细胞工程习题总结及参考答案

第二章

一．思考题

1. 为什么要严格保持细胞工程操作环境和物品的无菌？

答：植物组织培养中用到的培养基含有丰富的营养成分，有利于培养物的生长，然而各种杂菌同样也可以在上面迅速生长，所以植物组织培养过程中污染现象经常发生。培养基一旦被污染，迅速生长的各种杂菌不但会和培养物争夺营养，而且这些杂菌生长的过程中会生成大量对培养物有害的物质，导致培养物迅速死亡。 2.配制培养基时，为什么要先配制母液？ 答：1.方便配置其他培养基；

2.保证各物质成分的准确性及配制时的快速移取

第三章

一．思考题

1. 胚状体与合子胚有何异同？

答：异：体细胞胚又称胚状体，是指离体培养条件下没有经过受精过程而形成的胚胎

类似物。

子胚是指由植物的雌雄配子融合形成的合子继而发育形成的胚，经过受精作用。 同：都含有一整套遗传信息,都可以发育成新一代生物个体. 二．练 习 一、单选题

1、植物组织培养是建立在___理论基础上的。(B)

A进化论 B植物细胞全能性 C基因决定论 D细胞多样性

2、植物组织培养的培养基不含___。(C)

A含N物质 B碳源 C血清 D生长素 3、过滤除菌适用对象___。(D)

A玻璃器皿 B塑料器皿 C金属器皿

D易被高温破坏的材料如抗生素、激素等试剂

4、将___重新转移到成分相同的新鲜培养基上生长的过程称为继代培养。(B)

A外殖体 B愈伤组织 C 生根苗 D 幼苗 5、下列植物细胞全能性最高的是（A）

A. 形成层细胞 B. 韧皮部细胞 C. 木质部细胞 D. 叶肉细胞

6、植物组织培养过程中的脱分化是指（C）

A. 植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞 B. 未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程

C. 植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生愈伤组织的过程 D. 取植物的枝芽培育成一株新植物的过程 三、判断题

?1、非胚性愈伤组织与胚性愈伤组织具有同样的再生能力（×） ?2、一个细胞由分生状态转变为成熟状态的过程，叫脱分化。（×） ?3、所有的植物培养材料都必须高压灭菌锅灭菌121℃、15分钟。（×） ?4、继代培养的最适时间是愈伤组织的生长达到高峰期时。（×） ?5、高温处理和低温处理均是控制胚状体同步化的方法。（×）

第四章

一．思考题

1. 为什么试管苗在转移到土壤的过程中需要炼苗? 答：试管苗和一般的田间幼苗不同，试管苗长期生长在培养容器中，与外界环境隔离，

形成了一个恒温、高温、高湿、弱光、无菌的独特生态环境。由于试管苗在培养瓶中与温室的条件差别很大，转移到土壤的过程中由异养变为自养，由无菌变为有菌，由恒温、高湿、弱光向自然变温、低湿、强光过渡，这一变化十分剧烈，为了使试管苗适应移栽后的环境并进行自养，必须要有一个逐步锻炼和适应的过程，这个过程叫驯化或炼苗。炼苗的目的在于提高试管苗对外界环境条件的适应性、提高其光合作用的能力、促使试管苗健壮、最终达到提高试管苗移栽成活率的目的。

2. 为什么浓度为70~75%的酒精消毒杀菌效果最好?

答： 酒精能够消毒杀菌是因为它渗入细菌体内，使组成细菌的蛋白质凝固。当使用

95%的纯酒精消毒时，高浓度的酒精与细菌接触，就能使得菌体表面迅速凝固，形成一层薄膜，组织了酒精继续向菌体内部渗透，细菌内部的细胞没能彻底杀死。而有的细菌遇到高浓度酒精时，会迅速产生防护反应，形成有坚硬外壳的孢子，以对抗酒精的伤害。待到适当时机，薄膜内的细胞将重新复活。 因此，使用浓酒精达不到消毒杀菌的目的。使用70％—75％的酒精，既能使组成细菌的蛋白质凝固，又不能形成薄膜，能使酒精继续向内部渗透，而使其彻底消毒杀菌。若酒精的浓度低于70％，也不能彻底杀死细菌。

