卡介菌多糖核酸对复发性生殖器疱疹患者外周血T细胞IL-12表达的影响

生殖器疱疹治疗

主国压丛廛丛遗壅查至墅生璺旦笙丝鲞筮垒塑

２９１

论著

卡介菌多糖核酸对复发性生殖器疱疹

患者外周血Ｔ细胞ＩＬ一１２表达的影响

陈兴平

邓云华

陈映玲

［摘要］

目的：

探讨卡介菌多糖核酸对复发性生殖器疱疹（ＲＧＨ）患者外周血Ｔ细胞Ⅲ一１２表达的影

响。方法：４５例ＲＧＨ患者随机分为卡介菌多糖核酸组（ＢＣＧ—ＰＳＮ）和病例对照组，并设立正常对照组。采用流式细胞仪检测两组患者治疗前、后外周血ＣＤ４＋Ｔ、ＣＤ８＋Ｔ细胞Ⅲ一１２阳性细胞百分率。结果：

（１）与正常对照组相比，治疗前ＲＧＨ患者外周血ＩＬ—１２阳性ＣＩＭ＋Ｔ细胞的百分率及ＩＬ一１２阳性

ＣＤ８＋Ｔ细胞的百分率均显著性降低（Ｐ＜０．０５）。（２）治疗后ＢＣＧ—ＰＳＮ组外周血ＩＬ—１２阳性ＣＤ４＋Ｔ细胞百分率及ＩＬ—１２阳性ＣＤ８＋Ｔ细胞百分率均显著升高（Ｐ＜０．０５）；而病例对照组治疗前后差异无显著性；比较ＢＣＧ—ＰＳＮ组与病例对照组治疗前、后外周血ＩＬ一１２阳性ＣＩＭ＋Ｔ细胞百分率差值及ＩＬ一１２阳性ＣＤ８＋Ｔ细胞百分率，差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。（３）对ＢＣＧ—ＰＳＮ组及病例对照组复发率进行比较，差异有显著性（Ｐ＜０．０５）；对治疗后两组复发患者的复发问隔时间及皮损痊愈时间进行比较，均有显著差异（Ｐ＜０．０５）。结论：卡介菌多糖核酸能降低ＲＧＨ的复发频率，减轻复发病情，其作用机制可能与卡介菌多糖核酸能有效提高ＲＧＨ患者体内ＣＤ４＋Ｔ、ＣＤ８＋Ｔ细胞ＩＬ一１２的表达水平有关。

［关键词］卡介菌多糖核酸；ＩＬ一１２；复发性生殖器疱疹

Ｅｆｆｅｃｔｏｆ

ＢＣＧ—ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄ

ｏｎ

ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｉｎｔｅｒｌｅｕｌｄｎ一１２

ｉｎ脚ｅｒａｌ

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ｌｙｍ

ｐｈｏｃｙｔｅｓｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｍｒｅｃｕｒｒｅｎｔｇｅｎｉｔａｌｈｅｒｐｅｓ

ＣｈｅｎＸｉｎｇｐｉｎｇ，ＤｅｎｇＹｕｎｈｕａ，ＣｈｅｎＹｉｎｇｌｉｎｇ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆ珧玎眦幻锄，Ｔｏ，研ｉＨｏｓｐｉｔａｌ，蜊Ｍｅｄｉｃａｌ

Ｃｏｌ—

Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ

ｏｆＳｃｉｅｎｃｅ

ａｎｄ

Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｗｕｈａｎ，４３００３０

［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔＩｌｅｅｆｆｅｃｔｏｆＢＣＧ—ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｎｕｃｌｅｉｃ

ａｃｉｄ（ＢＣＧ—ＰＳＮ）ｏｎ

ｔｈｅ

ｅｘ—

ｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＩＬ一１２ｉｎｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄＴ—ｃｅｌｌｓｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｒｅｃｕｒｒｅｎｔ

ｇｅｎｉｔａｌ

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ｆｉｖｅｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈＲＧＨ

