2011动物组胚实验指导

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1 实验课的目的与意义

《动物组织胚胎学》属于一门微观形态学学科,实验课是理论课的继续和深化,在教学中处于重要地位。通过实验课的学习,要达到以下目的:

(1)验证课堂理论知识,加深对基本理论的理解和记忆; (2)掌握显微镜的正确使用方法;

(3)能利用科学的逻辑思维方法,对所观察的切片进行分析、综合,提高空间想象力以及分析问题、解决问题的能力;

(4)通过绘图训练,掌握组织学绘图要领。 2 实验课的内容与要求

2.1 实验课前必须认真复习理论课内容,并预习《实验指导》,明确本次实验课的目的、要求、主要内容及实验方法,有准备地上好实验课。

2.2 光学显微镜是《动物组织胚胎学》实验课的主要仪器,因此必须熟练掌握光学显微镜的构造及使用方法。同时,显微镜是贵重的光学仪器,取放和使用时必须严格按照操作规程进行。

2.3 实验课的主要内容是观察切片,按肉眼-低倍镜-中倍镜-高倍镜的顺序进行观察。用肉眼和低倍镜先观察整体结构,然后转换至中倍和高倍镜观察局部微细结构。观察切片时要注意思考切面与整体、结构与功能的关系。

2.4 按时完成绘图作业。在全面观察并掌握主要结构、弄清主要结构和次要结构关系的基础上,选择器官或组织的实物切片中比较典型的部分进行绘图,切忌盲目临摹挂图或书本中的插图。

2.5 实验时必须集中注意力,首先是认真听取和领会实验教师示教的讲解,然后对照实验指导进行认真观察和思考,并认真完成作业。

2.6 实验时需携带教材、实验指导、实验报告册、绘图笔、橡皮擦和直尺等。 2.7 调整好升降凳,养成良好的坐姿与观察姿势,认真观察切片中的内容,并按要求进行绘图作业。

2.8 严格遵守课堂纪律和实验室规则。 3 实验室规则

3.1 保持实验室安静和整洁,不得在室内喧哗、打闹和吸烟。禁止随地吐痰、乱扔纸屑秽物、禁止在实验台、显微镜以及切片盒等处乱写乱画。进入实验室必须穿戴整齐,不得穿拖鞋、背心进入实验室。

3.2 按安排的座位就座,按指定号码使用显微镜和切片,不得擅自拿用他人的显微镜或切片,不得擅自拆卸和更换显微镜的部件。

3.3 损坏或丢失显微镜、切片、模型等,或显微镜出现故障时均应立即报告老师,酌情处理。

3.4 实验完毕,将切片如数上交给任课老师,并整理好显微镜。 3.5 值日生负责打扫卫生,关好水、电、门和窗。

实验1 显微镜的构造及使用方法

1 实验目的

1.1 识别显微镜各部分构造,了解基本原理,熟悉显微镜的正确使用方法; 1.2 学会生物绘图的基本技巧。 2 实验内容

2.1 显微镜的一般构造 2.1.1 光学部分

物镜:装在物镜转换器上,成像中起重要作用,一般常用的物镜为4×,10×,40×和100×(油镜)。

目镜:装在镜筒上端,将物镜中放大实像再放大一次,并将物像映入观察者眼中,常用的放大倍数有10×、16×和20×等。

集光器:包括聚光镜和光圈两部分。装于载物台下方。聚光镜的一侧有调节轮,可以升降,可按需要调节亮度。光圈可开大或缩小,以调节进入镜头的光线,适当大小的光圈可使物像更加清晰。 2.1.2 机械部分

镜座:为显微镜基部,用以固定镜身。

载物台:放置标本的平台,其中央有一通光孔,两旁有夹片夹和标本推进器。在推进器的纵、横坐标上分别标有刻度,便于确定某一结构的方位。

物镜转换器:位于镜筒下方,在转换不同倍数的物镜时使用。 粗调节轮:旋转时,载物台升降距离较大。

微调节轮:调节幅度小。旋转一周,可使镜头升或降0.1mm。 镜臂:供握持显微镜用。 2.2 显微镜的使用方法 2.2.1 取镜安放

取镜:右手握住镜臂,左手平托镜座,保持镜体直立(严禁单手提显微镜行走)。

安放:放置桌边时动作要轻。一般应在身体的前面,略偏左,镜筒向前,镜臂向后,距桌边7~10 ㎝处,以便观察和防止掉落。 2.2.2 观察标本

打开电源开关,夹入切片,依次由低倍镜?中倍镜?高倍镜的顺序认真观察。

(1)低倍镜使用方法

① 将切片标本置于载物台上,使切片内的标本对准载物台中央小孔; ② 旋转粗调节轮,以便能在目镜中观察到模糊的图像; ③ 旋转细调节轮,直至能观察到清晰的图像为止。 (2) 高倍镜使用方法

① 依前法先用低倍镜将焦点调准,使物像清晰; ② 将欲检切片的某一部分移至低倍镜视野中央;

③ 直接调转高倍物镜,稍将细调节轮上下旋动,至显出清晰的物像为止。 (3) 油镜使用方法

① 用油镜前,先将集光器上升到顶,光圈放大,使亮度达到最强; ② 将需要详细观察的部分,移到视野中心,用夹片夹固定;

③ 在高倍物镜下观察清楚后,将高倍镜移开,滴加一滴香柏油于切片被检部位;

④ 转换油镜头,使镜头与被检物间充满香柏油,然后转动细调节轮,直到物像清晰为止,此时切勿使用粗调节轮,以免压碎切片,损伤镜头;

⑤ 用完油镜后,必须将镜头和切片上的香柏油用擦镜纸擦去,并用沾有乙醚-酒精(7:3)的擦镜纸擦拭镜头及切片,以免污染镜头,影响以后观察。 2.2.3 使用后的整理

(1)关掉电源;

(2)将物镜转至最低倍; (3)取下切片; (4)照上防尘罩。

实验2 细胞

1 实验目的

1.1 掌握细胞的基本结构;

