生物药物分析实验指导

药物分析实验指导

玉林师范学院生命科学与技术学院

制药工艺学教研室 2012年5月

实验一 药物的杂质检查

一、目的

1.了解药物杂质检查的意义。 2.掌握杂质检查的原理和方法。 3.掌握杂质限量的计算方法。

二、实验内容

(一)标准溶液的配制

1.标准氯化钠溶液的制备

称取氯化钠0.165g，置1000ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液10ml置100ml瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于10μg的Cl)。

2.标准硫酸钾溶液的制备

称取硫酸钾0.18lg，置1000ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于100μg的SO4)。

3.标准铁溶液的制备

称取硫酸铁铵 [FeNH4(SO4)2·12H2O] 0.863g,置1000ml量瓶中，加水溶解后，加硫酸2.5ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。

临用前，精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于10μg的Fe)。

4.标准铅溶液的制备

称取硝酸铅0.160 g，置于1000ml量瓶中，加硝酸5ml与水50ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。

临用前精蜜量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于10μg的Pb)。

配制与贮存用的玻璃容器均不得含有铅。

5.标准砷溶液的制备

称取三氧化二砷0.132g，置1000ml量瓶中，加20％氢氧化钠溶液5ml溶解后，用适量的稀硫酸中和，再加稀硫酸10ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。

临用前，精密量取贮备液1ml，置100ml量瓶中，加稀硫酸1ml，用水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于1.0μg的As)。

(二)氯化钠的杂质检查

1.酸碱度

取本品5.0g，加水50ml溶解后，加溴麝香草酚蓝指示液2滴。如显黄色，加氢氧化钠液(0.02mol/L)0.10ml，应变为蓝色；如显蓝色或绿色，加盐酸液(0.02mol/L)0.2ml，应变为黄色。

2.溶液的澄清度

取本品5.0g，加水25ml溶解后，溶液应澄清。 3.碘化物

取本品的细粉5.0g，置瓷蒸发皿内，滴加新配制的淀粉混合液 [取可溶性淀粉0.25g，

加水2ml，搅匀，再加沸水至25ml，随加随搅拌，放冷，加硫酸液(0.025mol/L)2ml，亚硝酸钠试液3滴与水25ml，混匀] 适量使晶粉湿润，置日光下(或日光灯下)观察，5分钟内晶粒不得显蓝色痕迹。

4.溴化物

取本品2.0g，加水10ml使溶解，加盐酸3滴与氯仿1ml，边振摇边滴加2％氯胺T溶液(临用新制)3滴，氯仿层如显色，与标准溴化钾溶液(精密称取在105℃干燥至恒重的溴化钾0.1485g，加水使溶解成100ml，摇匀)1.0ml用同一方法制成的对照液比较，不得更深。

5.硫酸盐

取本品5.0g，加水溶解成约40ml(溶液如显碱性，可滴加盐酸使成中性)，溶液如不澄清，应滤过，置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸2ml，摇匀，即得供试溶液。另取标准硫酸钾溶液1.0ml置50ml纳氏比色管中，加水使成约40ml，加稀盐酸2ml摇匀，即得对照溶液。于供试溶液与对照溶溶中，分别加入25％氯化钡溶液5ml，用水稀释使成50ml，充分摇匀，放置10分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较、供试品管浊度不得更浓。 6.钡盐 取本品4.0g，加水20ml，溶解后，滤过，滤液分为两等份，1份中加稀硫酸2ml，另一份中加水2ml，静置15分钟，两液应同样澄清。

7.钙盐

取本品2.0g，加水10ml使溶解，加氨试液1ml，摇匀，加草酸铵试液1ml，5分钟内不得发生浑浊。

8.镁盐

取本品1.0g，加水20ml使溶解，加氢氧化钠试液2.5ml与0.05％太坦黄溶液0.5ml，摇匀，产生的颜色与标准镁溶液(精密称取在800℃炽灼至恒重的氧化镁16.58mg，加盐酸2.5ml与水适量使溶解成1000ml，摇匀)1.0ml，用同一方法制成的对照液比较，不得更深。