ｗｅｒｅ

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ｇｒｏｕｐ（ｎ＝３０）ａｎｄｅａｓｅ

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ＣＩＭ＋

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ＩＬ一１２ＣＤ８＋Ｔｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ

ｗｅｒ｛ｅ

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ｆｌｏｗｅｙｔｏｍｅｔｒｙｂｅｆｏｒｅａｎｄａｆｔｅｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｉｎｔｈｅｐａ

ｔｉｅｎｔｓ

ｗｉｔｈＲＧＨａｎｄｎｏｒｍａｌｓｕｂｊｅｃｔｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：（１）Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆＩＬ一１２

ＣＩＭ＋ＴｌｙｍｐｈｏｅｙｔｅｓａｎｄｏｆＩＬ一１２ＣＤ８＋Ｔｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｄｂｅｆｏｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ．（２）Ａｆｔｅｒ

ｔｒｅａｔ—

ｍｅｎｔ．ｔｈｅｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆ１Ｌ一１２ＣＤ４＋ＴｌｙｍｐｈｏｅｙｔｅｓａｎｄｏｆＩＬ一１２ＣＤ８＋ＴｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｉｎＢＣＧ—ＰＳＮｇｒｏｕｐｓｉｇ－

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ｏｆＲＧＨ，

ｉｎｗｈｉｃｈＢＣＧ—ＰＳＮｃａｎ

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ｔｉｅｎｔｓ

ｗｉｔ｝ｌＲＧＨ．

［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ＢＣＧ—ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｎｕｃｌｅｉｃ

ａｃｉｄ；ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ—１２；ｒｅｃｕｒｒｅｎｔｇｅｎｉｔａｌｈｅｒｐｅｓ

卡介菌多糖核酸（ＢＣＧ—ＰｓＮ）是我国自行研制生（商品名：斯奇康注射液，湖南九芝堂斯奇生物制药有产的一种免疫调节剂，已广泛应用于病毒感染性疾限公司）治疗复发性生殖器疱疹（ＲＧＨ）已取得肯定疗病、自身免疫性疾病等的治疗，临床观察表明其有较效，但其具体机制至今仍不十分清楚。为探讨其可能强的免疫调节作用１。目前，临床观察采用ＢＣＧ—ＰＳＮ

的作用机制，本文采用流式细胞仪检测了ＢＣＧ—ＰＳＮ治疗前、后ＲＧＨ患者外周血ＣＩＭ＋Ｔ、ＣＤ８＋Ｔ细胞中细作者单位：华中科技大学同济医学院附属同济医院皮肤科，武汉

胞因子ＩＬ一１２表达水平。

万　

方数据４３００３０

１对象与方法

ｔｅｇｅ，Ｈｕａｚｈｏｎｇ

生殖器疱疹治疗

２９２

１．１研究对象１．１．１病例组

以２００１年１０月～２００３年６月间在

我科门诊就诊的ＲＧＨ患者共４５例为研究对象，ＲＧＨ诊断均符合２０００年卫生部疾病控制司和全国性病麻风病控制中心联合颁布的ＧＨ诊断标准。半年内未使用任何免疫抑制剂或免疫增强剂，同时除外以下情况：妊娠及哺乳期妇女、严重心肝肾疾病或全身衰竭、结核、肿瘤、器官移植、自身免疫性疾病等。其中男３０例，女１５例；年龄２ｌ～４８岁，平均２９．２岁；病情３个月至７年，平均１．１年。

１．１．２分组与用药将４５例ＲＧＨ患者按２：１随机对照试验方法分为ＢＣＧ—ＰＳＮ组与病例对照组。ＢＣＧ—ＰＳＮ组：３０例，其中男２０例，女１０例，年龄２１～４８岁，平均２９．６岁。均给予万乃洛韦０．３，ｂｉｄ口服，连