二.练习题

一、选择题（单选）

1. 甘薯种植多年后易积累病毒而导致品种退化。目前生产上采用茎尖分生组织离体培养的方法快速繁殖脱毒的种苗，以保证该品种的品质和产量水平。这种通过分生组织离体培养获得种苗的过程不涉及细胞的（C） A. 有丝分裂 B. 分化 C. 减数分裂 D. 全能性

2、人工种子是指植物离体培养中产生的胚状体，包裹在含有养分和具有保护功能的物质中，并在适宜条件下能够发芽出苗的颗粒体。下列与人工种子形成过程无关的是（D） A．细胞的脱分化和再分化B．细胞的全能性 C．细胞有丝分裂 D．细胞减数分裂

3. 植物组织培养依据的原理，培养过程的顺序及诱导的植物激素分别是（A）

① 细胞全能性 ② 离体植物器官，组织或细胞 ③ 根，芽 ④ 生长素和细胞分裂素

⑤ 生长素和乙烯 ⑥ 愈伤组织 ⑦ 再分化 ⑧ 脱分化 ⑨ 植物体 A. ①、②⑧⑥⑦③⑨、④ B. ①、②⑦⑥⑧③⑨、⑤ C. ①、⑥②⑨⑧③⑦、⑤ D. ①、②⑨⑧⑥⑦③、④

4.运用植物组织培养技术培育脱毒植物，其中选择培养的组织细胞来自(C) A. 韧皮部 B. 嫩叶 C. 茎尖 D. 花瓣

5. 有关细胞全能性的叙述中，不正确的是（B）

A. 受精卵在自然条件下能够发育成完整的个体，全能性最高 B. 卵细胞与受精卵一样，细胞未分化，全能性很高 C. 生物体内细胞由于分化，全能性不能表达

D. 植物细胞离体培养在一定条件下能表现出全能性 6、胚状体是在植物组织培养的哪一阶段上获得的 （B）

A．愈伤组织 B．再分化 C．形成完整植株 D．取离体组织 二、判断改错题

?1、无病毒苗（脱毒苗）就是植物体已没有病毒感染了（×） ?2、茎尖外植体越大，脱毒效果越好。（×）

?3、一般情况下，细胞分裂素与生长素的比值高有利于根的分化（×） ?4、污染、褐变和玻璃化现象都是因无菌操作不规范造成的（×）。 ?5、褐变现象是由于培养条件不适应引起的而与培养物本身无关（×） ?6、一般的植物组织培养体系中，培养物是异养生长的（?）

第五章

一．思考题

1. 复习：什么是初级代谢产物和次级代谢产物？

答：初级代谢产物：通过初级代谢产生的维持细胞生命活动必需的物质，如氨基酸、核

苷酸、多糖、脂质、维生素等。在不同种类的细胞中，初级代谢产物的种类基本相同。

次级代谢产物：通过次级代谢合成的产物，大多是分子结构比较复杂的小分子化合物，并非细胞生长所必需的。如酚类、香豆素、生物碱、萜类等。大多具有生物活性,是目前研究的热点. 2. 为什么要采用两步法培养？

答：由于细胞生长和次生代谢物产生对培养基和培养条件要求不同。所以在大规模植

物细胞悬浮培养中，为了提高生物量和次生代谢产物一般采用二步法培养工艺。 二.练习题 一、选择题

1、植物细胞大规模培养中下列哪种培养方法不能使细胞保持在对数生长期（C） A、连续培养 B、半连续培养 C、成批培养 D、开放式连续培养 2、与冠瘿培养技术有关的是（D）

A、根癌农杆菌与Ri质粒 B、发根农杆菌与Ri质粒 C、发根农杆菌与Ti质粒 D、根癌农杆菌与Ti质粒

3、在进行细胞培养时细胞起始密度不能低于某一临界值，一般为（C）个/mL。 A、 101~102 B、103~104 C、104~105 D、 105~106 4、细胞两相培养技术中正确的是（C）

A、细胞在有机相中生长,产物转移至水相中. B、产物能较容易地被吸附或溶解于水相中.

C、减少了产物的反馈作用, 可以提高产物含量. D、有机物或多聚化合物能吸收培养基中的有效成分.