1.2 在光镜下识别不同大小、形态的细胞。 2 实验内容 2.1 卵细胞

切片:猫、猪或羊的卵巢切片,Bouin氏液固定,石蜡包埋,HE染色。 卵细胞是动物体内的大型细胞,观察其形态结构较为方便。

先用低倍镜观察,在靠近卵巢周边处,可见到成群存在(猫)或散在分布(猪、羊)的大型圆形卵细胞,在卵细胞周围还有一层扁平的细胞围绕,共同组成原始卵泡,此时的卵细胞系初级卵母细胞,外周的扁平细胞叫卵泡细胞。

选择一个结构清楚的原始卵泡移到视野中央,转换成高倍镜观察,重点观察卵细胞的结构。

细胞膜:位于细胞的表面,在固定染色的切片上为一薄膜。

细胞质:在本切片中,只能看到细胞质内有红染的小颗粒(卵黄颗粒),其它的细胞器和内含物在制片过程中或被溶剂溶解或未染出。

细胞核:呈圆形,位于细胞的中央或稍偏的位置,染成蓝紫色,核膜明显,染色质呈深染的团块或颗粒状,有1-2个核仁。 2.2 神经细胞

切片:牛或兔切片,HE染色(或镀银染色)。

低倍镜下观察,可见到一些大型带突起的蓝染细胞——脊髓腹角运动神经细胞。这种神经细胞有很多突起,但由于切片关系,只能看到其中的数个突起。胞质内有染色呈深蓝紫色的块状或颗粒状物质,称尼氏体,在电镜下为粗面内质网。胞核着色较淡,多位于细胞中央,内含少量染色质,核膜明显,有一个大而圆的核仁。

2.3 肝细胞

切片:猪肝切片,HE染色。

低倍镜下找到呈多边形的肝小叶,选择一个肝小叶换高倍镜观察,可见到呈索状排列的肝细胞,呈多边形,有1-2个圆形细胞核,核仁明显,核膜清楚,核内染色质稀疏,染色较浅。 2.4 观察细胞器与内含物

细胞器与内含物的种类很多,实验课仅观察几种主要的细胞器和内含物在光镜下的形态和位置。各种细胞器和内含物,在一般的HE染色的切片上看不到,须用特殊方法染色显示。

线粒体——示教:3号片

小狗胰脏,Regaud氏液固定,石蜡切片,铁苏木素染色。

线粒体用铁苏木素染色呈黑色,分布于核周围的细胞质中,线粒体在高倍镜下呈粒状、线状或短棒状,或直或曲,轮廓鲜明。

胰脏的分泌细胞呈锥形,核大而圆,位于细胞中央,细胞游离端聚集有许多大而圆的黑色颗粒为分泌颗粒。

高尔基复合体——示教:2号片

狗或猪的脊神经节,Golgi氏亚砷酸硝酸银法镀染。

在切片上有大小不一的圆形脊神经节细胞,胞核不着色,但能看到淡黄色的核仁。核周围的细胞质中有镀染成黑色的网状或颗粒状物,即光镜下的高尔基复合体。

糖原——示教:6号片

猪肝,冷Carnoy氏液固定,PAS反应法显示糖原,苏木素复染胞核。 在高倍镜下,肝细胞中可见到大量紫红色的糖原颗粒或小块,在很多肝细胞中,糖原偏于细胞一侧,此系制片过程造成,生活状态时分布较均匀。 3 作业

3.1 高倍镜下绘图:示卵细胞构造。

注解:细胞膜、细胞质、卵黄颗粒、细胞核、核膜与核仁。 3.2 高倍镜下绘图:示神经细胞的构造。

注解:胞体、胞突、胞核、尼氏体、核仁。

实验3 上皮组织

1 实验目的

1.1 掌握各种上皮组织的结构和分布特点; 1.2 熟悉上皮组织的分类原则。 2 实验内容 2.1 单层扁平上皮

切片:肠系膜铺片,硝酸银镀染。

因为本片为铺片,厚度不一,所以在观察的时候应选择标本最薄的部分,细胞间由于硝酸银镀染而呈黑色。被镀染的黑色锯齿状线不是细胞膜,而是细胞之间的细胞间质。细胞质呈淡黄色,细胞核呈空泡样(如用染料复染,则可显示出。) 2.2 单层立方上皮

切片:猪肾脏切片,HE染色。

先用低倍镜观察,在髓质中找到一些管状结构,中间为管腔,管腔周围由一层细胞所包围。换高倍镜观察这一层细胞,可见细胞呈立方形。细胞核染成蓝紫色,位于细胞的中央,细胞质呈粉红色。

切片:甲状腺切片,HE染色。

先用低倍镜观察,寻找甲状腺腺泡,腺泡腔内可看到许多大小不一的红色块状物。腺泡腔的周围由一层细胞所包围,换高倍镜观察这一层细胞,可见细胞呈立方形。细胞核染成蓝紫色,位于细胞的中央,细胞质呈粉红色。 2.3 单层柱状上皮

切片:猪十二指肠横切片或胆囊切片,HE染色。

低倍镜下观察十二指肠横切片,可见到小肠的腔面有许多高矮不一的指状突起,这些突起是小肠绒毛的纵断面。其表面覆盖着一层柱状上皮,选择一结构清晰部位,移至视野中央,换用高倍镜观察。

在高倍镜下,柱状细胞排列紧密,细胞的高度大于宽度,细胞界限不太清晰。胞核呈椭圆形,位于细胞的基部。细胞的游离面上,在光学显微镜下可见到一薄层红染的结构成纹状缘,细胞的基底面与基膜相接,基膜的下方为结缔组织。

在柱状上皮细胞之间,有散在的杯状细胞。杯状细胞外形呈高脚酒杯状,顶部充满粘原颗粒,基部有细胞核。在制片的过程当中,粘原颗粒溶解,所以在切片中呈空泡状,细胞核呈三角形,深染。 2.4 假复层纤毛柱状上皮

