前处理

前处理： 1. 称取2.00 g均匀试样，置于50 mL离心管中，加入乙酸乙酯15 mL，涡旋1 min，超声30 min，

以8 000 r/min离心5 min。上清液倒入50 mL比色管中，残渣再加入乙酸乙酯15 mL，重复上述操作一次，合并提取液于50 mL比色管中。在50 mL比色管中，加入正己烷5mL，涡旋1 min，静置分层。弃去上层正己烷层，将下层清液倒入100 mL鸡心瓶中，置于旋转蒸发仪上，在45 ℃水浴中真空浓缩至干，准确加入甲醇水溶液2.0 mL溶解残渣。过0.2 μm微孔滤膜，滤液经液相色谱—串联质谱仪测定。按上述操作步骤制备样品空白提取液。（2012，虞成华）+测食品 2. 用脱脂棉蘸取蒸馏水将塑料样品擦拭，晾干，用剪刀剪至1 cm×1 cm大小，备用。准

确称取1.0 g塑料样品于50 mL离心管中，加入15 mL乙腈，在室温条件下经超声清洗器超声提取20 min，并在4000 r min-1 的条件下离心 5 min，上清提取液转移至150 mL旋转蒸发瓶中，重复提取两次并将提取液合并，在35℃水浴下旋转蒸发至近干，用乙腈：0.1%甲酸水(70:30,v/v)定容至2 mL，振荡均匀后过0.22 μm滤膜，待UPLC分析。（李波）

3. 溶剂萃取和固相萃取（SPE）：从固体食品中提取双酚类污染物最常用的溶剂是乙腈，其次是甲醇和丙酮，有时还可以选择乙醇；对于液体食品，则一般使用乙酸乙酯、叔丁基甲基醚或者二氯甲烷。为了充分提取目标物，反复提取非常必要；搅拌或者超声有利于目标物在两相间分配平衡；在提取前后添加无水硫酸钠可以去除有机层中微量的水由于液-液萃取有限的选择性，。。。。。。目前，处理含双酚物样品主要使用以 C18或者二乙烯基苯-N-乙烯基吡咯烷酮共聚物为吸附剂的 SPE 小柱：

SPE常用的吸附剂有正相和反相吸附剂。正相主要包括硅胶、氧化铝、弗洛

里硅土及有机基团修饰的硅胶。其中硅胶、氧化铝、等吸附剂经常用在包装检测 中，主要富集一些双酚类物质反相吸附剂主要包括非极性的C18、CS、CZ及苯基 类吸附剂，它主要是用来吸附样品中非极性到中等极性的组分。戴树桂等[39]使 用C18固相萃取柱研究了环境水样中PAEs的固相萃取预富集方法，除DEHP外， DMP、DEP和DBP的加标回收率均在%.5%一120%范围内，可以取代液一液萃取。 在包装检测领域中经常使用多壁碳纳米管(MWCNTs)作为固相萃取的填料，

也就是吸附剂。它具有表面积大，吸附能力强的优点，是分析包装中双酚类物质 的最佳选择。

4. 提取: 称取样品2. 0 g 于50 mL 离心管内，向其中加入15 mL 叔丁基甲醚，超声振

荡提取10 min。在12 000 r /ming 速率下离心3 min，转移叔丁基甲醚层至浓缩瓶中，剩余残渣依次用10 mL 叔丁基甲醚、10 mL 甲醇、5 mL 甲醇各提取一次，合并提取液，于45 ℃下减压浓缩至干。加入2 mL 甲醇-水-甲酸溶液( 80 ∶ 20 ∶ 0. 1，v /v /v) 溶解后，再加入10mL 水，混匀。加入5 mL 正己烷，振荡10 min 后，于12 000 r /min 下离心3 min，弃去正己烷层，下层待净化。

净化: 依次用5 mL 甲醇和5 mL 水活化HLB 固相萃取柱，加入提取液，用5 mL 水淋洗萃取柱。待淋洗液全部流出后，弃去全部流出液，减压抽干3min。用5 mL 甲醇洗脱，收集全部洗脱液。将洗脱液在40 ℃下用氮气吹干，再以5. 0 mL 甲醇-水-甲酸溶液( 80∶ 20∶ 0. 1，v /v /v) 溶解残渣，混匀，过微孔滤膜，滤液供LC-MS /MS 分析。（2012，赵晓亚）+侧食品

5. 提取 称取 2.09样品于50mL离心管中，加入15mL叔丁基甲醚，旋涡振荡1min，超声提取

20min后，以 7500r/min离心 5min，分离上清液。下层残渣再用 5mL叔丁基甲醚采用上述步骤重复提取一次，合并两次提取液。将提取液置于多功能微量化样品处理仪上40℃吹至近干，用 5mL甲醇一水(50:50，v/v)溶解，脂肪含量较高食品需再加 2mL正己烷，混匀弃去正己烷层，待净化。