9.钾盐

取本品5.0g，加水20ml溶解后，加稀醋酸2滴，加四苯硼钠溶液(取四苯硼钠1.5g，置乳钵中，加水10ml研磨后，再加水40ml，研匀，用质密的滤纸滤过，即得)2ml，加水使成50ml，如湿浑浊，与标准硫酸钾溶液12.3ml用同一方法制成的对照液比较，不得更浓。 10.干燥失重

取供试品，混合均匀(如为较大的结晶，应先迅速捣碎，使成2mm以下的小粒)。分取约lg，平铺在130℃干燥至恒重的扁形称瓶中，厚度不超过5mm，精密称定。将瓶盖取下，置称瓶旁，或将瓶盖半开，置烘箱内于130℃干燥约2～3小时后，将称瓶盖好，取出，置干燥器中放置40分钟后，精密称定重量。再按上述方法自“将瓶盖取下??”起，继续干燥1～2小时，依法操作，至恒重为止。从减失重量和取样量计算供试品的干燥失重(规定不得超过0.5％)。

11.铁盐

取本品5.0g，加水溶解成25ml，置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，用水稀释成35ml后，加30％硫氰酸铵溶液3ml，再加水适量稀释成50ml，摇匀。如显色，立即与标准铁溶液1.5ml用同一方法制成的对照液比较，不得更深。 12.重金属

取本品5.0g，加水20ml溶解后，置25ml纳氏比色管中，加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml与水适量使成25ml，加硫代乙酰胺试液（临用前取5.0ml混合液，加4%硫代乙酰胺溶液1ml，水浴加热20秒，冷却，立即使用）2ml，摇匀，放置2分钟，置白纸上，自上向下透视。如显色，立即与标准铅溶液1.0ml用同一方法的对照液比较，不得更深。

13.砷盐

仪器装置：如图1，A为100ml标准磨口锥形瓶，B为中空的标准磨口塞，上连导气管C(外径8.0mm，内径6.0mm)，全长约180mm。D为具孔的有机玻璃旋塞，其上部为圆形平面，中央有一圆孔，孔径与导气管C的内径一致，其下部孔径与导气管C的外径相适应。将导气管C的顶端导入旋塞下部孔内，并使管壁与旋塞的圆孔恰相吻合，粘合固定，E为中央具有圆孔(孔径6.0mm)的有机玻璃旋塞盖，与D紧密吻合。

测试时，于导气管C中装入醋酸铅棉花60mg(装管高度约60～80mm)，再于旋塞D的顶端平面上放一片溴化汞试纸(试纸大小以能覆盖孔径而不露出平面外为宜)，盖上旋塞E并旋紧，即得。

标准砷斑的制备：精密量取标准砷溶液2ml，置A瓶中，加盐酸5ml与水21ml，再加碘化钾试液5ml与酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10分钟后，加锌粒2g，立即照上法装妥的导气管C密塞于A瓶上，并将A瓶置25～40℃水浴中，反应45分钟后，取出溴化汞试纸，即得。

检查法，取本品5.0g，置A瓶中，加水23ml溶解后，加盐酸5ml，照标准砷斑的制备，自“加碘化钾试液5ml”起，依法操作，将生成的砷斑与标准砷斑比较，不得更深。

(三)蒸馏水的杂质检查 1.酸碱度

取本品10ml，加甲基红指示液2滴，不得显红色；另取10ml，加溴麝香草酚蓝指示液5滴，不得显蓝色。

2.氯化物、硫酸盐与钙盐

取本品，分置3支试管中，每管各50ml。第一管中，加硝酸5滴与硝酸银试液1ml；第二管中，加氯化钡试液2ml，第三管中，加草酸铵试液2ml，均不得发生浑浊。

3.硝酸盐与亚硝酸盐

取本品15ml，加醋酸液(6mol/L)18ml，对氨基苯磺酸-α-萘胺试液2ml，锌粉0.01g，摇匀，放置15分钟，不得显粉红色。

4.氨

取本品50ml，加碱性碘化汞钾试液2ml，放置15分钟；如显色，与氯化铵溶液(取氯化铵31.5mg，加无氨蒸馏水适量使溶解并稀释成1000ml)2.0ml，加无氨蒸馏水48ml与碱性碘化汞钾试液2ml制成的对照液比较，不得更深。