切片:猪气管横切片,HE染色。

先用低倍镜观察,寻找气管腔面的黏膜上皮,然后转换成高倍镜观察上皮细胞的形态。

这类上皮由高矮不等的柱状细胞、锥体细胞、梭形细胞和杯状细胞组成。所有细胞的基底面都与基膜相接触,细胞核的位置高矮不齐,排列在不同水平面上,形似复层,其实是单层。浅层的柱状细胞顶部较宽,基部窄,游离面具有纤毛,核呈椭圆形,其顶端可达上皮的游离面。梭形细胞两端尖,中间较粗,核呈椭圆形,位于细胞中央。锥体细胞位于上述两种细胞的基底部,细胞基部宽,游离端窄,核呈圆形,这种细胞很明显的排列在基膜上,看起来较整齐。 2.5 复层扁平上皮

切片:猪食管横切片,HE染色。

先用低倍镜观察,找到食管的管腔,管腔面有厚薄不同的黏膜上皮,选择一部分比较薄的黏膜上皮,换成高倍镜观察。

高倍镜下,细胞层数较多,靠近表面的基层细胞通常都是扁平的;中间层的细胞呈多边形;基底层的细胞呈矮柱状,此层细胞较密,染色较深。基底层的细胞可不断分裂增生并逐渐向表层推移,以补充表层衰老或损伤脱落的细胞。同时,基底层与深部结缔组织连接处凹凸不平,可扩大两者之间的接触面积,以利于吸收营养。 2.6 变移上皮

切片:膀胱横切片,HE染色。

膀胱处于空虚或充盈状态时,其上皮的层次和形态均随之发生改变。 当膀胱处于空虚收缩状态时,上皮变厚,表层细胞呈圆盖状突向管腔,常有双核,称盖细胞;中间层细胞为多边形,基底层的细胞多为矮柱状或立方形。当尿液蓄积膨胀时,变移上皮变薄,细胞形态也发生变化,表层细胞多呈扁平形。 3 作业

任选两种上皮在高倍镜下绘图。

实验4 结缔组织

1 实验目的

1.1 掌握哺乳动物血液有形成分的特征; 1.2 掌握各种结缔组织的结构特点; 1.3 熟记各种结缔组织间的区别。 2实验内容 2.1 固有结缔组织 2.1.1疏松结缔组织

切片:肠系膜铺片,HE染色及特殊的弹性纤维染色法复染。

先用低倍镜观察,选择较薄,纤维分布均匀、细胞不重叠、轮廓清楚的部位,换高倍镜观察。

(1)辨认细胞成分

成纤维细胞:数目最多,胞体大,为多突起的扁平细胞。细胞质染色浅,因此细胞轮廓不清。细胞核大呈椭圆形,可见到清楚的核仁。

巨噬细胞:又名组织细胞,细胞形状不一,亦为多突起的星形细胞,注意与成纤维细胞的区别,主要是细胞质中含有吞噬的台盼蓝颗粒。细胞质染色较深,细胞轮廓较明显。细胞核较小,圆形或卵圆形,染色较深。

肥大细胞:细胞常位于血管附近,细胞呈圆形或卵圆形,细胞质中充满粗大的染成蓝紫色的颗粒,均匀分布在核周围。细胞核小,呈圆形或椭圆形,染色浅,位于细胞中央。

浆细胞:较小,椭圆形。细胞核在细胞的一端,核中的染色质排列成车轮状。近核处的胞质中有一淡染区。胞质嗜碱性,染成蓝色。

(2)观察纤维

胶原纤维:被伊红染成粉红色,为粗细不等的束状结构,交叉排列,有的较直或呈波浪形。

弹性纤维:染成蓝紫色,单条分布而不成束,纤维粗细不等,有分支,并交织成网。

2.1.2 致密结缔组织(示教)

切片:动物肌腱,HE染色。

肌腱为规则致密结缔组织,显微镜下看到肌腱由许多平行而紧密排列的胶原纤维束(染成红色)和腱细胞(蓝染)构成。注意腱细胞在纤维束间成行排列。切面上呈长梭形,核椭圆形或杆状。 2.2 软骨和骨组织 2.2.1 软骨 (1)透明软骨

切片:剑状软骨切片,HE染色。

软骨膜:由致密的胶原纤维和梭形的成纤维细胞组成。软骨膜以胶原纤维直接通入软骨的基质,与软骨紧密连接。

软骨细胞:近软骨膜的细胞还保留着梭形,单个分布,细胞长轴与软骨膜平行。由软骨边缘至中部可以看到软骨细胞的形态逐渐由梭形变为椭圆形或圆形,核也是椭圆形或圆形。细胞2-4个成群分布,称这些细胞为同源细胞群,因它们是由一个骨细胞经有丝分裂形成的。细胞存在的地方称骨陷窝。在生活状态下骨细胞充满于骨陷窝(因软骨细胞富有水分),在制片的过程中,细胞皱缩,因此切片上细胞周围有清亮的裂隙。在软骨深部,较大的软骨细胞由于互相挤压而呈多角形或半月状。

基质:嗜碱性、均质,靠近细胞周围染色深蓝,称软骨囊。基质内有许多胶原纤维,但它与软骨基质有相同的折光率,所以分辨不出。 (2)弹性软骨

弹性软骨的结构基本上和透明软骨相似,主要区别在于基质中含有紫染的弹性纤维,并形成网状结构。 (3)纤维软骨

基质中的胶原纤维成束平行排列。软骨细胞成行地夹在纤维束之间。 2.2.2 骨

骨组织由细胞、纤维和基质所组成。由于骨组织排列的紧密与疏松程度不同又可分为骨密质和骨松质,重点观察骨密质。

制片:取长骨的骨干部锯成薄片,然后磨成极薄的骨片,硫堇(蓝色)或品红(红色)煮染,加胶封藏。

先用低倍镜观察骨磨片。可见骨的外面和内面都有平行于骨面的数层骨板。外面的称外环骨板,内面的称内环骨板。在内、外环骨板之间,可见由许多骨板以同心圆形式排列成的哈氏系统(骨单位)。中央有一个管,称哈氏管。每个哈氏系统外围有空白的圆圈称粘合线,并与周围部分隔开。圆形的哈氏系统之间还存在着一些骨板,彼此也互相平行排列,但不成同心圆,称间骨板。

