核酸分子杂交试题（全，打印）

核酸分子杂交试题

一. 名词解释: 1. 核酸分子杂交

2. DNA复性

3. Southern杂交

4. Northern杂交

5. 斑点印迹

6. 原位杂交

二. 单项选择题:

1. 在加热或紫外线照射下，可导致两条DNA链中间的氢链断裂，而核酸分子中所有的共价键则不受影响的称为（ ）。

A. DNA变性 B. DNA复性 C. DNA重组 D. DNA杂交 2.DNA变性的本质是（ ）的断裂。

A. 盐键 B. 氢键 C. 离子键 D. 共价键 3. 一般影响核酸变性的温度可选在（ ）。

A. 60—70℃ B. 70—80℃ C. 80—90℃ D. 90—100℃

4. 在核酸分子杂交时，一般对应温度作图得到的DNA复性曲线所用的紫外吸收值是（ ）。 A. A260吸收值 B. A280吸收值 C. A320吸收值 D. A360吸收值

5. 进行核酸分子杂交时，一般适宜的探针浓度是（ B ）。 A. 0.1μg B.0.1—0.5μg C.0.5--1μg D.1.0—1.5μg

6.杂交时如果使用单链核酸探针，随着溶液中探针浓度的增加，杂交效率也会增加，所以探针长度控制在（ ）。

A. 50—300bp B. 20—200bp C.300—400bp D.200—500

7.进行核酸杂交时，一般适宜的复性温度较Tm值低（ ）。 A.10℃ B.15℃ C.20℃ D.25℃ 8.寡核酸探针杂交反应一般在低于Tm值（ ）下进行。 A.5℃ B.10℃ C.15℃ D. 25℃ 9. 下列哪种试剂能降低核酸杂交的Tm值（ B ）。 A．尿素 B. 甲酰胺 C.甲醛 D. 乙醇

10. 在凝胶中核酸变性时，为了使DNA片段在合理的时间内从凝胶中移动出来，必须将最长的DNA片段控制在大约（ ）。

A. 1Kb B. 2 Kb C. 3 Kb D. 4 Kb

11. 将RNA或DNA变性后直接点样于硝酸纤维素膜上，用于基因组中特定基因及其表达的定性及定量研究，称为（ ）。

A. 原位杂交 B. 核酸酶保护实验 C. 斑点印迹 D. 狭缝印迹

12. 核酸保持在细胞或组织切片中经适当方法处理细胞或组织后，将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交，称为（ ）。

A. 原位杂交 B. 核酸酶保护实验 C. 斑点印迹 D. 狭缝印迹

13. 在将固定于膜上的DNA片段与探针进行杂交之前，必须将膜上所有能与DNA结合的位点全部封闭，称为（ B ）。

A. 杂交 B. 预杂交

C. 杂交前处理 D. Nouthern印迹杂交

14. 进行间期细胞内染色体DNA的原位杂交时，关键是（ ）。 A. 细胞的培养 B. 加固定液 C. 载波片上的固定 D. 细胞染色体的制备 15. 组织细胞杂交前的预处理的关键是（ C ）。 A. 降解细胞外蛋白 B. 降解细胞内蛋白 C. 降解核酸表面蛋白 D. 降解核酸内DNA