5.二氧化碳

取本品25ml，置50ml具塞量筒中，加氢氧化钙试液25ml，密塞振摇，放置，1小时内

不得发生浑浊。

6.易氧化物

取本品100ml，加稀硫酸10ml，煮沸后，加高锰酸钾溶液(0.02mol/L)0.1ml，再煮沸10分钟，粉红色不得完全消失。

7.不挥发物 取本品100ml，置105℃恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干，并在105℃干燥至恒重，遗留残渣不得超过1mg。

8.重金属

取本品40ml，加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml，硫代乙酰胺试液（临用前取5.0ml混合液，加4%硫代乙酰胺溶液1ml，水浴加热20秒，冷却，立即使用。）2ml，摇匀，放置2分钟，与本品42ml与醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml的混合液比较，颜色不得更深。

三、说明

1.药物杂质检查必须注意按规定的检查条件，严格遵守平行原则。平行原则是指样品与标准必须在同一条件下进行反应与比较。即应尽量选择容积、口径和色泽相同的比色管，在同一光源、同衬底上，以相同的方式(一般是自上而下)观察，所加入的试药种类、用量、加入顺序和反应时间等也应一致。

2.杂质限量是指药物中允许存在杂质的最大量。其定义式为：

杂质限量=

杂质允许存在量供试品量 ×100％

3．药物的杂质检查是限度检查，合格者仅说明其杂质量在药品质量标准允许范围内，并不说明药品中不含该项杂质。

四、思考题

1.杂质检查的意义是什么?

2.药物中杂质来源主要有哪些途径? 什么是一般杂质? 什么是特殊杂质? 3.药物杂质检查应严格遵循什么原则?

4.试计算出氯化钠中溴化物、硫酸盐、镁盐、钾盐、重金属和砷盐的限量。 5.某一药物取样0.5g进行重金属检查，药典规定限量不得超过10ppm，应取多少毫升标准铅溶液?

6.某一药物规定砷盐限量不得超过4ppm，取标准砷溶液2ml对照，问应取供试品多少克?

(1)用固定重量称量法称取在120℃干燥至恒重的基准物K2Cr2O71.2258g于小烧杯中，加水使溶解，定量转移到250mL容量瓶中，加水至刻线，混匀，备用。

(2)用移液管量取25.00mL K2Cr2O7溶液于碘瓶中，加KI 2g，蒸馏水15mL，HCl溶液(4 mol·L)5mL，密塞，摇匀，封水，在暗处放置10分钟。

(3)加蒸馏水30mL稀释，用Na2S2O3液滴定至近终点，加淀粉指示液2mL，继续滴 定至蓝色消失而显亮绿色，即达终点。

(4)重复标定2次，相对偏差不能超过0.2%。为防止反应产物I2的挥发损失，平行试验的碘化钾试剂不要在同一时间加入，做一份加一份。

(5)结果计算：cNa五、注意事项

1．K2Cr2O7与KI反应进行较慢，在稀溶液中尤慢，故在加水稀释前，应放置10分钟，使反应完全。

2．滴定前，溶液要加水稀释。

3．酸度影响滴定，应保持在0.2~0.4mol·L-1的范围内。

4．KI要过量，但浓度不能超过2%~4%，因为I太浓，淀粉指示剂的颜色转变不灵敏。 5．终点有回褪现象，如果不是很快变蓝，可认为是由于空气中氧的氧化作用造成，不影响结果；如果很快变蓝，说明K2Cr2O7与KI反应不完全。

6．近终点，即当溶液为绿里带浅棕色时，才可加指示剂。

7．滴定开始时要掌握慢摇快滴，但近终点时，要慢滴，并用力振摇，防止吸附。 六、思考题

1．配制Na2S2O3溶液时为什么要提前2周配制?为什么用新煮沸放冷的蒸馏水?为什么要加入Na2CO3?