5、通过流态化来强化固体颗粒与流体相之间的混合、传质和传热的反应装置是（B） A、填充床生物反应器 B、流化床生物反应器 C、中空纤维反应器 D、机械搅拌式生物反应器 二、判断改错题：

1、伊凡蓝染色法可使有活力的细胞吸收染料显蓝色，无活力的原生质不吸收显示无色。（×）

2、利用饥饿法和热处理法可以使悬浮培养的细胞趋于同步化（×）

3、两步培养技术一般适用于植物组织次生代谢物的生长偶联型（?）

4、毛状根是根癌农杆菌感染双子叶植物后，其Ri质粒上的T-DNA片断整合进植物细胞核基因组中诱导产生的一种特殊表现型（×）

6、鼓泡塔式反应器是利用从反应器底部通入无菌空气产生的大量气泡，在上升过程中起到供氧和混合两种作用。（?）

第六章

一.思考题

1. 为什么原生质体在稍微高渗溶液比在等渗溶液更稳定？

答：原生质体由于没有了细胞壁的保护，对外界条件中渗透压比较敏感，如酶解液、洗

涤液或培养液与细胞内的渗透压相差过大，容易导致原生质体涨破或过分收缩而破坏内部结构，最终导致细胞死亡。在等渗溶液中，原生质体细胞膜所受的压力与平常细胞相当，而在稍微高水平的渗透压下细胞轻微失水,这样能减轻失去细胞壁后细胞膜的压力,可以阻止原生质体的破裂和出芽，也就是说高渗溶液不会对原生质体的结构造成破坏反而有利于原生质体保持稳定。 二.练习题

一、选择题（单选）

1、与传统的有性杂交法相比，植物细胞杂交的最大优点是（B）

A．可使两个亲本的优良性状组合到一起B．可以克服远缘杂交不亲和的障碍 C．可以培育出高产性状优良的新品种D．可以降低生产成本提高经济效益 2、植物细胞杂交要先去除细胞壁的原因是( C )

A．植物体细胞的结构组成中不包括细胞壁B．细胞壁使原生质体失去活力 C．细胞壁阻碍了原生质体的融合D．细胞壁不是原生质的组成部分 3、下列叙述中，除哪项外，都与植物体细胞杂交密切相关?（C）

A．利用离心、振动、电刺激等诱导 B．利用聚乙二醇(PEG)等试剂诱导 C．快速繁殖、培育无病毒植株 D．克服远缘杂交不亲和的障碍 4、要获得一个杂种植株，需要下列哪项步骤（A）

A．分离原生质体→诱导原生质体融合→组织培养→得到杂种植株 B．分离原生质体→原生质体融合→杂种植株 C．获取细胞→原生质融合→组织培养→杂种植株 D．获取细胞→原生质直接融合→组织培养

5、植物体细胞杂交能解决不同种植物之间由于生殖隔离而不能进行有性杂交的问题。植物体细胞杂交过程不涉及 （A）

?A.使用限制性内切酶B.使用纤维素酶和果胶酶

?C.诱导两种不同的细胞融合 ?D.选择有利于杂种细胞分裂和分化的培养基

6、在培育的过程中，需要对制备的原生质体的生活状态及活力进行检测。下列实验中最适宜的是（B）

?A．观察细胞结构是否完整B．观察细胞质流动的快慢

?C．观察细胞周期的长短?D．观察细胞质壁分离和复原的速率

7、设计植物体细胞杂交实验时，如果期望获得性状优良的作物新品种，不需要考虑的是（A）

?A、亲本细胞生殖隔离问题B、选择具有优良性状的亲本

?C、亲本细胞融合的技术?D、杂种细胞愈伤组织的诱导和再分化。

8、驱蚊草是把天竺葵和香茅草的叶肉细胞进行诱导融合培育而成的。下列关于驱蚊草培育的叙述中，错误的是 （C）

?A．培育方法属于细胞工程育种，其优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍

?B．培育过程要用到纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂或离心、振动、电刺激等方法 ?C．培育手段是植物体细胞杂交，它不同于植物组织培养，无愈伤组织和试管苗形成 ?D．驱蚊草不能通过天竺葵和香茅草有性杂交而获得是因为不同物种间存在生殖隔离 二、 下图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答：