用６ｄ；喷昔洛韦软膏外搽，每Ｅｔ４次，直至皮损消退；

同时臀部肌注ＢＣＧ—ＰＳＮ

１．０

ｍｇ，隔日１次，３６ｄ为１

疗程。病例对照组：１５例，其中男ｌｏ例，女５例；年龄２３—３８岁，平均２８．４岁。均只给予万乃洛韦口服，

０．３，ｂｉｄ，连用６ｄ；喷昔洛韦软膏外搽，每日４次，直至

皮损消退。正常对照组：选择年龄、性别相仿的健康志愿者１５例，其中男１０例，女５例；年龄２１～４１岁，

平均２７．９岁。

各组间年龄、性别经ｔ检验均Ｐ＞０．０５，差异无显著性；ＢＣＧ—ＰＳＮ组与病例对照组间患者病程、复发频率经ｔ检验均Ｐ＞０．０５，差异无显著性；患者对该病的知晓程度与医生对病人的咨询教育程度亦具均衡性；表明各组间具有可比性。１．２流式细胞计数

１．２．１试剂异硫氰酸胍（ＦⅡ℃）标记的抗ＣＩＭ单抗（鼠抗人ｉｇＣｌ）、Ｆ１ＴＣ标记的抗ＣＤ８单抗（鼠抗人Ｉ￥１）购自法国基因公司；藻红素（ＰＥ）标记的抗ＩＬ一１２单抗（鼠抗人Ｉ蜘）、Ｃｙｔｏｄｅｔｅｃｔ删试剂盒均购自荷兰ＩｍｍｕｎｏＱｕａｌｉｔｙＰｒｏｄｕｃｔｓ公司；淋巴细胞分离液购自上海恒信化学试剂有限公司。

１．２．２方法无菌静脉采血５ｍＬ，肝素抗凝，常规分离ＰＢＭＣ并配制细胞悬液，细胞浓度为１

Ｘ

１０６／ｍＬ。

加１ｍＬ细胞悬液、５０ｎｇ／ｍＩ．巴豆酯、１ｔｍａｏｌ／Ｌ艾罗霉

素、２ｔｍａｏｌ／Ｌ莫能星于培养板一孔，置３７。Ｃ、５％ＣＯｚ环境中孵育５ｈ后４％冷多聚甲醛液５００以固定细胞

１０

ｍｉｎ，ＨＢＳＳ洗涤并３００皿ＨＢＳＳ重悬细胞后分３管：

前２管分别加５０以ＣＤ４＋一Ｆ１ＴＣ或ＣＤ８＋一ＦＩＴＣ单抗置室温暗处孵育２０ｍｉｎ，细胞破膜液洗涤后分别加５庙抗ＩＬ一１２ＰＥ单抗，第３管为空白对照，４。Ｃ避光孵育２０ｒｎｉｎ，细胞破膜液洗涤后重悬于ＨＢＳＳ，混匀上机，经ＦＡＣＳｏｒｔ流式细胞仪（美国ＢｅｅｔｏｎＤｉｃｋｉｎｓｏｎ公司）依细胞表面抗原标记而分选出ＣＤ４＋Ｔ、ＣＤ８＋Ｔ细胞亚群，计数ｌ

万　

方数据Ｘ

１０４个细胞，用ＣｅｌｌＱｕｅｓｔ软件分析数

ｇ坠堕』堡匹墨堕翌望堡：垒卫！至Ｑ堕：ｙ坐：丝：№：堡

据，打印出散点图，以荧光抗体染色阳性细胞的百分率记录结果。

１．３临床疗效的观察病例组均连续跟踪观察３个月，３个月内无复发者为治疗有效，否则观察复发情况。复发患者均详细记录复发间隔时间、复发皮损面积并追踪复发皮损痊愈时间。

１．４统计学处理采用ＳＡＳ８．１软件进行两样本均数方差齐性ｔ检验和四格表资料的ｘ２检验。

２结果

２．１治疗前ＲＧＨ患者与正常对照组外周血ＩＬ一１２阳性Ｔ细胞百分率比较与正常对照组相比，治疗前ＲＧＨ患者外周血ＩＬ一１２阳性ＣＩＭ＋Ｔ细胞的百分率与ＩＬ一１２阳性ＣＤ８＋Ｔ细胞的百分率均呈显著性降低（Ｐ＜０．０５，见表１）。