2．标定Na2S2O3标准溶液时为什么要在一定的酸度范围，酸度过高或过低有何影响?为什么滴定前要先放置10分钟?为什么先加50mL水稀释后再滴定?

3．KI为什么必须过量?其作用是什么? 4．如何防止I2的挥发和空气氧化I?

5．称取K2Cr2O7基准物1.2258g是如何计算出来的？

6．为什么在滴定至近终点时才加入淀粉指示液?过早加入会出现什么现象? 7．为什么要求使用碱式滴定管进行硫代硫酸钠溶液的滴定?

－

-1

2S2O3?6?(cV)K2Cr2O7VNa2S2O3?6?0.1000?25.00VNa2S2O3

-

附：碘标准溶液的配制及标定

一、配制：

碘标准溶液 C (I2) = 0.1mol/L

称取13g碘及35g碘化钾，溶于少量水中，然后移入1L棕色试剂瓶中，加水稀释至1L，摇匀。 二、标定： 1、原理：

2Na2S2O3 + I2 → 2NaI + Na2S4O6

2、标定：

准确量取20ml～25ml碘液，加50ml水、30ml 0.1C(HCl)盐酸，摇匀，用 0.1 C(Na2S2O3)的Na2S2O3标准溶液滴定近终点（微黄色）时加30ml 0.5％淀粉指示剂，继续滴定至溶液兰色消失为终点。 3、 计算：

V1×C1

C =

V

式中：

V1 ― 滴定消耗Na2S2O3标准溶液体积，ml； C1 ― Na2S2O3标准溶液浓度，mol/L； V1 ― 吸取碘液体积，ml。

三、注意事项：

1、 碘易挥发，浓度变化较快，保存时应特别注意要密封，并用棕色瓶保存放置暗处。 2、 避免碘液与橡皮接触。

3、 配制时碘先和碘化钾溶解，溶解完全后再稀释。

4、 滴定过程中，振动要轻，以避免碘挥发，但临近终点时要摇动应激烈一点。 5、 在良好保存条件下，0.1C (I2)碘液有效期一个月。 6、 必要时也可用基准三氧化二砷作基准物标定碘液。 四、方法来源：

本法采用石油部标准SY2002－76中标定碘液时的对照方法。

实验四 阿司匹林片的质量分析

一、目的要求

1. 熟悉阿司匹林的鉴别方法和片剂的分析方法。 2. 掌握阿司匹林片分析的操作条件及要点。 二、主要仪器与试药

滴定管，锥形瓶，水浴锅，高温炉，研钵，纳氏比色管，三氯化铁、碳酸钠试液，硫酸滴定液，酚酞指示液，水杨酸，阿司匹林片。 1. 三氯化铁试液 2. 碳酸钠试 见附录1 3. 稀硫酸

4. 乙醇

5. 盐酸溶液(9→100)

6. 新制的稀硫酸铁铵溶液〔取盐酸溶液（9→100）1mL,加硫酸铁铵指示液2mL 后，再加水适量使成100mL 〕 7. 水杨酸 固体 8. 冰醋酸 9. 乙醇

10. 比色用氯化钴液（见实验一附录） 11. 比色用重铬酸钾液（见实验一附录）

12. 13. 14. 15.