换高倍镜观察环绕哈氏管呈同心圆排列的骨板。其上有许多苍耳籽形的空腔,称骨陷窝,为生活时骨细胞在骨板中所占据的腔隙,骨陷窝有许多向各方向伸出的微细小管,称骨小管。骨陷窝彼此借骨小管相通,这对骨细胞的营养有作用。

再观察骨的纵断面。中央管和其周围呈同心圆排列的骨板都被纵断。 2.3 血液

血液涂片的制备:取一小滴鲜血,立即滴在载玻片上,用另一载玻片倾斜成450角将血液推成薄薄一层。待涂片干燥后,滴加Wright氏染料甲醇溶液数滴,经固定及染色1-2分钟后,滴加等量蒸馏水,与染液混合,15分钟后水洗,待干即可观察。

2.3.1 哺乳动物血涂片

由低倍转至高倍,找血细胞类型较多的区域,观察血液中的三种有形成分——红细胞、白细胞和血小板。

(1)红细胞:数量多,小而圆,为双面凹陷的盘状结构,因此中央着色较浅,没有细胞核。

(2)白细胞:慢慢移动血片,观察各种白细胞,白细胞数目较少,寻找较困难。白细胞胞体大,细胞核明显,极易与红细胞区别开。

①粒细胞——细胞质中有特殊染色颗粒,根据颗粒对染料选择性的不同可分为:

2.3 心壁

切片:猪心脏切片,HE染色。

低倍镜下观察,可看到心内膜及心肌层。高倍镜下观察,心内膜由内皮、内皮下层和心内膜下层组成。内皮为单层扁平上皮,内皮下层由结缔组织构成,心内膜下层靠近心肌膜,为疏松结缔组织,内含小血管、神经和浦肯野氏纤维。浦肯野氏纤维是心脏传导系统的分支。心肌膜主要由心肌构成,大致可分为内纵行、中环行和外斜行三层。心肌纤维之间有数量不等的结缔组织和极为丰富的毛细血管。心外膜及心包的脏层,为浆膜,其表面被覆一层间皮,深面为薄层疏松结缔组织,含有血管、神经、淋巴管及脂肪组织等。 3 作业

绘中等动脉、中等静脉或心壁局部图。

实验8免疫系统

1 实验目的

1.1 掌握淋巴结的组织结构; 1.2 掌握脾脏的组织结构; 1.3 掌握胸腺的组织结构。 2 实验内容 2.1 胸腺

切片:猪胸腺,HE染色。

肉眼观察,蓝紫色部分为胸腺皮质,染色较淡的为髓质部分。

低倍镜下观察,被膜结缔组织伸入实质,把胸腺分成若干个胸腺小叶。将视野对准一个胸腺小叶,可见皮质部被结缔组织分开而髓质部仍连在一起。胸腺皮质位于小叶的外周,可见有大量深染的T-淋巴细胞在皮质的外周,被膜下或结缔组织间隔旁,以大型和中型淋巴细胞为主,靠近深部,则为小型淋巴细胞。在淋巴细胞间还可见到巨噬细胞。

高倍镜下观察,在被膜下、间隔旁或血管周围,可见由扁平上皮细胞形成的隔层,这些上皮细胞染色浅,核呈椭圆形,称为上皮网状细胞。这类细胞在小叶内呈星状,形成网架,T-淋巴细胞在网眼中发育,上皮网状细胞可分泌胸腺激素,诱导淋巴细胞的分裂。在髓质部观察胸腺小体,由数层上皮网状细胞呈同心圆排

列构成圆形或卵圆形的小体。小体中央透明,靠近小体边缘可见有大小不一的核,该小体作用不详。 2.2 淋巴结

切片:牛淋巴结,HE染色。

低倍镜下观察,淋巴结可分为被膜、皮质和髓质三部分。

被膜:由比较致密的结缔组织构成,被膜伸入淋巴结内形成小梁。被膜和小梁均染成淡红色。

皮质:在皮质浅层可见到呈圆形或椭圆形的淋巴小结。在淋巴小结内可看到三种结构:靠近小结的外周部分出现月牙形的深染区,它是由许多小型的淋巴细胞组成,称为帽区;帽的深部可见一明亮的部分,称为亮区,亮区内的淋巴细胞多为中型淋巴细胞,染色很浅;亮区的下方为暗区,该区淋巴细胞多为大型淋巴细胞,染色较深。淋巴小结的细胞属于B淋巴细胞。

在被膜下或小梁旁,可见淡染的网状空隙,称为皮质淋巴窦。

副皮质区位于淋巴小结和髓质之间,有大量散在的淋巴细胞,细胞大小不一,该区细胞主要是T淋巴细胞。

髓质:位于淋巴结的中央部分,由髓索和髓窦组成。髓索为淋巴组织索,与副皮质区相连。髓索内有淋巴细胞、浆细胞和巨噬细胞等。髓窦位于髓索之间,与皮质淋巴窦相通。 2.3 脾脏

切片:猪脾脏,HE染色。

低倍镜下观察,脾脏表面有被膜包裹,被膜由致密结缔组织和大量平滑肌组成,染成红色,伸入脾内,构成小梁。实质部可见一团团的淋巴组织,称为白髓,染色较深,呈深蓝色,在白髓的偏心处可见中央动脉的横切面,白髓周围的淋巴组织及血窦均属于红髓,它充满了白髓周围的所有位置,红髓与白髓交界处为边缘区。

高倍镜下观察,白髓由淋巴小结(或脾小结)和动脉周围淋巴鞘两部分构成。淋巴小结位于白髓一侧,在淋巴小结中有生发中心(但一般不易看到),主要由B淋巴细胞构成。动脉周围淋巴鞘是围绕着1-2个小动脉(中央动脉)周围较厚的弥散淋巴组织,由大量T淋巴细胞、少量巨噬细胞和交错突细胞等构成。红