（1）步骤①去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体，最常用的方法是酶解法。 （2）步骤②一般常用的化学试剂是PEG , 目的是诱导不同植物原生质体融合。 （3）在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，运用的技术手段是植物组织培养，其中步骤④相当于脱分化，步骤⑤相当于再分化。 （4）植物体细胞杂交的目的是获得新的杂种植株。使远源杂交亲本的遗传特征能够在新的植物体上有所表现，其根本原因杂种植株获得双亲的遗传物质。 （5）若运用传统有性杂交方法能否实现这一过程？不能。并说明理由因为不同种生物之间存在生殖隔离。因此，这项研究对于培养作物新品种方面的重大意义在于克服远源杂交不亲和的障碍。 （6）利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种过程中，遗传物质的传递是否遵循孟德尔的遗传规律？为什么？ 答：否，有性生殖的过程中进行减数分裂，才遵循孟德尔的遗传规律。

第七章

一.思考题

1. 为什么花药培养时要先进行预处理？

答：预处理的目的是改变小孢子的发育方向，使尽可能多的小孢子从配子体发育途径转

向孢子体发育途径（即成为具胚胎发生潜力的小孢子）。适当的预处理可以增强雄核生殖的诱导效应，使绿苗产量大量增加。 2. 单倍体植株倍性鉴定？？

答：1、直接鉴定法（染色体计数法）：通常取根尖、茎尖等分生组织区进行制片，采用

压片法和去壁低渗法进行染色体标本制备，需用卡宝品红、乙酸洋红或铁矾-苏木精等染液进行染色、镜检和计数。 2、间接鉴定法

? 植株形态观察法：单倍体植株瘦弱，叶片窄小，花小柱头长，花粉粒小，不结实。 ? 细胞形态鉴定法：叶片保卫细胞大小、单位面积上的气孔数及保卫细胞中叶绿体的

大小和数目与倍性具有高度的相关性。

? 此外，还有DNA含量测定（流式细胞仪） ?核体积测量法 ?生化与分子标记鉴

定

3. 单倍体植株的染色体加倍？？

答：对单倍体植株进行染色体加倍处理主要采用化学诱变剂。

? 常用的化学诱变剂：秋水仙素、8-羟基喹啉、对二氯苯、富民农等。 ?利用秋水仙素诱导花粉植株染色体加倍的方法有：

? （1）小苗处理法（整株幼苗浸泡于一定浓度的秋水仙素中） ? （2）茎尖处理法（以蘸满一定秋水仙素溶液的棉球直接置于植株的顶芽或腋芽上） ? （3）培养基处理法（将单倍体植株的不同外植体或细胞接种于含有一定浓度的秋

水仙素的培养基中培养）

二.练习题 一.单选题

1、植物的花药培养形成的植株在下列育种过程中最有意义的是（C）

A．杂交育种 B．人工诱变育种 C．单倍体育种 D．基因工程育种 2、花药培养技术与植物组织培养技术的不同之处在于（D） A．培养基配制方法 B．无菌技术 C．接种操作 D．选材 3、在进行花药培养时，花药应选择什么时期？（B）

A 双核期 B 单核期 C三核期 D 四分体期

第八章

一.思考题

1. 幼胚培养需要比较复杂的培养基为什么？

答：因为幼胚在胚囊里生长时是处于异养状态，幼胚的生长发育不仅依赖于它们细胞

间的代谢，而且还依赖于周围胚乳的丰富营养。所以，要使离体胚能继续发育至成熟胚，必须尽可能提供与幼胚相似的环境条件。 2. 弱光和黑暗更有利于幼胚培养为什么？

答：因为在自然条件下，胚在胚珠内发育是不见光的。光照对胚芽生长有利，而黑暗

则对胚根生长有利，大多数处于球形期至心形期的幼胚，需要在黑暗条件下培养2周后再给予一定时间的光照。

3. 在一朵花中胚珠与子房的位置关系怎样？各发育成什么？

答：子房是被子植物生长种子的器官，位于花的雌态下面，一般略为膨大。子房里面

有胚珠，胚珠受精后可以发育为种子，是被子植物花中雌蕊的主要组成部分，子房由子房壁 和胚珠组成。当传粉受精后，子房发育成果实

4. 植物胚胎培养中成熟胚与幼胚培养有何不同？幼胚培养时胚的发育方式有哪几种？各有什么特点？ 答：（1）成熟胚在比较简单的培养基上（只要含有大量元素的无机盐及糖），一般即能