比色用硫酸铜液（见实验一附录） 醋酸盐缓冲液（pH3.5） 见附录3 酚酞指示液

氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)

16. 硫酸滴定液(0.05mol/L) 见附录4

17. 标准铅溶液、稀焦糖溶液、硫代乙酰胺试液（见实验一附录） 三、实验方法、步骤 阿司匹林(Aspirin)

OOHOCH3O

（C9H8O4, FW=180.16）

本品为2-（乙酰氧基）苯甲酸。含C9H8O4 不得少于99.5%

1. 性状 本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭或微带醋酸臭，味微酸；遇湿报即缓缓水解。

本品在乙醇中易溶，在氯仿或乙醚中溶解，在水或无水乙醚中微溶；在氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液中溶解，但同时分解。

2. 鉴别 (1)取本品约0.1g，加水10mL，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫

堇色。

(2) 取本品约0.5g，加碳酸钠试液10mL，煮沸2分钟后，放冷，加过量的稀硫酸即析出白色沉淀，并发出醋酸的臭气。

3. 检查 溶液的澄清度 取本品0.50g，加入温热至约45℃的碳酸钠试液10mL溶解后，溶液应澄清。

游离水杨酸 取本品0.10g，加乙醇1mL溶解后，加冷水适量使成50mL，取盐酸溶液(9→100)1mL ，立即加新制的稀硫酸铁铵溶液〔取盐酸溶液（9→100）1mL,加硫酸铁铵指示液2mL 后，再加水适量使成100mL 〕1mL，摇匀；30秒内如显色，与对照液（精密称取水杨酸0.1g, 置1000mL量瓶中，加水溶解后，加冰醋酸1mL ，摇匀，再加水适量至刻度，摇匀，量取1mL ，加乙醇1mL 、水48mL与上述新制的稀硫酸铁铵溶液1mL ，摇匀）比较，不得更深(0.1％) 。

易炭化物 取本品0.5g，依法检查（中国药典2005版二部附录Ⅷ O），与对照液（取比色用氯化钴液0.25mL、比色用重铬酸钾液0.25mL、比色用硫酸铜液0.40mL，加水使成5mL）比较，不得更深。

炽烧残渣 不得过0.1%(实验一附录19中国药典2005版二部附录Ⅷ N)。

重金属 取本品1.0g，加乙醇23mL溶解后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL，依法检查（实验一附录20中国药典2005年版二部附录Ⅷ H 第一法），重金属含量不得过百万分之十。

4. 含量测定 取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20mL，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3 滴，滴加氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)40mL，置水浴上加热15分钟并振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液(0.05mol/L) 滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL 氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于18.02mg 的C9H8O4。 四、注意事项

1、一定要先调溶液的酸碱性。

2、应精密加入氢氧化钠滴定液20mL。 3、应用冰水浴使之迅速冷却。 五、思考题

1、阿司匹林与三氯化铁的呈色原理是什么？

2、请解释阿司匹林含量测定中要加两次氢氧化钠滴定液的理由

实验六附录

1. 碳酸钠试液 取一水合碳酸钠12.5g或无水碳酸钠10.5g,加水使溶解成100mL, 即得。 2. 硫酸铁铵指示液 取硫酸铁铵8g，加水100mL使溶解，即得。

3. 醋酸盐缓冲液 醋酸盐缓冲液(pH3.5) 取醋酸铵25g，加水25mL溶解后，加7mol/L盐酸溶液38mL，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5(电位法指示), 用水稀释至100mL，即得。

4. 硫酸滴定液(0.05mol/L)

H2SO4=98.08 4.904g→1000mL

【配制】 硫酸滴定液(0.5mol/L) 取硫酸30mL,缓缓注入适量水中,冷却至室 温，加水稀释至1000mL，摇匀。

硫酸滴定液(0.25mol/L、0.1mol/L或0.05mol/L) 照上法配制，但硫酸的取用量 分别为15mL、6.0mL或3.0mL。

【标定】 照盐酸滴定液(1mol/L、0.5mol/L、0.2mol/L或0.1mol/L) 项下的方法标定，即得。如需用硫酸滴定液(0.01mol/L)时，可取硫酸滴定液(0.5mol/L、0.1mol/L或0.05mol/L)加水稀释制成，必要时标定浓度。 5. 中国药典2005版二部附录Ⅷ O 易炭化物检查法 取内径一致的比色管两支：甲管中加各品种项下规定的对照液5mL；乙管中加硫酸[含H2SO4