髓由脾索和脾窦构成。脾索是彼此吻合交叉的淋巴组织索,其中有网状细胞和大量B细胞,以及巨噬细胞、浆细胞和各种血细胞。脾窦位于脾索和脾索之间或脾索与小梁之间,其中有大量血细胞,脾窦上皮细胞呈长杆状,沿脾窦长轴平行排列。小梁由含有平滑肌的结缔组织构成,其内有时可见小动脉、小静脉的断面。 3 作业

高倍镜下绘淋巴结或胸腺或脾脏局部的结构图。

实验 9 内分泌系统

1 实验目的

1.1 掌握脑垂体的组织结构; 1.2掌握甲状腺的组织结构; 1.3掌握肾上腺的组织结构。 2 实验内容 2.1 脑垂体

切片:猪脑垂体,HE染色。

低倍镜下观察,垂体外面包有结缔组织膜,实质可分为腺垂体和神经垂体两部分。腺垂体又远侧部、中间部和结节部三部分。垂体的前部为远侧部,远侧部后方有垂体裂,垂体裂的后方有中间部。神经部位于垂体的后部,与中间部相邻。

高倍镜下观察,远侧部是构成腺垂体的主要部分,腺细胞排列成团索状,细胞间有丰富的血窦和少量结缔组织。根据腺细胞着色的差异,可区分出三种不同类型的细胞:嗜酸性细胞、嗜碱性细胞和嫌色细胞。嗜酸性细胞很容易辨认,胞质中含有嗜酸性颗粒,核圆形,数量较多,多位于远侧部的周围;嗜碱性细胞胞质中含有蓝紫色颗粒,体积较大,在远侧部中间较多;嫌色细胞胞质染色很浅,细胞界限不清,多位于细胞团的中央。 2.2 肾上腺

切片:猪肾上腺,HE染色。

低倍镜下观察,最外面为结缔组织被膜,内部为实质。实质又可分为外周的皮质和内部的髓质两部分。皮质由外向内分为多形区、束状区和网状区。多形区细胞索排列呈弓形;束状区细胞平行排列成束;网状区细胞索交错呈网状。细胞之间有大量毛细血管。髓质位于腺体的中心部位,细胞索排列不规则,索间有大

量毛细血管。细胞呈多边形,在用铬盐处理的标本中,胞质内可见嗜铬颗粒,因此又称为嗜铬细胞。在髓质内,偶见交感神经节细胞,细胞呈卵圆形,核大而圆,淡染。 2.3 甲状腺

切片:甲状腺切片,HE染色。

低倍镜下观察,腺体表面为结缔组织构成的被膜,伸入实质内,将实质分隔成许多小叶。小叶内有许多圆形或卵圆形滤泡,滤泡腔内含有粉红色胶状物质。

高倍镜下观察,滤泡上皮为单层立方上皮。在滤泡上皮细胞之间或滤泡间质中可见滤泡旁细胞,比滤泡上皮细胞大,胞质染色较淡,核大而圆。 3 作业

任选一种内分泌腺会绘图。

实验10 消化系统

1 实验目的

1.1 掌握食管、胃和肠的组织结构; 1.2 掌握肝和胰的组织结构。 2 实验内容 2.1 食管

切片:小动物食管横切片,HE染色。

低倍镜下观察,食管由黏膜、黏膜下层、肌层和外膜四层构成。

高倍镜下观察,黏膜由上皮、固有膜和黏膜肌层三层构成。上皮为复层扁平上皮,固有膜由疏松结缔组织构成,黏膜肌层为一薄层纵行平滑肌。黏膜下层为疏松结缔组织,含有食管腺、血管及神经。肌层为内环行和外纵行两层。外膜为纤维膜,含有血管、神经及淋巴管等。 2.2 胃

切片:猪胃底切片,HE染色。

低倍镜下观察,可分为黏膜、黏膜下层、肌层和浆膜四层。黏膜层包括上皮、固有膜和黏膜肌层三层,黏膜下层为疏松结缔组织,肌层可分为内斜行、中环行和外纵行三层肌肉,外膜为浆膜。

高倍镜下观察黏膜上皮及胃腺的结构。上皮为单层柱状上皮,核卵圆形,位于细胞基底部。上皮细胞不仅被覆于黏膜表面,还下陷形成胃小凹。沿胃小凹向下观察,胃底腺为长而直的分支管状腺,可分为腺颈、腺体和腺底三部分。颈部短,与胃小凹底相连,体部较长,位于腺中部,底部略膨大,可达黏膜肌层。其中可见三种细胞,即主细胞、壁细胞和颈黏液细胞。主细胞呈立方形或低柱状,细胞界限不清楚,呈淡蓝色,胞核呈圆形或卵圆形,体积较小。壁细胞体积较大,呈卵圆形,细胞质红染。颈黏液细胞常夹在壁细胞间,数量少,细胞形态不规则,核扁圆,居细胞底部。 2.3 小肠

切片:猪十二指肠横切片,HE染色。

肉眼观察,可见靠近管腔的黏膜面上出现几个大的突起,称为皱襞,黏膜下层结构疏松淡染,肌层染成深红色,最外层为浆膜。

低倍镜下观察,管壁由内向外分别为黏膜层、黏膜下层、肌层和浆膜四层结构。在皱襞上可见许多指状突起,称为肠绒毛,它是由上皮和固有膜向肠腔面突起形成。黏膜下层由疏松结缔组织构成,并含有大量腺体,称十二指肠腺。肌层由内环行和外纵行两层肌肉构成,在两层平滑肌之间或者在环行肌与黏膜下层之间,可见有卵圆形淡紫色的副交感神经的节后神经元。

把切片移至肠绒毛正中切面处,转换高倍镜,观察肠绒毛结构。上皮为单层柱状上皮,细胞游离缘可见有深染的纹状缘(在电镜下,纹状缘由无数微绒毛组成),在柱状细胞之间夹有杯状细胞。在绒毛中央的固有膜部分,可见横断或纵断的毛细淋巴管(称中央乳糜管),有的切片上还可见有毛细血管的断面,内有红细胞。在靠近绒毛基部,可见有大量肠腺。 2.4 肝

