 20,4 5— 2 f grr t g n ye[. n m, 0 14:0 6 . n p nn al Jd a i o[3 F ig l, ly, r r N e 1 Ma pn n h rce zt n 1】 en o S L o dJ Noeo, t . p iga dc aa tr ai

o ut as n s lcin fo f c lv r a d ee t s rm te oo a o oao

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o e S - eie coaele r oao(o n m brsm f wE T dr dmi stlts o t Sl u t eou n v r i f p t a u L)】T ert a adApl dGeeis20, 13: 5- 6 . .J. hoe cl n pi n t,0 5 1 )4 6- 6『 i e c 1( 4ili Nu e,Herr e 1 Ro u ta dhihy if - o【4 Ghsan M, n zJ reaM, ta. b s n g l n r 1]

pormJ.A r a o ra o oa eerh 0 8 54: rga[] me cn Junl fPtt R sac,2 0,8 () i o2 7 2 6 6-7. ie x l E,S e L h n Y, Pa M M.An l ss o、 e g n t z a y i f t e e i h c【 Ve l u R 5】 c mp s t n f n h r d rv d o ao y a d ml a l e o o ii o a t e - e e p t t b r n o y mp i d o i i f

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Mo clr re ig2 0, 33: 7— 8 l ua edn, 0 9 2 ()3 7 3 8 e Bg R,Dc a h s h b lU, t rE, ta .Dic mi a i n a n h c t c a e Rit e 1 e s r n t mo g i o【5舶 r 1】 1 6 t ta od p t t a i t s b n e p n s u i g h g l o y 3 e r pli o a o v r ei y f g r r t sn i h y p l - e i i

plmo hcD n i l q ec pas]G nme 19, oy r i NAa ds es un er etJ. e o, 9 5 p mp e e[3 f1 5—1 6 86:1 3 2. 1 1W i 【 Prv nJ P wel, a g Mirs tlt n lsso eain 6】 o a, o l W u h R. coael ea ay i frlto -

m rhc Amak rJ. rpSi19, 23: 1— 1 . o iDN r e[]C c,9 2 3 ()85 8 9 p s o[6 G ianM, h n, aad e a. re- si e

a l g 1】 hs i Z a gD FjroD,t 1Makras tdsmpi l s n o eclvt da oaoSlnm h r acl c o s g fh ut ae An enp t oa u p ue ol t nui t i d t j ei n

siswti ut a d pto]T ert a a dApl dG n ts hp i nclvt a[ . hoec n pi eei, h i e o tJ il e c 19, 28: 0 8 1 8 . 9 6 9 ()17 - 0 4c a E A,Pa v i a L V,C r a h H,e 1 a v l o H ta .Mo e u a h r c l c l rc a a—【 Ro h 7】 trz t n a d g n t i e st fp t t u i a s u i g S R n e ia i n e e i d v r i o a o c h v r s n S a d o c y o

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R D mak rJ.Co Bedn ad A pid Boeh o g, AP res] rp re ig n p l i c nl y[ e t o2 1(0: 0 - 1 . 0 o1)2 4 20 l e o【 d lreaJ Baa d l, p J e 1 Ge ei lt nhis 8】 eGaar t, r n a a L RisD, ta. n tcr ai s p

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o D J l a n v mp I【O S oe N nz, rjl, t 1E t s es l s( eo l】 p nr M, ue TuioG e . xe i i e eun e rp a gn tpn f tt n ressp r ao ev u - eet eoy igo aol dae u p t am jr eu a o p a o s r lt no h i gn ols u tr n l s ct nJ. rce— i fter e ep o t cu ad ca i a o[ Po ed o r e sf i] i

clvtdptt[. l ua re ig 19,()17 16 utae aoJ Moe l B edn,9 7 32: 2 - 3 . i o] cr

邱彩玲，李勇，马铃薯 D A

提取及 S R等. N S标记分析【. J】 【0王绍鹏， 2】东北农业大学学报，0 9 3()7 1. 20, 95: - 2 刘李勇，马铃薯 S R标记多重 P R反应体系等. S C【1王绍鹏，尚武， 2】优化研究f . J东北农业大学学报， 0 0 4 (0: 7 2 .】 2 1, 11)1— 3

ig fteN tn l cd m f cecs 20, 0 (9: 9 9 - nso ai a ae yo i e, 07 144 ) 13 8 h o A S n1 4 3 9 0 .

Mi o r eD,Me e C l u b n y rR,Col sA, ta. slt n c aa tr a ln J e Ioai, h rcei - i 1 o s

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