94.5％～95.5％(g/g)]5mL后，分次缓缓加入规定量的供试品，振摇使溶解。除另有规定外，静置15分钟后，将甲乙两管同置白色背景前，平视观察，乙管中所显颜色不得较甲管更深。 供试品如为固体，应先研成细粉。如需加热才能溶解时，可取供试品与硫酸混合均匀，加热溶解后，放冷至室温，再移置比色管中。

附2 中华人民共和国专业标准 ZBC 10001—10007-8

药品检验操作标准成品检验报告书

编号：

品 名 包装规格 出厂编号 生产批次 （检号） 数 量 取样日期 年 月 日 取样件数 报告日期 年 月 日 依 据 检验结果： 判定： 质检科长 复核员 检验员

附3 中华人民共和国专业标准 ZBC 10001—10007-89

药品检验操作标准 标准液配制及标定记录

名 称 配制数量 配制日期 年 月 日

基准试剂名称 标定温度 标定日期 年 月 日 指示剂名称 复标温度 复标日期 年 月 日 配制方法： 配制人： 标定记录： 标定人： 复标记录： 复核人：

附：滴定管的正确使用方法

滴定管是滴定操作时准确测量标准溶液体积的一种量器。滴定管的管壁上有刻度线和数值，最小刻度为0.1毫升，“0”刻度在上，自上而下数值由小到大。滴定管分酸式滴定管和碱式滴定管两种。酸式滴定管下端有玻璃旋塞，用以控制溶液的流出。酸式滴定管只能用来盛装酸性溶液或氧化性溶液，不能盛碱性溶液，因碱与玻璃作用会使磨口旋塞粘连而不能转动，碱式滴定管下端连有一段橡皮管，管内有玻璃珠，用以控制液体的流出，橡皮管下端连一尖嘴玻璃管。凡能与橡皮起作用的溶液如AgNO3、KMnO4、I2溶液，均不能使用碱式滴定管。

一、酸式滴定管的使用方法

(1) 洗涤。通常滴定管可用自来水或管刷蘸洗涤剂（不能用去污粉）洗刷，而后用自来水冲洗干净，去离子水润洗3次。有油污的滴定管要用铬酸洗液洗涤。 (2) 给旋塞涂凡士林（起密封和润滑的作用）。将管中的水倒掉，平放在台上，把旋塞取出，用滤纸将旋塞和塞槽内的水吸干。用手指蘸少许凡士林，在旋塞芯两头薄薄地涂上一层（导管处不涂凡士林），然后把旋塞插入塞槽内，旋转几次，使油膜在旋塞内均匀透明，且旋塞转动灵活。

(3) 试漏。将旋塞关闭，滴定管里注满水，把它固定在滴定管架上，放置10分钟，观察滴定管口及旋塞两端是否有水渗出，旋塞不渗水才可使用。

(4) 滴定管内装入标准溶液后要检查尖嘴内是否有气泡。如有气泡，将影响溶液体积的准确测量。排除气泡的方法是：用右手拿住滴定管无刻度部分使其倾斜约30°角，左手迅速打开旋塞，使溶液快速冲出，将气泡带走。

(5) 装标准溶液。应先用标准液（5-6ml）润洗滴定管3次，洗去管内壁的水膜，以确保标准溶液浓度不变。方法是两手平端滴定管同时慢慢转动使标准溶液接触整个内壁，并使溶液从滴定管下端流出。装液时要将标准溶液摇匀，然后不借助任何器皿直接注入滴定管内。 (6) 进行滴定操作时，应将滴定管夹在滴定管架上。左手控制旋塞，大拇指在管前，食指和中指在后，三指轻拿旋塞柄，手指略微弯曲，向内扣住旋塞，避免产生使旋塞拉出的力。向里旋转旋塞使溶液滴出。滴定管应插入锥形瓶口1-2cm，右手持瓶，使瓶内溶液顺时针不断旋转。掌握好滴定速度（连续滴加，逐滴滴加，半滴滴加），终点前用洗瓶冲洗瓶壁，再继续滴定至终点。