切片:猪肝切片,HE染色。

低倍镜下观察,肝脏被结缔组织分隔成许多多角形的小叶,称肝小叶。小叶的中央有一管腔,称中央静脉,管壁由内皮细胞组成。肝细胞以中央静脉为轴心呈放射状排列,切片上呈索状称为肝细胞索,立体结构中称为肝板。肝细胞索之间的不规则腔隙称肝血窦。在几个相邻肝小叶之间的结缔组织中,可见管道密集的区域,称为门管区,包括小叶间动脉、小叶间静脉和小叶间胆管。

高倍镜下观察,肝细胞呈多角形,核大而圆,有的肝细胞有两个核。肝血窦内可见两种细胞,一种是贴近肝细胞的扁平内皮细胞,另一种是多突起或呈梭形

的细胞,具有吞噬功能,称为枯否氏细胞。小叶间静脉管腔小而规则,管壁较厚,小叶间静脉管腔大而不规则,管壁较薄,小叶间胆管管壁为单层立方或柱状上皮细胞,胞核圆形,管腔较小。 2.5 胰

切片:猪胰脏切片,HE染色。

低倍镜下观察,胰腺组织被结缔组织分隔成很多小叶,每个小叶内有许多深染为紫红色的腺泡,在腺泡之间有一些染色较淡的细胞团,即为胰岛。

高倍镜下观察,腺泡由锥状细胞构成,胞核圆形,位于细胞中央稍偏基部。细胞游离端染成浅紫红色,基底部则染成深紫色。在有的腺泡腔内还可见一些扁平或立方细胞,称为泡心细胞,是闰管上皮细胞向腺泡腔内延伸所成。 3 作业

3.1 绘食管或胃局部图; 3.2 绘肝小叶图。

实验 11呼吸系统

1 实验目的

1.1 掌握气管的组织结构; 1.2 掌握肺的组织结构。 2 实验内容 2.1 气管

切片:兔气管横切面,HE染色。

低倍镜下观察,气管管壁由内向外分为黏膜、黏膜下层和外膜三层,三层之间无明显分界。

高倍镜下观察,黏膜由上皮和固有层构成。上皮为假复层纤毛柱状上皮,衬于腔面,纤毛细胞数量多,呈柱状,其游离面有纤毛。杯状细胞散在于纤毛细胞之间,细胞顶部膨大,呈空泡状。基细胞位于上皮的深层,呈锥体形,核圆形,深染。上皮基部有明显的基膜,着深红色。固有层位于上皮深层,较薄,与黏膜下层分界不明显,此层由较细密的结缔组织构成,其内分布有气管腺的导管、小血管、神经和淋巴组织等。

黏膜下层位于固有层深层,为着色较浅的疏松结缔组织,内有较大的血管、神经、淋巴组织以及较多的气管腺。

外膜最厚,由“C”字形透明软骨环、结缔组织以及脂肪细胞所构成,在软骨环的缺口处,填充有平滑肌纤维和结缔组织。 2.2 肺

切片:牛肺切片,HE染色。

低倍镜下观察,肺表面有肺胸膜覆盖,胸膜下结缔组织伸入实质,将实质分隔为许多肺小叶。实质内可见有大小不等、形态不规则的管腔及空泡。根据管腔的大小、管壁的厚薄和管壁的结构,区分小支气管、细支气管、终末细支气管、呼吸性细支气管、肺泡管、肺泡囊以及小动脉和小静脉等。

高倍镜下观察:

小支气管:管壁较厚,管腔较大。黏膜表面为假复层纤毛柱状上皮,其中夹有杯状细胞。黏膜下层内可见散在的气管腺,外膜内的软骨片较大且不规则,黏膜和黏膜下层之间分布有散在的平滑肌束。

细支气管:管壁较薄,管腔较小,黏膜向管腔内突出形成皱襞。黏膜上皮为假复层纤毛柱状上皮或单层纤毛柱状上皮,杯状细胞极少。固有层深部的平滑肌束增多,形成较完整的一层。腺体和软骨片较少。

终末细支气管:管壁很薄,管腔更小,无皱襞。上皮为单层柱状或立方上皮,平滑肌形成薄而完整的一层,杯状细胞、腺体和软骨片完全消失。

呼吸性细支气管:管壁上有肺泡的开口,因而管壁不完整。上皮为单层柱状或立方上皮,上皮深层有少许结缔组织和散在的平滑肌纤维。

肺泡管:由多个肺泡围成,无完整的管壁。在相邻肺泡开口处,肺泡隔末端平滑肌纤维呈结节状膨大,着粉红色。

肺泡囊:亦由肺泡围成,但相邻肺泡开口处无结节状膨大。

肺泡:大小不等、半球形的薄壁囊泡。肺泡上皮分Ⅰ型肺泡细胞和Ⅱ型肺泡细胞,Ⅰ型肺泡细胞呈扁平形,核扁而深染;Ⅱ型肺泡细胞呈圆形或立方形,核圆形。

肺泡隔:相邻肺泡之间的薄层结缔组织,内有丰富的毛细血管。

尘细胞:位于肺泡腔或肺泡隔内。细胞体积较大,形状不规则。胞质内有吞噬的颗粒。 3 作业

在高倍镜下绘肺的局部图。

实验 12 泌尿系统

1 实验目的

掌握肾的组织结构。 2 实验内容

切片:猪肾切片,HE染色。

低倍镜下观察,肾脏表面是结缔组织被膜,内部为皮质和髓质。皮质内可见三种结构:肾小体、近端小管曲部和远端小管曲部。肾小体呈球形,染成紫红色;近端小管曲部染成红色,管径较大;远端小管曲部染色较浅,管径较小。髓放线是髓质伸向皮质中的直行肾小管,染成紫红色。髓质为纵向或横断的肾小管,包括集合管、近端小管直部、远端小管直部、细段以及乳头管。

高倍镜下观察:

肾小体:由肾小球和肾小囊组成。肾小球为一团动脉毛细血管球,在切片上可以找到稍粗的入球小动脉和稍细的出球小动脉(往往容易找到其中一个)。肾小囊壁层为单层扁平上皮,脏层细胞紧贴肾小球,不易区分,壁层和脏层之间的腔隙为肾小囊腔,为收集原尿的地方。

