生物电镜技术复习 - 图文
更新时间:2023-11-03 15:08:01 阅读量: 综合文库 文档下载
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一、基础知识(20分):
1. 电子显微镜最主要有哪几类并标出相应的英文简写。(6分)工作原理有什么不同? (6分) (1)主要有透射电镜(TEM)、扫描电镜(SEM) ;(2)透射电镜:电子束透过样品直接放大成像,主要是利用透射电子。扫描电镜:电子束以扫描形式轰击在样品上,产生二次电子等信息,而后再将二次电子等信息收集起来放大成像,主要是利用二次电子。
2. 电子束作用于样品产生各种带有样品信息的信号,请至少列举五种。(5分)请问扫描电子显微镜成像主要利用哪一种信号? (2分) 透射电子显微镜成像主要利用哪一种信号? (2分)微区元素分析仪器,例如能谱仪,使用的是哪一种信号? (2分)
(1)背散射电子、二次电子、吸收电子、透射电子、特征x射线;(2)二次电子;(3)透射电子;(4)特征x射线
3. 什么是纳米材料?(3分)什么是纳米技术?(3分)举2例说明其应用领域。(4分)
(1)物质达到0.1-100纳米的尺度后,物质的性能就会发生突变。这种既不同于原来组成的分子、原子,也不同于特殊物质构成的材料,称为纳米材料。(2)纳米技术(nanotechnology)是用单个原子、分子制造物质的科学技术(3)在医学、环境科学、自动化技术及能源科学的发展等等领域都有很好的应用前景;如纳米光线、纳米药物、纳米车用洁尘魔掸、纳米涂料等
4. 举例说明TEM样品制备技术
在干净玻璃片上滴火棉胶溶液,然后在玻璃片胶液上放少许粉末并搅匀,再将另一玻璃片压上,两玻璃片对研并突然抽开,稍候,膜干。用刀片划成小方格,将玻璃片斜插入水杯中,在水面上下空插,膜片逐渐脱落,用铜网将方形膜捞出,待观察。一般用于磁性粉末样品且观察倍数不高。
4. EDS和WDS的区别?(5分)
(1)EDS使用半导体晶体接收所有x射线信号,信号接收效率高,当前SDD晶体探测效率可达到100万cps。由于同一特征能量x光子,轰击探测晶体,实现的电子空穴对呈现统计的离散事件,以特征能量为中心的高斯分布半高宽较宽,也就是能量分辨率较差,理论上能谱的能量分辨率为120ev,当前10mm2探测晶体商品指标实际在125ev左右,大多标定在130ev左右。由于谱峰较宽,峰背比较差,只有含量高于千分之一的成分才会被探测到,加之各种线系重叠峰严重,所需的剥离重叠峰程序复杂,定量水平较差,标准情况下,定量精度2%左右。
(2)WDS探测器对进入的X射线,首先使用分光晶体,通过机械转动,按照布拉格衍射条件,搜索到元素特征能量X射线,其他不符合衍射条件的X射线被屏蔽,特征能量为中心的高斯分布半高宽很窄,能量分辨率很高10ev以下,和理想的特征x射线分辨率非常接近,几乎可以区分所有线系的特征能量,重叠峰造成的定量影响降到最低,在相同计数率情况下,相对EDS,峰背比很高,可实现万分之一含量元素定性,定量精度要可达0.5%左右。
5. 电镜技术在我专业上的应用。
6.双固定?什么类型的样品需要双固定? 2.5%戊二醛和1%俄酸双固定,组织块
7. 扫描电镜制样时,哪些样品需要进行冷冻干燥或临界点干燥?梯度脱水常用化学试剂有哪些?梯度脱水的浓度分别为多少?
含有水分的样品,乙醇和丙酮,50 %、70 %、80 %、90 %、100 %
二、实验设计(60分):
1.请为下列样品设计制备方案并选择用哪一种电子显微镜进行观察。(任选60分) (1)纳米SiO2的形态和粒径(2)新鲜叶片的表面微形态
(3)烟草叶上出现花叶症状,生长陷于不良状态,叶常呈畸形,一般是感染了烟草花
叶病毒。 如何观察烟草花叶病毒的细微形态
(4 )液态胶黏剂的颗粒形态及粒径
(5)木材弦切面的表面形态结构 (6)铁锈的表面形态
(7)比较两种品牌餐巾纸的表面微形态 (8)造纸纤维的表面形态
(9)鹅掌楸叶片细胞内叶绿体、线粒体等细胞器的结构(15分) (10 ) 杨树叶片栅栏组织、海绵组织的形态观察(10分)
(1)柳树叶片气孔的形态 (2)木材纵切面的形态观察 (3)动物毛发的表面形态
(4)纳米Au材料的个体形态以及粒径大小 (5)某种催化剂的表面形态 (6)活性碳表面孔隙的大小 (7)陶瓷的结构形态
(8)举世闻名的、美丽的荷兰杂色郁金香,实际上就是现在所谓郁金香碎色花病毒造成
的,那么如何在电镜下观察这种病毒的形态
(9)电镜下特种纸的纤维排列状态
(10)书本封面与内页纸张表面微形态上的区别 三、结果分析(20分):
1. 请问以下电镜图片由扫描电镜制样还是透射电镜制样所得?(2分透射电镜样品制备步骤如何?负染色技术的步骤
(5分)由图片信息如何测得颗粒粒径大小?(3分)
10nm
2. X-Ray显微分析的仪器有哪些?EDS、WDS(2分)能谱仪的工作方式有哪些?点、线、面(3分)下图为铅元素
在植物叶片细胞内外的分布情况,此能谱分析结果属于哪种工作方式?线(1分)判断的理由是什么?(4分)全是线
1. 请问图中木材的横切面为扫描电镜制样还是透射电镜制样?扫描(2分)样品制备步骤如何?第二种(5分)箭头所指孔径的实际大小如何获得?(3分)
2.X-Ray显微分析中,能谱仪和波谱仪的工作原理有什么不同?(2分)能谱仪的工作方式有
哪些?(3分)下面为某材料断面的元素分析结果,此结果属于哪种工作方式?点(1分)判断的理由是什么?(4分)通过局部一个点观察
元素C KO KCu KY L总量重量百分比82.4213.153.151.28100.00原子百分比88.5610.610.640.19
样品制备相关技术 TEM负型技术:金属投影技术、负染技术、超薄切片技术 SEM分类:
金属和导电体样品:取准观察目标,表面清理干净,即可粘台,扫描电镜观察 坚硬样品和生物硬组织:用重金属(金、铂)进行表面喷镀后,用扫描电镜观察
动植物器官和软组织:进行一系列的严格处理,尽可能的客服液体表面张力所造成的损伤,然后喷镀,观察
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