(7) 滴定管使用完后，应洗净打开旋塞倒置于滴定管架上。

二、碱式滴定管的使用方法

(1) 试漏。给碱式滴定管装满水后夹在滴定管架上静置5分钟。若有漏水应更换橡皮管或管内玻璃珠，直至不漏水且能灵活控制液滴为止。

(2) 滴定管内装入标准溶液后，要将尖嘴内的气泡排出。方法是：把橡皮管向上弯曲，出口上斜，挤捏玻璃珠，使溶液从尖嘴快速喷出，气泡即可随之排掉。

(3) 进行滴定操作时，用左手的拇指和食指捏住玻璃珠中部靠上部位的橡皮管外侧，向手心方向捏挤橡皮管，使其与玻璃珠之间形成一条缝隙，溶液即可流出。 其他操作同酸式滴定管。

三、使用滴定管时还应注意以下几点：

(1) 滴定管使用前和用完后都应进行洗涤。洗前要将酸式滴定管旋塞关闭。管中注入水后，一手拿住滴定管上端无刻度的地方，一手拿住旋塞或橡皮管上方无刻度的地方，边转动滴定管边向管口倾斜，使水浸湿全管。然后直立滴定管，打开旋塞或捏挤橡皮管使水从尖嘴口流出。滴定管洗干净的标准是玻璃管内壁不挂水珠。

(2) 滴定管必须固定在滴定管架上使用。读取滴定管的读数时，要使滴定管垂直，视线应与弯月面下沿最低点在一水平面上，要在装液或放液后1－2分钟进行。有色溶液应使眼睛的视线与滴定管内溶液面两侧的最高点呈水平处。第一次读数时必须先调整液面在0.00刻度或0-1刻度之间。读至小数点后第二位（0.01ml），见右图。

(3) 滴定前，滴定管尖嘴部分不能留有气泡，尖嘴外不能挂有液滴；滴定终点时，滴定管尖嘴外若挂有液滴，其体积应从滴定液（通常为标准液）中扣除，标准的酸式滴定管，1滴为0.05mL。

(4) 滴定时要用酸碱的稀溶液，滴定过程中眼睛应看着锥形瓶中颜色的变化，而不能看滴定管。

(5) 滴速：先快滴后慢滴（不能连成水柱），当接近终点时，应一滴一摇。

(6) 终点：最后一滴刚好使指示剂颜色发生明显的改变而且0.5min内不恢复原色，读出末体积，记录。

四、指示剂的选择

1．酚酞：酸滴定碱时，颜色由红到刚好褪色。碱滴定酸时，颜色由无色到刚好变红。 2．甲基橙：酸滴定碱时，颜色由黄到橙色。碱滴定酸时，颜色由红到橙色。

3．石蕊：变色不明显，不宜观察滴定终点溶液颜色变化，故中和滴定一般不用石蕊指示剂。

4．强酸与弱碱的中和滴定，应选择甲基橙作指示剂。强碱与弱酸中和滴定时，应选择酚酞作指示剂。强酸与强碱中和滴定时可以选择酚酞或甲基橙。

五、误差分析

（一）偏高。常见情况如下：

1．装标准溶液的滴定管水洗后没润洗，即装标准溶液。 2．锥形瓶用待测液润洗。

3．滴定前盛标准溶液的滴定管在尖嘴内有气泡，滴定后气泡消失。 4．滴定后滴定管尖嘴处悬有液滴。

5．滴定时将标准液溅出锥形瓶外。

6．移液管量取待测液溶液时没有遵守自流原则，而用嘴吹。 7．滴定后仰视式读数。 8．滴定前俯视式读数。

（二）偏低。常见情况如下：

1．用滴定管（或移液管）取待测溶液时，将滴定管（或移液管）用水洗后未润洗即取待测液。

2．滴定时待测液溅出。 3．滴定前仰视式读数。 4．滴定后俯视式读数。

本文来源：https://www.bwwdw.com/article/07gt.html