近端小管曲部:染成深红色,管壁上皮细胞呈锥体状,细胞间界限不清。细胞核大而圆,多位于基部。细胞游离端有刷状缘,管腔小而不规则。

远端小管曲部:胞质染色较淡,呈立方形或低柱状,细胞分界清楚,核圆形,位于中央,管腔较大。

球旁复合体:位于肾小体血管极,在入球和出球小动脉之间,其中包括:致密斑、球外系膜细胞和球旁细胞。

细段:上皮为扁平细胞,3-4个细胞围成一个管腔。

集合管:管壁细胞由立方上皮移行为柱状上皮,细胞界限清楚,胞质染色较淡,核圆形,居中。

乳头管:管壁由高柱状细胞移行为复层柱状细胞,在肾乳头开口处逐渐转为变移上皮。 3 作业

高倍镜下绘肾局部图。

实验13 生殖系统

1 实验目的

1.1 掌握睾丸的组织结构; 1.2 掌握卵巢的组织结构。 2 实验内容 2.1 睾丸

切片:猪睾丸切片,HE染色。

低倍镜下观察,睾丸表面被覆一层浆膜,其深层是较厚的由致密结缔组织构成的白膜,浆膜和白膜构成睾丸的被膜,被膜的深层是睾丸实质,其中有大量横断或斜断的呈圆形、椭圆形或不规则的小管,即曲精小管。有的曲精小管由于仅切到管壁而未见管腔。曲精小管之间少量的结缔组织为睾丸间质。

高倍镜下观察,曲精小管外有一层较明显的红色的基膜,基膜周围有一层肌样细胞,核呈梭形,细胞界限不清。从基膜向内观察,可见到处于不同发育阶段的生精细胞和支持细胞。

精原细胞:紧贴基膜,1-2层,细胞较小,圆形或椭圆形,胞质着色很淡,胞核圆形或椭圆形。

初级精母细胞:在精原细胞内侧,约有2-3层,多为圆形大细胞,常有分裂相,染色体密集成团。

次级精母细胞:体积比初级精母细胞小,胞核圆形,染色质呈网状,染色均匀。次级精母细胞存在时间短,很快进行第二次成熟分裂,因此在切片上不易找到,需要观察多个曲精小管切面才可看到。

精子细胞:位置更靠近管腔,细胞体积更小,核圆形,染色深。在不同的曲细精管断面上可见到处于不同发育阶段的变态中的精子细胞。如:核变长形成精子头部。

精子:头部深染,尾细如丝。头部朝向管壁或位于管腔中。

支持细胞:位于曲细精管管壁上偏于基膜侧的部分,核呈椭圆形或三角形。细胞质位于各期生精细胞之间,故不易分辨其细胞界限。

间质细胞位于曲细精管之间的结缔组织内,细胞呈多角形或圆形,体积大,细胞核圆形,细胞质强嗜酸性,可分泌雄性激素。间质细胞之间可见毛细血管。

2.2 卵巢

切片:羊、狗或猫卵巢切片,HE染色。

低倍镜下观察,卵巢表面有一层扁平或立方形的生殖上皮,上皮深层是致密结缔组织构成的白膜。白膜深面是卵巢的实质,可分为外周的皮质和中央的髓质。皮质由较致密的结缔组织基质和不同发育阶段的卵泡组成。髓质由疏松结缔组织构成,内含丰富的血管、神经和淋巴管,与皮质无明显界限。

高倍镜下观察,皮质中含有处于不同发育阶段的卵泡。

原始卵泡:位于白膜下的皮质浅层,数量很多,排列成层或成群。卵泡中央有一个初级卵母细胞,其外周为一层扁平的卵泡细胞。

初级卵泡:由原始卵泡发育而来,卵泡体积随着发育而逐步增大。在中央初级卵母细胞体积增大的同时,其周围出现均质红色的透明带。卵泡细胞由扁平变为立方或柱状,由单层变成双层乃至多层。卵泡周围的结缔组织逐渐形成卵泡膜。

次级卵泡:由初级卵泡继续发育增大而成。次级卵泡体积更大,起初在多层卵泡细胞之间出现一些小腔隙,以后汇合成一个大的卵泡腔,腔内充满卵泡液。由于卵泡腔的形成和不断扩大,把卵母细胞连同其周围的卵泡细胞挤到一边,形成一个突向卵泡腔内的丘状隆起,称为卵丘。紧贴卵母细胞和透明带的一层卵泡细胞呈高柱状,排列松散并呈放射状,称放射冠。其余的卵泡细胞沿卵泡腔周围分布,形成密集的颗粒层。若切面未经过中央的卵母细胞,则卵泡内仅见一些卵泡细胞或颗粒层以及卵泡腔。卵泡膜明显地分为内、外两层,内层含较多的细胞和血管,称卵泡内膜,外层纤维成分较多,并与基质相连续,称为卵泡外膜。

成熟卵泡:卵泡体积达到最大,并逐渐突出于卵巢表面,成熟卵泡存在时间短,很快就会破裂排卵,故切片上一般只能见到近成熟卵泡。

闭锁卵泡:卵泡在发育的各个时期,都可能变为闭锁卵泡,表现为卵母细胞结构不清晰,甚至消失,透明带皱缩,卵泡壁塌陷。 3 作业

高倍镜下绘睾丸或卵巢局部图。

实验14 被皮及其衍生物

1 实验目的

1.1 掌握肤的组织结构;

1.2 掌握皮肤衍生物毛、皮脂腺、汗腺和乳腺的组织结构。 2 实验内容 2.1 皮肤

56号切片,HE染色。 低倍镜观察:

可见皮肤分为表皮、真皮和皮下组织三层。表层为复层扁平上皮,真皮的乳头层与表皮相邻,真皮网状层与乳头层分界不明显。皮下组织为疏松结缔组织。

高倍镜观察: (1)表皮

包括基底层、棘细胞层、颗粒层、透明层和角质层。位于表皮最深的一层是基底层,它是由单层矮柱状细胞组成,其底面紧贴基膜。黑色素细胞也位于基底层。胞质内含有棕色细小颗粒,胞质多突起,基底层细胞具有强的分裂能力。

