2010版GMP环境监控(EM)微生物数据处理原则探讨

2010版GMP环境监控(EM)微生物数据处理原则探讨

2010版GMP环境监控（EM）微生物数据处理原则探讨

2010版GMP正在深刻影响着中国制药企业，相关企业都在积极准备，厉兵秣马，准备认证工作。由于2010版GMP附录1几乎全文译自EU GMP附录1，对中国无菌制药企业提出很高的要求，因此很多技术话题，在中国制药技术人员中产生较多的困惑和争论。

本技术资料，主要讨论无菌制药企业环境监控（environment monitoring=EM）中微生物监测项目的数据评估问题。

沉降菌测试，属于一种监测洁净室/洁净区环境质量的被动监控手段，由于操作简单，在无菌制药企业经常使用。

【问题缘起】

质量控制实验室与物料一本285

页提到如下要求：

那么，在实施2010版GMP过程中，是否需要在A/B/C级洁净室(洁净区)对环境监控培养皿进行逐个计数吗？

如果一个A级洁净室布置有2个培养皿，经过培养，一个符合标准，一个不符合标准，而平均值符合标准，最后对于本批次产品放行，如何评估和决策？ 本着动态更新信息、循证法规、参考权威机构的意见的态度，本人先后致函FDA/EMA GMP委员会/EDQM专家组，并参考大量法规和技术指南，汇总论证结果下：

【2010版GMP附录1】

2010版GMP附录1《无菌药品》第十一条写明：表中各数值均为平均值。截图如

下：

2010版GMP环境监控(EM)微生物数据处理原则探讨

这一条款明确说明，对于洁净区环境监控项目，最后微生物项目数据取平均值。而且不分级别，都取平均值。

【EU GMP附录1】核实EU GMP附录1（200903版）

，内容如下：

可以看到，EU GMP附录1也明文注明，微生物监控项目数值取平均值。 按理，到此为止，此问题可以结束。中国GMP2010版指南上面提供的信息是错误的，或者说是不准确的。

但是本着坚持科学发展观的态度，笔者分别致函FDA/EMA/EDQM，并核实大量相关法规和指南文献。

【法规依据核实和论证】

1. FDA指南文本内容：可以看到，对于关键区域（critical area）的100级，要求微生物限度是1。但是仔细看下面脚注，说明环境监控时，100级区域的监测结果应该是0，不允许出现微生物阳性的情况

。

这一点很重要，告诉我们，监控项目数据报告结果，和最后产品放行结果，不是简单对应关系，要慎重评估。

2. GB16294-2010版内容核实：截图如下

2010版GMP环境监控(EM)微生物数据处理原则探讨

大家可以看到，这份国标尽管版本修订到2010版，但是由于修订者对于无菌制药经验缺乏，对于环境监控项目没有深刻理解，计数规则还是沿用1998版GMP思维，只要每个测试点平均值合格，即可判定合格，显得处理问题过于简单和机械了。

3. EU GMP附录1注释核实

2010年初，PIC 发布了EU GMP附录1注释，全名是《GMP ANNEX 1 REVISION 2008,INTERPRETATION OF MOST IMPORTANT CHANGES FOR THE MANUFACTURE OF STERILE MEDICINAL PRODUCTS》。

相关内容如下：

4.3 Microbiological monitoring

There are no changes to the provisions for microbiological monitoring (sections 18 and 19).

However, it is important to note that for critical sampling locations in grade A areas where aseptic operations are performed, every found microorganism should result in a thorough investigation, the

microorganism has to be identified and impact on batch release should be considered. An additional comment should be made on the limits for settle plates. These limits are interpreted as limit per settle plate. Also, the same limits apply when sampling time is less than 4 hours, e.g. for operations being shorter than 4 hours.

译文：然而，重要的是要注意到，对于A级区关键取样位置，而无菌操作也在这个区域进行，对于每个发现的微生物监测结果，都应该进行彻底的调查，这个监测到的微生物必须被鉴别，并考虑可能影响到批次放行。对于每个沉降碟，都需要针对限度进行额外评价。这个限度被解释为每个沉降碟限度。同样，当取样时间少于4小时，例如操作时间短于4小时，也要采用相同的限度。

4. 法规机构邮件回复结果

4.1到最后，EDQM没有回复这个问题。

4.2FDA回复如下：

According to the previously provided 2004 Aseptic guidance (page 32): "Detection of microbial contamination on a critical site would not necessarily result in batch rejection. The contaminated critical site sample should prompt an investigation of operational information and data

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that includes an awareness of the potential for a low incidence of false positives.......In the absence of any adverse trend, a single result above an action level should trigger an evaluation and a determination about whether remedial measures may be appropriate."

4.3EMA回复如下：

You will find some clarification of this topic in the PIC/S document PI 032-2 dated 8 January 2010, e.g. in section 4.3 (for grade A). Nevertheless, for grade B, C and D and for others methods, ISO 14698-2:2003 should be used. In this ISO norm, it is recommended to have a statistical approach for the interpretation of microbiological data. Trend analyses on raw data are also proposed.

【综合结论】

综上所述，结合各类法规、指南、专家意见和自己的思考，建议如下：

1- A级区环境监控：因为A级区空气气流流形是层流，每个取样碟的结果，可以较直观反映垂直上方的空气质量。而且A级是直接影响无菌产品质量的关键区域，因此这个区域任何监控中发现的微生物，都需要进行彻底调查，并根据调查结果来决定产品批次是否放行。

数据报告形式，应该在原始记录体现每个监控碟的原始结果，最后以平均值报告这个区域的监测结果。

2.B级区属于A级区的支持区域，气流流形不属于层流，而是属于乱流（紊流）。因此对于B级区，数据报告结果可以采用平均值结果进行报告（也可以采用ISO14698-2中的统计方法），每个碟子原始结果在记录里面保存，不必体现在环境监控报告中。对于B级区域，如果某个监控点持续出现结果超标现象，也要进行彻底调查。

3.C级区和D级区域，这2个区域，都属于辅助区域，气流流形属于乱流（紊流）。 数据报告形式以平均值形式报告；如果监测结果超标，进行相应调查即可。C/D级区域监控结果，对于批次放行，影响很小。

D．即使关键区域微生物监测结果不符合要求，也不代表某个批次必然不合格，需要根据彻底调查的结果，进行综合评估后，进行判断。调查过程请参考PDA TR《Points to Consider When Investigating Microbiological Data Deviations (MDD)》进行。

参考文献：

1. EMA 关于此问题答复邮件；

2. FDA关于此问题答复邮件；

3. EDQM关于此问题答复邮件；

4. PIC 《GMP ANNEX 1 REVISION 2008,INTERPRETATION OF MOST IMPORTANT CHANGES FOR THE MANUFACTURE OF STERILE MEDICINAL PRODUCTS》

5. EU GMP附录1

6.FDA指南《Sterile Drug ProductsProduced byAseptic Processing》

7.PDA TR13 <Fundamentals of an Environmental Monitoring Program>2001版

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8.中国《药品生产质量管理规范》（2010年修订版）

9.中国GMP（2010版）指南

10.GB16294-2010《医药工业洁净室产沉降菌检测方法》

11.ISO 14698-2（2003版）.

仅供参考，有不同宝贵意见或者建议，请联系zhulikou431@。

本文来源：https://www.bwwdw.com/article/05be.html