净化 将上述提取液加载到活化后的多壁碳纳米管固相萃取小柱上，控制流速为1mL/min，弃去流出液，再用 5mL水淋洗，弃去淋洗液。最后用 5mL甲醇一乙酸乙酷 (60:40，v/v)洗脱，收集合并全部洗脱液，于多功能微量化样品处理仪上40℃吹至近干，用甲醇一水(50:50，v/v)定容至lmL，过0.45um滤膜，供HPLC一MS/MS分析。（2011，吴新华）

6. 根据2.2.1建立的样品前处理方法（微波辅助萃取的体积消耗量是118mL，而其他方

法则需要消耗35mL。。。Z00w的微波辐照功率和20min的辐照时间、105℃时的微波萃取。。。PS DVB SPE小柱。。。20%甲醇水溶液作为淋洗液，淋洗体积为4mL。。。乙腈作为洗脱液。。。选择PS一DVB固相萃取柱，甲醇和水为活化溶剂，乙睛作为洗脱溶剂。。。固相柱用4mL甲醇、 4mL纯水活化，用 4mLZO%甲醇水溶液淋洗，用smL乙睛洗脱目标物质。），打开食品罐，取出内容物，用热水和洗洁精洗净，晾干。倒入1/2罐体积乙睛，用锡纸密封，静置24h，静止期间100℃水浴浸提lho然后将提取液转移至烧瓶中，40℃旋转蒸发浓缩至干，加入 5mL乙腊，涡旋混匀 1mjn，将液体转移至另一烧瓶中，再加入 5mL乙睛，重复操作3次，合并液体。最后，40℃旋转蒸发浓缩至干，用 3mL水/乙睛 (50/50，v八)混合液涡旋溶解，滤液经固相萃取柱净化。固相柱用 4mL甲醇、 4mL纯水活化，提取液以 2~3mL/min的速度经过姚幽in一PS一DVB固相柱，用 4mL20%甲醇水溶液淋洗，减压抽干10而n，用 5mL甲醇洗脱。洗脱液用氮气吹干，用 1mL初始流动相定容，漩涡 1min，0.45脚滤膜过滤以供进样测定。（迁移）

7. 称取3.0g 均匀罐头样品于50ml 离心管中，加入10ml叔丁基甲醚溶液，漩涡混匀30s

后，超声波提取30min，以8000r/min 转速离心10min，取上清液。下层残渣再加入5.0ml 叔丁基甲醚溶液重复提取一次，合并两次上清液，取5.0ml 溶液，于40℃水浴中氮气吹干，用2ml的甲醇- 水- 甲酸溶液(体积比为80:20:0.1)充分溶解后，再加入3 m l 水，混匀，准备过固相萃取柱。HLB 固相萃取柱预先用2ml 甲醇、1ml 水、1ml 乙酸乙酯溶液活化，流速为1ml/min。上样，流速1ml/min。接下来用2ml(体积比为20:80)的甲醇- 水溶液淋洗，流速1ml/min。再用2ml 甲醇，1ml 甲醇- 乙酸乙酯(体积比为50:50)和1ml 乙酸乙酯洗脱，流速1ml/min。收集合并这4ml 洗脱液，于40℃水浴中氮气吹干，用1ml 的甲醇-水- 甲酸溶液(体积比为80:20:0.1)定容，通过0.2μm 微孔滤膜，收集样品供HPLC-MS/MS 测定。（2009，罗生亮）

8. 打开食品罐,取出内容物,用热水和洗洁精洗净,晾干。倒入1 /2罐的乙腈,用锡纸密封,

以100 ℃

水浴浸提1 h,静置23 h。然后将提取液转移至烧瓶中, 40 ℃旋转蒸发浓缩至干,加入5 mL乙腈,涡旋 混匀1 min,将液体转移至另一烧瓶中,再加入5 mL乙腈,重复操作3次,合并液体。最后, 40 ℃旋转蒸

发浓缩至干,用10 mL V (乙腈) ∶V (水) = 50∶50混合液涡旋溶解定容,取1 mL过0. 45μm微孔滤膜后,转移至进样瓶中待测定。（2009，缪佳铮）

9. 食品接触材料试样按0． 6 dm2 加100 mL 食品模拟物浸泡液计，加入适量30 g /L 乙

酸溶液，在100℃下浸泡2 h; 也可根据食品接触材料可能与食品接触的具体情况，参照欧盟EN 13130-1∶2004 选择迁移实验条件。取1 mL 浸泡液经0． 22 \滤膜过滤后，供LC-MS /MS 测定。（13，李全忠。C类）