16. 组织细胞杂交前预处理时，降解核酸表面的蛋白质常用的蛋白酶是（ ）。 A. 蛋白酶C B. 蛋白酶K C. 蛋白酶A D. 蛋白酶I

17. 在进行原位杂交时，RNA探针杂交的时间最好是（ ）。 A. 2—4h B. 4—6h C. 6—8h D. 过夜

18. 在核酸杂交中，目前应用最为广泛的一种探针是 （ A ）。

A. 基因组DNA探针 B. 寡核苷酸探针 C. cDNA探针 D. RNA探针

19. 在Southern印迹杂交中用来标记核酸探针最常用的核素是（ ）。 A. 32P B. 3H C. 35S D. 125I

20．在下列非核素标记物中，既属于半抗原，同时也属于配体的是（ ）。 A. 地高辛 B. 生物素 C. 亲合素 D. 罗丹明

21.一些标记物可与某种物质反应产生化学发光现象，通过化学发光可以象核素一样直接使X线胶片上的乳胶颗粒感光。这些标记物称为（ ）。

A.半抗原 B.配体 C.荧光素 D.化学发光探针 22. Sephadex G—50 柱析法中，随着流动相流出的是（ ）。A.小分子物质 B. dATP C.大分子探针 D. dGTP

23. 下列DNA分子的组成中，哪种是核酸变性的最主要的因素（A. AT B. AG C. GC D. TC 24. 在探针的纯化时，无水乙醇可以沉淀（ ）。 A．DNA片段 B. 蛋白质分子 C．RNA片段 D. 小分子物质

25. 待测DNA样品的电泳分离中，作为分子量标准的λDNA是用（A. HindⅢ B. BglI C. ApaI D. BamHI 三. 多项选择题:

1. 导致DNA变性的常用方法有（ ）。

A. 热变性 B. 碱变性 C. 酸变性 D. 化学试剂变性 2. 影响核酸杂交的因素有（ ）。 A. 核酸分子的浓度和长度 B. 温度

C. 离子浓度 D. 核酸分子的复杂性

3. 核酸分子处于何种情况下，核酸的双链可以完全打开成为单链（A. PH＜3 B. 3＜PH＜5 C. 5＜PH＜10 D. PH＞10 4. 在杂交液中加入甲酰胺，其目的是（ ）。 A. 在低温下探针更稳定 B. 使杂交液为中性

C. 能更好的保留非共价结合的核酸

C ）。 ）酶消化的。 ）。

D. 减少核酸杂交的副反应

5. 为减少非特异性杂交反应，在杂交前将非特异性杂交位点进行封闭，常用的封闭物有（ ）。 B. 复性的非特异性RNA C. 变性的非特异性DNA D. 高分子化合物 E. 低分子化合物

6. 下列哪些步骤属于Southern印迹杂交（ ）。 A. 待测核酸样品的制备 B. 待测DNA样品的电泳分离 C. 凝胶中核酸的变性 D. Southern转膜

7. Southern转膜时常用的膜是（ ）。

A. 化学活化膜 B. 尼龙膜 C. 硝酸纤维素膜 D. 滤纸 8. 常用的Southern转膜方法有哪几种（ ）。 A. 硝酸纤维素膜法 B. 毛细管虹吸印迹法 C. 电转印法 D. 真空转移法 9. 用于Southern印迹杂交的探针可以是（ ）。 A. 纯化的DNA片段 B. 纯化的RNA片段 C. 多核苷酸 D. 寡核苷酸片段 10. 原位杂交可以用来检测（ ）。

A. DNA B. RNA C. cDNA D. RNA和DNA 11. 原位杂交所用的探针可以是（ ）。

A. mRNA B. DNA C. RNA D. cDNA 12. Northern印迹杂交中转膜时可采用的方法有（ ）。 A. 毛细管虹吸印迹法 B. 电转印法 C. 真空转移法 D. 凝胶分离法 13. 核酸原位杂交包括（ ）。

A. 组织细胞的固定 B. 预杂交 C. 杂交 D. 冲洗 14. 下列哪些属于核酸原位杂交的常用固定液（ ）。 A. 10%甲醛 B. 4%多聚甲醛 C. 乙醇：冰醋酸（3：1） D. 戊二醛 15. RNA酶保护分析法可用于（ ）。

A. mRNA定量 B. mRNA定性

C. mRNA末端定位 D. 确定内含子在相应基因中 16. 核酸酶S1能降解（ ）。 A. DNA 单链 B. DNA双链

C. RNA单链 D. DNA/RNA杂交双链

17. 根据检测方法的不同，非核素标记物可分为以下几类（ ）。 A. 半抗原 B. 配体 C. 荧光素 D. 化学发光探针 18. 下列物质属于半抗原的是（ ）。