位于基底层上面的是棘细胞层,它是由多层菱形或多边形细胞形成。细胞表面有许多微小突起并与相邻的细胞突起相接触,构成细胞间桥。调暗光线,可以看到细胞间桥,电镜图片上可见细胞间桥是桥粒结构,棘细胞层的深层也见有色素细胞,其星状突起伸入表皮细胞间。该层的浅层细胞逐渐变为扁平。

颗粒层位于棘细胞层的浅面,由数层梭状细胞组成。细胞长轴平行于皮肤表面,细胞核深染,固缩,并逐渐退化消失。胞质内出现透明角质颗粒,HE染色,角质颗粒被苏木素染成深蓝色。

透明层呈均质红染,由数层扁平无核细胞组成,由于胞质中充满了磷脂类结合蛋白,其反光性强,呈透明状。

角质层位于表皮的最外层,它由多层无核的扁平细胞组成,胞质中充满角蛋白,角质层细胞逐渐脱落形成皮屑。

(2)真皮

包括乳头层和网状层。

乳头层与表皮基底层相邻,它由致密结缔组织组成,内含纤细的胶原纤维,弹力纤维,交织成网,细胞成分少,该层向表皮深层形成乳头状隆起,称为真皮乳头,无毛或少毛皮肤,真皮乳头高而窄。乳头层内富有毛细血管,淋巴管和神经末梢。

网状层位于乳头层的深侧,两层之间无明显分界。网状层含有粗大的胶原纤维和弹性纤维束。两种纤维束交错排列。细胞成分少。

(3)皮下组织

是位于真皮下的疏松结缔组织。 2.2 毛

高倍镜观察毛的结构:

毛干:突出体表的游离部分。毛根:位于毛囊内的部分。毛球:毛根末端的膨大部分。

毛乳头:毛球底部的凹陷,内含真皮的结缔组织,血管和神经纤维。 毛的结构:中轴称为髓质,由数层疏松排列的扁平或立方形角化细胞构成,皮质位于髓质的外周由数行多边形或棱形角化细胞,细胞内含色素决定毛的颜色。毛的最外层为毛小皮,由单层扁平角化细胞成复瓦状排列,其游离缘向上,呈锯齿状。

毛囊是皮肤下陷形成的,移动推进尺,观察毛囊和皮肤,毛的各层关系,毛囊分为毛根鞘和结缔组织鞘两部分。毛根鞘是由表皮转化而来,又分为内根鞘和外根鞘。外根鞘相当于表皮的基底层和棘层。内根鞘相当于表皮角质层,该层最内层为鞘小皮与毛小皮相延续。玻璃膜相当于表皮的基膜。结缔组织鞘同真皮相延续,毛乳头相当于真皮乳头。

竖毛肌是一束连于毛囊基部,斜向穿过真皮层的平滑肌。 2.3 皮脂腺

皮脂腺位于毛囊周围,为分支或不分支的泡状腺,开口于毛囊。可分为分泌部和导管部,分泌部内充满多角形细胞,被染成淡粉红色,核大而圆。淡染,皮脂腺分泌物就是细胞崩解后形成的脂样分泌物,称皮脂。分泌部周缘靠近基膜的细胞体积小,扁平,可不断增殖新细胞,导管部很短,为复层扁平上皮。 2.4 汗腺

为单管状腺,分泌部位于皮下组织,盘曲成团,由单层立方上皮组成。管腔较大,在上皮与基膜之间,有一层棱形细胞分布,称为肌上皮细胞,导管部管腔小,穿过真皮,开口于表皮表面,它由单层较扁的立方上皮构成,胞核扁平。 2.5 乳腺

58号切片:泌乳期牛乳腺,HE染色。

低倍镜观察:乳腺小叶内有密集的腺泡和小的排泄管,以及管间结缔组织,内有丰富的血管,各个小叶处于不同分泌状态,有的腺泡呈卵圆形或球形,腺腔充满分泌物,有的腺腔分泌物较少。

高倍镜下观察:腺泡由腺上皮和肌上皮构成。腺细胞因所处的机能状态不同,而出现扁平,立方形,柱状及高柱状,腺上皮细胞大小均匀,胞质嗜酸性。核位于细胞中央或细胞基底部,在腺上皮与基膜之间,有肌上皮细胞。 3 作业

绘图:乳腺腺泡和间质

注解:1.腺泡;2.肌上皮细胞;3.间质。 绘图:毛的结构

注解:1.毛干;2.毛根;3.毛球;4.毛乳头;5.毛根鞘;6.结缔组织。

实验15 畜禽胚胎学基础

1 实验目的

1.1 了解家畜早期胚胎发育的主要过程;

1.2 了解家畜胎盘的构造及不同动物胎盘的类型; 1.3 了解鸡胚早期胚胎发育的主要过程 2 实验内容

2.1 孵化24小时鸡胚

胚胎已发生较大变化。胚胎处于原线状态,染色较深的一端为头部,染色较浅的一端为尾部。胚胎中出现了初期的血岛,脊索原基与神经板皆已形成。 2.2 孵化48小时鸡胚

产生颈曲与背曲,脑已分化为前、中、后脑三部分;体节已发展到16-23对;视、听囊出现,心脏开始搏动;胚盘血管已形成并与体内建立了联系;胚体长度达9-12毫米。 2.3 孵化72小时鸡胚

脑已清楚地分为5个部分;体节数达33对左右;前、后肢芽出现,鳃弓具有5对;尿囊出现。 2.4 孵化96小时鸡胚

头部显著增大,大脑半球明显;眼发育极快,眼内色素沉着,眼球明显;鳃弓和鳃囊开始模糊不清,全部体节约50对;心脏发育已近似成体心脏;胚体已极度弯曲,大脑半球与前肢芽几乎和尿囊接触。 3 作业

任选一鸡胚绘图。

本文来源:https://www.bwwdw.com/article/1ac5.html

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