正常萌发生长。但在有些情况下，对于远缘杂交胚的培养或次生胚的增殖等，则需要加入有机物或生长调节剂。而幼胚培养需要比较复杂的培养基因为幼胚在胚囊里生长时是处于异养状态，幼胚的生长发育不仅依赖于它们细胞间的代谢，而且还依赖于周围胚乳的丰富营养。所以，要使离体胚能继续发育至成熟胚，必须尽可能提供与幼胚相似的环境条件。

（2）a、胚性发育：幼胚接种到培养基上以后，仍然按照在活体内的发育方式发育，

最后形成成熟胚（有时甚至可能类似种子），然后再按种子萌发途径出苗形成完整植株。这种途径发育的幼胚，一般一个幼胚将来发育成一个植株。

?b、早熟萌发：幼胚接种后，不继续胚性生长，而是在培养基上迅速萌发成幼苗，这

种现象即称为早熟萌发。这种方式形成的幼苗往往细弱、畸形，难以成活。因此 在幼胚培养中应防止早熟萌发。

?c、产生愈伤组织：在幼胚培养中常能在追加生长调节剂时诱发愈伤组织产生、进而

分化形成胚状体或不定芽。

5. 比较胚培养、胚珠培养和子房培养的异同。 答：（1）胚培养分为成熟胚培养和幼胚培养两种。成熟胚为子叶期以后的胚其在简单

的培养基上即可萌发生长。对营养条件要求不严格。幼胚培养，培养技术和条件要求较高。其作用为克服远缘杂交不亲和性，打破种子休眠缩短育种周期提高种子萌发率。

（2）胚珠培养是在人工控制的条件下对胚珠进行离体培养使其生长发育形成幼苗的

技术。由于幼胚分离难度大而胚珠分离则相对容易故在幼胚培养时常采用胚珠培养。胚珠培养分为，受精胚珠培养它可防止杂种胚早期败育获得杂种植株与未受精胚珠培养它可作为试管受精的基础未受精胚珠培养能培养获得单倩体植株用于单借体育种。