表１复发性生殖器疱疹患者外周血ＩＬ—１２阳性ＣＤ４＋Ｔ、ＣＤ８＋Ｔ细胞的百分率（％）

ＩＩＪ—１２一ＣＤ４＋Ｔ

ＩＬ一１２一ＣＤ８＋Ｔ

组别

例数

正常对照组

１５

３．３２±１．８６０．４２±０．１６

病例组４５

１．７６±０．４６

３．２０＋０．２６±０．１５

３．２６“

注：ｔ值为与正常对照组比较＊Ｐ＜０．０５

２．２

ＢＣＧ—ＰＳＮ组与病例对照组治疗前后外周血ＩＬ

一１２阳性Ｔ细胞百分率比较与治疗前相比，ＢＣＧ—ＰＳＮ组患者外周血ＩＬ一１２阳性ＣＤ４＋Ｔ细胞百分率与ＩＬ一１２阳性ＣＤ８＋Ｔ细胞百分率于治疗后均显著升高（Ｐ＜０．０１）。而病例对照组ＩＬ一１２阳性ＣＩＭ＋Ｔ细胞百分率与ＩＬ一１２阳性ＣＤ８＋Ｔ细胞百分率治疗前后差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。对ＢＣＧ—ＰＳＮ组与病例对照组治疗前、后外周血ＩＬ一１２阳性ＣＤ４＋Ｔ、ＣＤ８＋Ｔ细胞百分率差值分别进行比较，差异均有显著性（Ｐ＜

０．０１，见表２）。

表２

ＢＣＧ—ＰＳＮ组和病例对照组治疗前后ＣＩＭ＋Ｔ、ＣＤ８＋Ｔ细胞ｍ一１２的表达水平（牙±ｓ，％）

ＩＬ—１２一ＣＤ４＋Ｔ

ＩＬ一１２一ＣＤ８＋Ｔ

组别ＢＣＧ—ＰＳＮ病例对照ＢＣＧ—ＰＳＮ病例对照

组（３Ｑ２

组ｆ１５２组【３Ｑ２组（１５）治≯ｉ：前１．７５±０．４９

１．７８±０．４２

０．２６±０．１５

０．２７±０．１６

治疗后

３．０６±１．６０。２．Ｏｌ±０．２５

０．３８±０．１２＋０．３３±０．１３治疗前后差１．４０±１．２７４

０．３６±０．２２

０．１１±Ｏ．０８１“０．０５９±０．０３９

注：治疗前、后比较，＊Ｐ＜０．０１；与病例对照组治疗前后比较，＃Ｐ＜０．Ｏｌ。

２．３

ＢＣＧ—ＰＳＮ组与病例对照组的临床疗效比较。

２．３．１

ＢＣＧ—ＰＳＮ组有１９例复发，复发率为

６３．３３％；病例对照组有１４例复发，复发率为９３．３３％。对它们的复发率进行７２检验，结果两组间差异有显著性（７２＝４．６０２，Ｐ＜０．０５），表明ＢＣＧ—ＰＳＮ组的复发率明显低于病例对照组，即临床有效率亦明显高于

生殖器疱疹治疗

主国压丛廛丛瘟壅直至堂生垒旦箜丝鲞箜堡塑

病例对照组。

２．３．２对治疗后两组复发患者的复发间隔时间、复发皮损面积及皮损痊愈时间进行比较可见：ＢＣＧ—

ＰＳＮ组复发间隔时间明显较病例对照组延长（ｔ＝

５．９３，Ｐ＜０．０１）；ＢＣＧ—ＰＳＮ组复发皮损面积显著小于病例对照组（ｔ＝２．１７，Ｐ＜０．０５）；ＢＣＧ—ＰＳＮ组复发皮损痊愈时间明显比病例对照组缩短（ｔ＝５．０４，Ｐ＜０．０ｌ，见表３）。