10. 样品前处理采用食品模拟物进行迁移实验。从6 种化合物的logKow得知，PIs 在水中溶

解度较低，并且根据食品接触材料预包装食品类型的不同，选取65% 乙醇和正己烷进行迁移实验。实验之前，单层或复合塑料样品先用清水将表面清洗干净，晾干，然后裁取120 cm2 的试样剪成1 cm2 的碎片，模拟液按2 mL /cm2 的添加量进行添加。对于欲包装低温冷藏食品的包装，在5 ℃下进行迁移实验240 h; 对于欲包装常温贮存食品的包装，则在40 ℃下进行迁移实验240 h。 65%乙醇浸泡液利用旋转蒸发仪蒸发至近干，加入少量正己烷-乙酸乙酯( 30∶ 70，V /V) 溶解，然后在5 L /min 的氮气流速下除去绝大部分混合溶剂，再加入5 mL 甲醇溶解。移取适量甲醇溶液，经0． 2 !m 滤膜过滤后，滤液直接进样分析。将正己烷浸泡液旋转蒸发至近干后，用5 mL 甲醇溶解残渣，取适量甲醇溶液，经0． 2 !m 滤膜过滤后，滤液直接进样分析。

另外的一些文献[19]则不测定迁移量，而是直接在罐头食品包装内或者将样品剪碎后，加入乙腈或者水等溶剂作为提取液加热浸提后，直接进样或者用旋转蒸发仪、氮吹仪等装置浓缩，定容后过滤进样。

用脱脂棉蘸取蒸馏水将塑料样品擦拭，晾干，用剪刀剪至1 cm×1 cm大小，备用。准确称取1.0 g塑料样品于50 mL离心管中，加入15 mL叔丁基甲醚，在室温条件下经超声清洗器超声提取30 min，并在8000 r min的条件下离心 5 min，上清提取液转移至150 mL旋转蒸发瓶中，，在40℃水浴下旋转蒸发至近干，用甲醇：0.1%甲酸水(80:20,v/v)定容至2 mL，振荡均匀后过0.22 μm滤膜，待UPLC-MS/MS分析。（针对塑料包装）

方案1，双酚类：打开未装过食品的食品罐,用超纯水洗净,晾干。倒入1 /2罐的乙腈,用锡纸密封,以100 ℃水浴浸提1 h,静置23 h。然后将提取液转移至烧瓶中, 40 ℃旋转蒸发浓缩至干,加入5 mL乙腈,涡旋混匀1 min,将液体转移至另一烧瓶中,再加入5 mL乙腈,重复操作3次,合并液体。最后, 40 ℃旋转蒸发浓缩至干,用甲醇：0.1%甲酸水(80:20,v/v)定容至2 mL，振荡均匀后过0.22 μm滤膜，待UPLC-MS/MS分析。（针对金属罐头包装内涂层，该法可能不妥，是否适合测总量？）

方案2，双酚类：准确称取2.0 g塑料样品于50 mL离心管中，加入15 mL叔丁基甲醚，在室温条件下经超声清洗器超声提取30 min（用微波辅助萃取可能会更好？），并在8000 r min的条件下离心 5 min，上清提取液转移至150 mL旋转蒸发瓶中，，在40℃水浴下旋转蒸发至近干，用甲醇：0.1%甲酸水(80:20,v/v)定容至2 mL，振荡均匀后过0.22 μm滤膜，待UPLC-MS/MS分析。（金属罐如何剪碎，这种处理是否得经过固相萃取）

方案3，双酚类：提取: 准确称取2.0 g塑料样品于50 mL离心管中，加入15 mL叔丁基甲醚，在室温条件下经超声清洗器超声提取30 min（用微波消解可能会更好？），并在8000 r

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min的条件下离心 5 min，上清提取液转移至150 mL旋转蒸发瓶中，，在40℃水浴下旋转蒸发至近干，用甲醇：0.1%甲酸水(80:20,v/v)定容至2 mL，再加入10mL 水，混匀。

净化: 依次用5 mL 甲醇和5 mL 水活化HLB 固相萃取柱，加入提取

液，用5 mL 水淋洗萃取柱。待淋洗液全部流出后，弃去全部流出液，减压抽干3min。用5 mL 甲醇洗脱，收集全部洗脱液。将洗脱液在40 ℃下用氮气吹干，再以5. 0 mL 甲醇-水-甲酸溶液( 80∶ 20∶ 0. 1，v /v /v) 溶解残渣，混匀，过微孔滤膜，滤液供LC-MS /MS 分析。（已有文献多是从金属罐中提取内容物进行检测，故需净化；而本实验是直接检测金属罐内涂层中双酚类含量，有所不同。）

《林老师建议：

这样做实验写文章的套路是对的

具体到这个实验本身 还是先提取为好。 直接检测 实际上也是要经过提取的 用提取液在罐内浸泡即可 不必剪碎

另外 微波消解用于金属检测 有机物质用超声萃取 微波辅助萃取都可 只能是用比较强的提取液

比较极端的条件（相对迁移而言） 尽量提取彻底

这方面的文献应该有一些的

不行就自己尝试 按提取率优化条件》

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本文来源：https://www.bwwdw.com/article/1xrv.html