（3）子房培养包括授粉子房和未授粉子房培养，授粉子房培养形成成熟果实和种

子，未授粉子房培养形成小的无籽果实。其作用为获得杂种植株，未授精子房培养为试 管受精提供技术基础，且未受精子房培养能获得单倍体植株用于单倍体育种。

二.练习题 一．判断题

1、在植物胚培养中幼胚培养较成熟胚易成功。（×）

2、完全成熟的胚乳，必须借助原胚萌发，使其活化（√）

3、植物离体授精过程中卵细胞和精细胞的分离均可采用酶解法（×） 4、未授粉胚珠的培养与花粉培养一样可获得单倍体植株（√）

5、利用未授粉的子房培养应选择胚囊发育到单核至四核时期的子房为材料（×） 6、在幼胚培养中，幼胚发育阶段越早，所要求培养基中的蔗糖浓度越低。（×） 二．选择题

1. 胚乳培养是否必须有原位胚的参加，主要与（C）有关

?A、培养基和培养条件 ?B、培养基和胚乳的年龄

?C、胚乳的生理状态和胚乳的年龄 D、胚乳的生理状态和培养条件 2. 未授粉胚珠以发育至（B）胚囊进行培养为最佳 ? A、四核胚囊B、八核胚囊

? C、成熟胚囊 D、B和C

第十章

一.思考题

1. 分类①②③中哪一种是最理想的离体保存材料？为什么？①愈伤组织、悬浮组织、原生质体 ②花粉和花粉胚 ③茎尖、腋芽原基、胚、幼龄植物*

答：第三类：茎尖、腋芽原基、胚、幼龄植物，因为其遗传稳定性好，易于再生，且

细胞体积小，液泡小，原生质浓稠、含水量较低，细胞质较浓，比含有大液泡的愈伤组织细胞更抗冻。 2如何选择解冻速度？*

答： 1、与材料的特性有关

2、与材料原来冷冻速度有关 一般来说：

冷冻速度超过-15℃/min，解冻时宜采用快速解冻，否则应采用慢速解冻；

液泡小和含水量少的细胞（如茎尖分生组织）可采用快速解冻法；

液泡大含水量高的细胞，脱水处理后的干冻材料以及木本植物的冬眠芽则宜用慢速解冻法。

3. 细胞冷冻保存要注意的关键问题是什么？

答：细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分，减少细胞内冰晶的形成，需要

重点考虑保护剂使用和冷冻方法两个重要因素。 4. 冷冻保护剂有几类？各有何特点？ 答：（1）渗透性冷冻保护剂如：甘油、二甲亚砜等。

特点：1）易与水分子结合，易穿透细胞膜进入细胞内部，从而降低细胞冰点，

提高细胞膜对水的通透性。

2） 冻存时，保护剂可促进细胞内水分渗出细胞外，从而减少胞内冰晶的

形成；

3）复苏时，促进细胞外水分进入细胞，缓解渗透性肿胀引起的损伤。

（2）非渗透性冷冻保护剂如：聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、聚乙二醇、葡聚糖等 特点：1）一般是些大分子物质，不能渗透到细胞内部，但能溶于水，可稀释

细胞外电解质的浓度，从而减少溶质损伤；

2）这些大分子物质可结合水分子，降低细胞外自由水的含量，减少胞

内冰晶的形成。

第十二章

一. 思考题

1. 动物细胞培养所用的培养基类型有几种？

答：（1）BME（2）MEM（3）DMEM（4）IMDM（5）RPMI-1640 （6）M199 2. 离体动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？

答：不能，动物细胞的全能性随分化程度提高而受到限制，分化潜能变弱，所以动物

细胞培养只能是细胞数目增多而不能发育成新的动物个体。 二. 练习题 1、一般来说，动物细胞体外培养具有一定的生存期，而且细胞分裂次数也是有限的。（√） 2、分化程度高的比分化低的容易培养;肿瘤组织比正常组织容易培养。（×）

3、利用成纤维细胞比上皮细胞贴壁过程快，大部分成纤维细胞能在短时间内完成附着过程，而上皮细胞在短时间内不能附着或附着不稳定，稍加振荡即浮起，以此差别来纯化细胞的方法称酶消化法。（×）

4、在倒置显微镜下可看到动物细胞培养液中有纵横交错的丝状、管状和树枝状菌丝，可判定是已被细菌污染了。（×）

5、中期阻断法是适于贴壁细胞的选择性同步化的方法（×）

6、培养液由桃红色变为黄色，是由于CO2积累过多，培养液发生酸化，需要及时调整pH，否则会对细胞发生不利影响，严重时细胞脱落发生死亡。（√）

第十三章

一. 思考题

1. 仙台病毒、PEG、电融合的原理分别是怎样的？

答：仙台病毒：仙台病毒囊膜上有许多具有凝血活性和唾液酸苷酶活性的刺突，它

们可与细胞膜上的糖蛋白起作用，使细胞相互凝集，再通过膜上蛋白质分子的重新分布，使膜是脂类分子重排，从而打开质膜，导致细胞融合。

PEG：PEG是最常用的诱融剂，它可以使细胞表面变得黏稠，细胞相互黏合，继而在黏合

的部位产生穿孔，最后发生融合。

电融合：将亲本细胞置于交变电场中，使他们彼此靠近，紧密接触，并在两个电

极间排列成串珠状，然后在高强度，短时程的直流脉冲作用下，相互连接的两个或多个细胞的质膜被击穿而导致细胞融合。

2. 哺乳动物免疫系统包括哪几种？

答：体液免疫（B淋巴细胞）和细胞免疫（T淋巴细胞） 3. 动物细胞融合与原生质体融合有何异同？

答：同：（1）融合的基本原理相同，都是利用质膜的流动性。 （2）融合后的新细胞都含有两个亲本的全套遗传物质。 （3）都可以用物理方法如：电击法和化学方法如：PEG促进融合促进融合。

异：（1）植物体细胞杂交要首先去掉细胞壁，而动物细胞不用。 （2）植物细胞没有用膜蛋白酶，而动物细胞要用膜蛋白酶。 （3）植物细胞有再生细胞壁过程，动物细胞没有。

（4）动物细胞诱导融合除物理和化学方法外还有生物方法。 （5）植物体细胞杂交最后形成个体，而动物细胞融合不能，只能形成细胞系。

答：因为骨髓瘤细胞具有能在体外长期快速生长的特性而B淋巴细胞具有分泌特异性

抗体的功能。

5. 为什么要选用同一品系的小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合?