表３

ＢＣＧ—ＰＳＮ组和病例对照组治疗后皮损

面积、复发间隔时间、痊愈时间比较（膏±ｓ）

复发间隔时间复发皮损面积皮损痊愈时间

ＢＣＧ—ＰＳＮ组５３．４１±１１．４２。ｒ０．８９±０．３７‘

４．９１±１．４４☆病例对照组

３６．６９±８．７３

１．１８±Ｏ．５５

７．２４±１．７７

注：与病例对照组相比，＊Ｐ＜０．０５，☆Ｐ＜０．００１

３讨论

ＲＧＨ是由单纯疱疹病毒感染所致的一种反复发作的慢性感染性疾病，其病原体常潜伏于感觉神经节而易于再激活。有研究证实ＲＧＨ患者的反复复发与其外周血ＩＩ类细胞因子优势表达有关２”。由于ＩＬ一１２是一个多功能的免疫调节因子，在调节Ｉ类细胞因子产生与维持Ｔｈｌ／Ｔｃｌ应答优势过程中具有重要作

用４。ＩＬ一１２可促使Ｔｈ０／Ｔｃ０细胞分化为Ｔｈｌ／Ｔｃｌ细

胞，促进Ｔｈｌ／Ｔｃｌ细胞的增殖和分化，诱导Ｔｈｌ／Ｔｃｌ细胞产生大量的ＩＦＮ一７，而ＩＦＮ一７反过来又能促进ＩＬ

一１２大量产生５。ＩＬ一１２在维系Ｔｈｌ／Ｔｈ２与Ｔｅｌ／Ｔ０２的平衡中具有重要作用。几一１２的减少将导致Ｔｈｌ／Ｔｈ２与Ｔｃｌ／Ｔｃ２的失衡６。本研究检测了ＲＧＨ患者外周血ＣＤ４＋Ｔ、ＣＤ８＋Ｔ细胞中ＩＬ一１２阳性细胞水平，发现二者均低下。提示ＩＬ一１２的减少可能是ＲＧＨ患者外周血Ｔｈｌ／Ｔｈ２与Ｔｃｌ／Ｔｃ２失衡的重要原因之一，也可能是ＲＧＨ反复发作的重要因素之一。因此，有效改善ＩＬ一１２水平低下的药物可能是治疗ＲＧＨ并预防

其复发的重要手段。

卡介菌多糖核酸注射液是从卡介苗中提取的核

酸、多糖等免疫活性混合物，可促进Ｔ淋巴细胞的增

殖与活化７，刺激单个核细胞ＩＦＮ一７等Ｉ类细胞因子的合成与分泌８’９。本实验检测了ＢＣＧ—ＰＳＮ治疗前、

后ＲＧＨ患者外周血ＩＬ一１２阳性ＣＤ４＋Ｔ、ＣＤ８＋Ｔ细胞百分率，结果显示：治疗后，ＢＣＧ—ＰＳＮ组ＩＬ一１２阳性

万　

方数据２９３

ＣＩＭ＋Ｔ、ＣＤ８＋Ｔ细胞百分率升高显著；而病例对照组

前后变化差异无显著性；对两组治疗前后ＩＬ—１２阳性ＣＩＭ＋Ｔ、ＣＤ８＋Ｔ细胞百分率比较有显著性差异。提示ＢＣＧ—ＰＳＮ能有效提高患者Ｔ细胞ＩＬ一１２的表达。临床观察发现：ＢＣＧ—ＰＳＮ组复发率低于病例对照组，复发间隔时间较病例对照组长，复发皮损面积

小于病例对照组，皮损痊愈时间比病例对照组短，差异均具有显著性。说明ＢＣＧ—ＰＳＮ不仅能降低ＲＧＨ

复发率，而且减轻ＲＧＨ的复发病情。因此，认为：卡

介菌多糖核酸能显著提高ＲＧＨ患者体内ＣＤ４＋Ｔ和

ＣＤ８＋Ｔ细胞ＩＬ一１２的表达水平，这可能是其降低

ＲＧＨ复发频率，减轻复发病情的主要机制之一。

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（收稿：２００５—０７—１１修回：２００５—０９—２６）

本文来源：https://www.bwwdw.com/article/1rrj.html