细菌的染色方法

细菌的染色方法

细菌的染色方法主要有革兰氏染色,抗酸色法和特殊染色法(包括英膜染色法,芽抱染色法,鞭毛染色法 )

1.革兰氏染色法:

1)器材:金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,结晶紫染液, 革兰氏碘液, 0.4 %复红乙醇液,接种环,酒精灯,载玻片等。

2)方法:先制片,接着染色。

( l ) 结晶紫染液染色1分钟, 水冲洗; ( 2 ) 革兰氏碘液色1分钟; 水冲洗;

( 3 ) 0.4 %复红乙醇液染色3秒钟,水冲洗,吸纸吸干后镜检。 2.抗酸染色法:

1)器材:卡介苗与大肠杆菌和葡萄球菌的混合菌液,石炭酸复红,3 % 的盐酸酒精,碱性美兰染液,接种环,酒精灯,载玻片等。 2)先制片,接着染色。 ( l )石炭酸复红染液先沸水浴1 0分钟, 滴加2一3滴覆盖菌膜染色5分钟,水冲洗;( 2 ) 3 % 的盐酸酒精脱色3 0秒钟,水冲洗;

( 3 )碱性美兰复染3 0秒钟,水冲洗, 吸水纸吸干后镜检. 3.芽抱染色法:

1)器材:破伤风杆菌厌氧培养物,5 % 孔雀绿水溶液,0.5 % 沙黄水溶液,载玻片,酒精灯等。 2)先制片,接着染色。

( l ) 加孔雀绿染液2一3滴于小试管中,并使其与菌液混合均匀,然后将试竹放厂沸水浴的烧杯中,加热染色15分钟: ( 2 ) 涂片、固定:

( 3 ) 水冲洗,至到流出的水无绿色为止; ( 4 ) 用0.5 %沙黄液复染2分钟,弃去多余的染液,吸水纸吸干镜检 (此步骤不用水冲洗 )。 4荚膜染色法:

1)器材:肺炎球菌(小鼠腹腔液 ),石炭酸复红,9 5 %的乙醇,2 0 %鞣酸水溶液,0.8 % 孔雀绿水溶液。 2)方法:

( l )石炭酸复红染色1分钟, 水冲洗:

( 2 ) 9 5 %乙醇短暂脱色 (几秒钟为宜 ),水冲洗 ( 3 ) 2 0 % 鞣酸溶液染色1 0分钟,水冲洗;

( 4 ) 0.8 % 孔雀绿溶液染色1分钟, 水冲洗,吸水纸吸干后镜检。 5.鞭毛染色法 (镀银染色法)

1)器材:变形杆菌新鲜菌液,镀银染色法l液( 鞣酸5克, 5 0% 氯化铁 2.0ml,1.5 %甲醛2.0 ml,1 % 氢氧化钠1.0 ml,蒸馏水100 ml),鞣银染色法2液 ( 2 % 硝酸银溶液,少量氨水 ) 2)方法:

( l ) 鞣银染色1液染色5分钟,水冲洗;

( 2 ) 鞣银染色法2液染色l分钟, 水冲洗,吸纸吸干后镜检。

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