A. 亲和素 B. 罗丹明 C. 生物素 D. 地高幸

19. 核酸分子杂交所用探针采用体外标记法的优点是（ ）。 A.安全系数高

B.需要活体生物或细胞培养系统 C.探针，核酸分离和纯化及储存很方便 D.体外标记一般比体内标记的比放射活性高 20. 化学法体外标记核酸探针最常用的是（ ）。 A. 125I B. 光敏生物素 C. 3H D. 32P 21. DNA探针的酶促标记法包括（ ）。 A. 缺口平移法 B. 随机引物法 C. PCR标记法 D. 末端标记法 22. 探针的纯化包括（ ）。

A．乙醇沉淀法 B. SephadexG-50 C. 甲醇沉淀法 D. 丝柱离心法 23 DNA变性后的理化性质的变化有（ ）。 A. 粘度降低 B. 密度增加 C. 紫外吸收值增加 D. 熔点减小 24. Southern杂交结果检测包括（ ）。 A．放射自显影 B. 比色或化学发光检测 C. 酶切图谱分析 D. 凝胶电泳分离

25. Southern杂交在医学中的应用包括（ ）。 A. 酶切图谱分析 B. 特定基因定性和定量

C. 基因突变分析 D. 限制性片段长度多态性的分析 四. 填空题:

性强，敏感性高，且便于定量操作。（4）可预先诊断。

基因诊断的应用：

（1） 辅助遗传病的临床诊断

（2） 遗传病患病风险分析，如出生缺陷的产前诊断，植入前遗传诊断，遗传筛选等。

（3） 其他疾病易感性预测性诊断，如肿瘤或其他家族性疾病（糖尿病、高血压、肥胖和AD等多基

因病）的易感性预测。

（4） 疗效评价及用药指导，例如评价临床治疗急性淋巴细胞性白血病。 （5） 法医学个体认定

（6） 病原体诊断，包括病毒、细菌、真菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体以及寄生虫等的

诊断。

3. 逆转录酶的三种反应活性①RNA指导的DNA合成②RNA水解③DNA指导的DNA合成

逆转录酶的意义：（1）用于合成cDNA，建立cDNA文库；（2）获得基因或探针；（3）用于RT-PCR。 4. 原理相同，都是利用碱基配对互补的原则而且复制的时候都是半保留复制，都需要引物，底物都是

dNTP。

不同点：

所处的反应环境不同，复制方式不同，所需酶原料不同，复制起始点不同，聚合酶不同，终止方式不同 1。一个体内一个体外

2。聚合酶链式反应（PCR）不会产生冈崎片断

3。一个细胞只在有丝和减数分裂的时候进行DNA复制而PCR可以反复进行 4。细胞中的DNA复制受到许多复杂的因子的调控 5。两者进行的温度不同

6。PCR产物短小，DNA复制不精确; 体内DNA复制是整体染色体的复制

4. 试从肿瘤多基因，多机制说明肿瘤的基因筛选。

分子生物学考题汇总基因治疗

SiRNA

基因免疫

卫星DNA

假基因

超基因家族

环境基因组计划基因芯片

G蛋白

基因封闭

基因敲除

脱靶效应

癌基因

抑癌基因

原癌基因 细胞癌基因 基因免疫 基因组 回文结构

微卫星或简单串联重复（STR） 基因组文库 感受态细胞 蓝白斑筛选试验 载体 多克隆位点

荧光原位杂交（fluorescence in-situ hybridization,FISH） 基因表达 表达调控

Selfish DNA siRNA blue white screen knock down off target effect super gene family g protein DNA-chip

enviroment genetic project

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请从一条基因一条蛋白到一条蛋白一条基因谈谈基因概念的变化

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