答： 因为这样不仅能保证所得杂交瘤细胞的染色体的稳定，还能使其持续分泌特异

性抗体。而且这样的杂交融合率高，也便于日后的杂交瘤细胞能够在同系动物中生长，以便获得大量腹水制备单克隆抗体。

第十四章

一. 思考题

1. 胚胎分割动物与试管动物有何的异同？ 答：异：（1）胚胎分割的操作对象是哺乳动物附植前的胚胎，受精作用已经在体内完

成，而试管动物的直接对象是精子和卵子，受精作用在体外完成。

（2）胚胎分割要对胚胎进行若干份的分割，试管动物不用。 （3）胚胎分割需要用到切割器。

同：（1）都涉及对胚胎的操作，培养和保存。 （2）都可以产生完整的个体。 （3）胚胎都是在受体中成长的。

2. 比较胚胎分割动物与试管动物、核移植动物有何异同？ 三. 练习题

一． 选择题

1、①试管婴儿②试管苗③克隆羊 这三者可以说是现代生物工程技术的杰出成就，它们

的诞生所依据的生物学原理最接近的是（B）

A、①② B、②③ C、①③ D、①②③ 2、克隆哺乳动物的方法是（A）

A. 细胞核移植 B. 人工受精 C. 体外受精 D. 转基因技术 3、对家畜进行卵母细胞采集时，可先用（A）处理

A. 促性腺激素 B. 促肾上腺激素 C. 肝素 D. 性激素 4、在体外受精前，要对精子进行（B）

A. 纯化处理 B. 获能处理 C. 电刺激 D. 超声波处理 5、精子和卵子在体外受精后，应将受精卵移入（C）

A. 受体动物体内 B. 培养箱 C. 发育培养液 D. 冷库冷藏 6、下列属于哺乳动物体外受精操作步骤的是（A）

①卵母细胞的采集 ②精子的获取 ③精子的变形 ④受精

A．①②④ B．①②③ C．①③④ D．②③④ 7、表现型不同的母牛生育出基因型完全相同的小牛。产生这一结果最可能的原因是（C） A.试管动物培养 B.胚胎移植 C.胚胎分割移植 D.受精卵移植

8、利用下列细胞工程技术培养出的新个体中，只具有一个亲本遗传性状的是（D） ①细胞和组织培养 ②细胞融合 ③动物胚胎移植 ④克隆羊技术（多利） A.①② B．②③ C．① D．①④ 9、在进行囊胚切割时，要注意将（C）等分。

A. 透明带 B. 滋养层 C. 内细胞团 D. 囊胚腔 10、以下哪一种胚胎分割的移植效率最高（A）

A. 二分胚 B. 四分胚 C. 八分胚 D. 十六分胚

11．在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为原因最可能是（C）

A．卵细胞大，便于操作 B．卵细胞含有的营养物质多 C．卵细胞的细胞质可使体细胞核全能性得到表达 D．重组细胞才具有全能性 二．简答题

1. 在克隆技术出现之前，育种工作者已经开始采用胚胎分割移植方法来尽快繁育更多的优质牛。这种育种技术的主要步骤是：将经过人工受精得到的受精卵在试管内培养到8个细胞的胚胎时，进行胚胎分割，均分为4份，再分别移植到多头母牛的子宫内发育、分娩，就能得到多头所需要的小牛。 （3）胚胎分割移植要在受精卵培养到8—16个细胞的卵裂期时进行，其主要原因是： 此时还未出现细胞分化 。 （4）通过胚胎分割移植培育出的这些小牛，其性别表现为B。 A．雌雄的可能性各占50% B．全为雌性或全为雄性 C．全为雌性 D．全为雄性 (5)克隆牛与试管牛的生殖方式相同吗?为什么?

（5）答：不同，试管牛属于有性繁殖，克隆牛属于无性繁殖。

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